植物滲(shen)調蛋白(Osmotins)ELISA試(shi)劑(ji)盒

植物滲(shen)調蛋白(Osmotins)ELISA試(shi)劑(ji)盒

ELISA法(fa)是(shi)免(mian)疫診(zhen)斷中的壹項(xiang)新(xin)技術(shu)，現已(yi)成(cheng)功地(di)應用(yong)於(yu)多(duo)種(zhong)病(bing)原(yuan)微(wei)生物所(suo)引(yin)起的傳(chuan)染(ran)病(bing)、寄(ji)生蟲病(bing)及(ji)非(fei)傳(chuan)染(ran)病(bing)等方(fang)面(mian)的免疫診(zhen)斷。也(ye)已(yi)應(ying)用(yong)於大(da)分(fen)子抗原(yuan)和(he)小分子抗原(yuan)的定量測定(ding)，根(gen)據(ju)已(yi)經使用的結果(guo)，認為ELISA法(fa)具(ju)有靈敏、特異(yi)、簡單(dan)、快(kuai)速、穩定及易(yi)於自動(dong)化操(cao)作(zuo)等特(te)點(dian)。不僅(jin)適(shi)用(yong)於(yu)臨床標(biao)本的檢查，而且(qie)由(you)於(yu)壹天(tian)之(zhi)內(nei)可(ke)以檢查幾百甚(shen)至上(shang)千(qian)份標(biao)本,因(yin)此，也(ye)適合(he)於(yu)血清流行(xing)病(bing)學(xue)調查。本法(fa)不(bu)僅(jin)可(ke)以用來測定(ding)抗ti，而且(qie)也(ye)可(ke)用於(yu)測定(ding)體(ti)液中的循環抗原(yuan)，所(suo)以也(ye)是壹種(zhong)早(zao)期(qi)診(zhen)斷的良(liang)好(hao)方(fang)法(fa)。因(yin)此(ci)ELISA法(fa)在(zai)生物醫(yi)學(xue)各領域(yu)的應用範圍(wei)日益(yi)擴大(da)，

免(mian)責聲明

1. 試(shi)劑(ji)盒僅(jin)供研(yan)究(jiu)使用，不(bu)得(de)用於臨(lin)床實(shi)驗或人(ren)體(ti)實驗，否則所(suo)產生的壹切(qie)後果(guo)，由(you)實(shi)驗者(zhe)承擔(dan)，本公(gong)司(si)概不(bu)負(fu)責。

2. 嚴格按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)操(cao)作(zuo)，實(shi)驗者(zhe)違反(fan)說(shuo)明(ming)書(shu)操(cao)作(zuo)，後果(guo)由(you)實(shi)驗者(zhe)承擔(dan)。

3. 產(chan)品(pin)特點(dian)

壹、高(gao)效(xiao)、靈(ling)敏、特(te)異(yi)的抗ti；

二(er)、穩(wen)定(ding)的重復性(xing)和(he)可(ke)靠(kao)性(xing)；

三、吸(xi)附(fu)性(xing)能(neng)好(hao)，空白值低(di)，孔底透明度高的固相載體(ti)；

四、適(shi)用血清、血漿(jiang)、組織勻漿(jiang)液、細胞培(pei)養上清液、尿(niao)液等等多(duo)種(zhong)標(biao)本類(lei)型；

五(wu)、節省(sheng)實(shi)驗經費。

elisa試(shi)劑(ji)盒回(hui)收(shou)率(lv)是(shi)反(fan)應(ying)待(dai)測物(wu)在(zai)樣(yang)品(pin)分析(xi)過(guo)程(cheng)中的損失的程(cheng)度，損失越少(shao)，回(hui)收率(lv)越高，如果(guo)作(zuo)標(biao)液1PPM，就(jiu)是1毫(hao)克(ke)/升(sheng)，而(er)作(zuo)出(chu)標(biao)準(zhun)數(shu)據(ju)為0.99毫(hao)克(ke)/升(sheng)，就(jiu)是(shi)說(shuo)妳的回收率(lv)是(shi)99%，這個與真(zhen)實(shi)成分有密切(qie)的關系，說明(ming)方(fang)法(fa)的準(zhun)確度。比(bi)如水(shui)中總無機氯含(han)量測定(ding)，樣(yang)品水中含有無機氯20mg/L，取(qu)100mL被(bei)測水(shui)樣(yang)品，加入(ru)0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯(lv)標(biao)準(zhun)樣(yang)品，測定(ding)時(shi)忽略體(ti)積(ji)變(bian)化，如果(guo)測定(ding)出(chu)樣(yang)品(pin)中無機氯為29.8mg/L，則(ze)認為回(hui)收率(lv)為99%。

植物滲(shen)調蛋白(Osmotins)ELISA試(shi)劑(ji)盒

組成(cheng)結構(gou)

1、血清：操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中避免任(ren)何(he)細胞刺(ci)激。使用不(bu)含(han)熱原(yuan)和(he)內(nei)du素(su)的試管。收集(ji)血液後，1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血紅(hong)細胞迅(xun)速小心地(di)分離(li)。

