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          依(yi)維菌生(sheng)素(su)

          依(yi)維菌生(sheng)素(su)
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          依(yi)維菌生(sheng)素(su)

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          操(cao)作流(liu)程:

          1.從室(shi)溫平衡20min後(hou)的(de)鋁(lv)箔袋中取(qu)出(chu)所需板(ban)條(tiao),剩余(yu)板(ban)條(tiao)用自(zi)封(feng)袋密(mi)封(feng)放回4℃。

          2. 設置(zhi)標(biao)準品(pin)孔和(he)樣(yang)本(ben)孔,標(biao)準品(pin)孔各加(jia)不(bu)同濃度(du)的標(biao)準品(pin)50μL;

          3. 樣(yang)本(ben)孔中加(jia)入(ru)待(dai)測(ce)樣(yang)本(ben)50μL;空白孔(kong)不(bu)加。

          4. 除(chu)空白孔(kong)外(wai),標(biao)準品(pin)孔和(he)樣(yang)本(ben)孔中每(mei)孔(kong)加入(ru)辣根過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(HRP)標(biao)記(ji)的(de)檢測(ce)抗體100μL,用封(feng)板膜(mo)封(feng)住(zhu)反(fan)應(ying)孔,37℃水(shui)浴(yu)鍋(guo)或(huo)恒溫箱溫育60min。

          5. 棄去液體,吸(xi)水(shui)紙(zhi)上拍(pai)幹,每(mei)孔(kong)加滿(man)洗滌(di)液(350μL),靜置(zhi)1min,甩去洗滌(di)液,吸水(shui)紙(zhi)上拍(pai)幹,如(ru)此重復洗(xi)板(ban)5次(ci)(也(ye)可(ke)用(yong)洗(xi)板機(ji)洗板(ban))。

          6. 每孔加(jia)入(ru)底物(wu)A、B各50μL,37℃避光(guang)孵(fu)育15min。

          7. 每孔加(jia)入