2、血漿(jiang)：EDTA、檸檬suan鹽(yan)、肝素(su)血漿(jiang)可(ke)用於(yu)檢測。1000×g離(li)心30分(fen)鐘(zhong)去除顆(ke)粒(li)。

3、細胞上清液：1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)去除顆(ke)粒(li)和(he)聚(ju)合(he)物(wu)。

4、組織勻漿(jiang)：將(jiang)組織加入(ru)適(shi)量生理鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎。1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)，取上(shang)清液。

5、保(bao)存：如果(guo)樣品不(bu)立(li)即(ji)使用，應(ying)將(jiang)其分成(cheng)小部(bu)分-70℃保(bao)存，避免反(fan)復(fu)冷(leng)凍。盡(jin)可(ke)能(neng)的不要使用溶(rong)血或高(gao)血脂血。如果(guo)血清中大(da)量顆(ke)粒(li)，檢測前(qian)先(xian)離(li)心或過(guo)濾(lv)。不要在(zai)37℃或更高的溫度加熱解凍(dong)。應在(zai)室溫下解凍(dong)並確保樣(yang)品均勻地(di)充分(fen)解(jie)凍(dong)。

試劑(ji)盒成(cheng)分(fen)

1 預包被(bei)板(ban): 抗小鼠白(bai)介素-6兔子IgG,親(qin)合(he)純(chun)化 96T

2 酶標(biao)記(ji)抗ti: (30倍(bei)濃縮)HRP標(biao)記(ji)抗小鼠白(bai)介素-6兔子IgG,親(qin)合(he)純(chun)化 0.4mL x 1

3 標(biao)準(zhun)品(pin): 重組小鼠白(bai)介素-6 0.5mL x 2

4 EIA緩(huan)沖液: 含(han)1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

5 標(biao)記(ji)抗ti稀(xi)釋(shi)液: 含(han)1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

6 顯色(se)劑(ji): TMB底物(wu)液 15mL x 1

7 終止(zhi)液: 1N硫(liu)suan 12mL x 1

8 濃縮洗滌液: (40倍(bei)濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操(cao)作(zuo)說(shuo)明(ming) 1實(shi)驗所(suo)需器材(cai)(但試(shi)劑(ji)盒沒有提(ti)供) 酶(mei)標(biao)儀(450nm) 微(wei)移液管及其吸嘴(zui) 量筒及(ji)燒杯 去離(li)子水(shui) 冰箱(xiang)(4°C) 坐(zuo)標(biao)紙(log/log) 吸水(shui)紙 試管(用於(yu)標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)) 溫育箱(xiang)(37°C ± 1°C) 洗瓶(ping) (用(yong)於(yu)洗(xi)板(ban)) 壹次(ci)性(xing)試(shi)劑(ji)管(用於(yu)濃縮酶標(biao)記(ji)抗ti和(he)顯(xian)色(se)劑(ji))

常(chang)用方(fang)法(fa)及(ji)原(yuan)理如下：

1. 夾心法(fa)：

夾心法(fa)常(chang)用(yong)於(yu)檢測大(da)分(fen)子抗原(yuan)，壹般(ban)的操(cao)作(zuo)步(bu)驟為:

a. 將(jiang)具(ju)有專壹性(xing)的抗ti固著（coating）於(yu)塑(su)膠孔盤上(shang)，完成後洗去多(duo)余抗ti

b. 加入(ru)待(dai)測檢體，檢體中若含有待測的抗原(yuan)，則(ze)其會(hui)與塑(su)膠孔盤上(shang)的抗ti進行(xing)專(zhuan)壹性(xing)鍵(jian)結

c. 洗去(qu)多(duo)余待測檢體，加入(ru)另(ling)壹種(zhong)對抗原(yuan)專(zhuan)壹的壹次(ci)抗ti，與待(dai)測抗原(yuan)進(jin)行(xing)鍵(jian)結

d. 洗去(qu)多(duo)余未鍵(jian)結壹次(ci)抗ti，加入(ru)帶(dai)有酶的二(er)次(ci)抗ti，與壹次(ci)抗ti鍵(jian)結

e. 洗去(qu)多(duo)余未鍵(jian)結二(er)次(ci)抗ti，加入(ru)酶(mei)底(di)物(wu)使酵(jiao)素(su)呈(cheng)色，以肉(rou)眼(yan)或儀(yi)器(qi)讀取呈(cheng)色(se)結果(guo)

原(yuan)理：針(zhen)對抗原(yuan)分(fen)子上(shang)2個不同(tong)抗原(yuan)決定簇的單(dan)克(ke)隆(long)抗ti分別(bie)作(zuo)為固(gu)相抗ti和(he)酶(mei)標(biao)抗ti，將(jiang)大(da)分(fen)子抗原(yuan)分(fen)別制備固相抗原(yuan)和(he)酶(mei)標(biao)抗原(yuan)結合(he)物(wu)。

2. 間接法(fa)

間接法(fa)常(chang)用(yong)於(yu)檢測抗ti，壹般(ban)的操(cao)作(zuo)步(bu)驟為：

a. 將(jiang)已(yi)知(zhi)的抗原(yuan)固(gu)著於(yu)塑(su)膠孔盤上(shang)，完成後洗去多(duo)余的抗原(yuan)。

b. 加入(ru)待(dai)測檢體，檢體中若含有待測的壹次(ci)抗ti，則其會(hui)與塑(su)膠孔盤上(shang)的抗原(yuan)進(jin)行(xing)專(zhuan)壹性(xing)鍵(jian)結。

c. 洗去(qu)多(duo)余待測檢體，加入(ru)帶(dai)有酶的二(er)次(ci)抗ti，與待(dai)測的壹次(ci)抗ti鍵(jian)結。

d. 洗去(qu)多(duo)余未鍵(jian)結二(er)次(ci)抗ti，加入(ru)酶(mei)底(di)物(wu)使酶呈(cheng)色(se)，藉儀(yi)器(qi)（ELISA reader）測定(ding)塑(su)膠盤中的吸光值（OD值），以評(ping)估有色終產(chan)物的含量即(ji)可(ke)測量待(dai)測抗ti的含量。

原(yuan)理：利(li)用酶標(biao)記(ji)的抗抗ti以檢測已(yi)與(yu)固(gu)相結合(he)的受檢抗ti。

3. 競爭法(fa)

競(jing)爭法(fa)是(shi)壹種(zhong)較(jiao)少(shao)用(yong)到(dao)的ELISA檢測機(ji)制，壹般(ban)用(yong)於(yu)檢測小分子抗原(yuan)，其操(cao)作(zuo)步(bu)驟為：

a. 將(jiang)具(ju)有專壹性(xing)的抗ti固著於(yu)塑(su)膠孔盤上(shang)，完成後洗去多(duo)余抗ti

b. 加入(ru)待(dai)測檢體，使檢體中的待測抗原(yuan)與(yu)塑(su)膠孔盤上(shang)的抗ti進行(xing)專(zhuan)壹性(xing)鍵(jian)結

c. 加入(ru)帶(dai)有酶的抗原(yuan)，此(ci)抗原(yuan)也(ye)可(ke)與塑(su)膠孔盤上(shang)的抗ti進行(xing)專(zhuan)壹性(xing)鍵(jian)結，由(you)於(yu)塑(su)膠孔盤上(shang)固(gu)著的抗ti數(shu)量有限，因此當(dang)檢體中抗原(yuan)的量越多(duo)，則帶(dai)有酶的抗原(yuan)可(ke)鍵(jian)結的固著抗ti就越少(shao)，亦即(ji)，兩(liang)種(zhong)抗原(yuan)皆競相與塑(su)膠孔盤上(shang)抗ti鍵(jian)結，即(ji)所謂(wei)競爭法(fa)之(zhi)由(you)來(lai)。

d. 洗去(qu)檢體與帶(dai)有酶的抗原(yuan)，加入(ru)酶(mei)底(di)物(wu)使酶呈(cheng)色(se)，當(dang)檢體中抗原(yuan)量越多(duo)，代表(biao)塑(su)膠孔盤內(nei)留下之(zhi)帶(dai)有酶的抗原(yuan)越少(shao)，顯(xian)色也(ye)就越淺(qian)。

e. 當(dang)需要偵測無(wu)法(fa)獲(huo)得(de)兩(liang)種(zhong)以上單(dan)壹性(xing)抗ti的抗原(yuan)，或是(shi)不(bu)易(yi)得到(dao)足(zu)夠(gou)的純化抗ti以固著於(yu)孔盤上(shang)時(shi)，壹般(ban)會(hui)考慮(lv)使用競(jing)爭法(fa)ELISA。

常見(jian)問題解析(xi)：

1、試劑(ji)的選(xuan)擇：選(xuan)擇優(you)良(liang)試(shi)劑(ji)大(da)家(jia)都(dou)是(shi)知(zhi)道(dao)的，但是(shi)在(zai)檢測之(zhi)前(qian)還(hai)應該(gai)提(ti)前半(ban)個小時將(jiang)試(shi)劑(ji)拿到(dao)常(chang)溫下進行(xing)解(jie)凍(dong)。

2、加樣中可(ke)能(neng)遇(yu)到(dao)的問題。

3、洗(xi)板(ban)時(shi)容易(yi)造(zao)成(cheng)誤(wu)差。

4、顯(xian)色問題：使用了(le)過期(qi)的顯色劑(ji)或者(zhe)是(shi)顯色劑(ji)用過(guo)後放置(zhi)時間太(tai)長，都有可(ke)能(neng)造(zao)成(cheng)顯(xian)色劑(ji)不顯(xian)色(se)。

5、終止(zhi)反(fan)應(ying)：在(zai)加終止(zhi)劑(ji)的時候由(you)於(yu)傾(qing)倒(dao)速度快(kuai)，產生氣泡(pao)，造(zao)成(cheng)假陽性(xing)結果(guo)，所以在(zai)倒(dao)終止(zhi)劑(ji)的時候要緩慢(man)倒(dao)。

6、讀(du)板(ban)：讀(du)板(ban)的時候首先(xian)應(ying)該保證(zheng)板(ban)的清潔幹(gan)凈(jing)。

訂(ding)購說明:

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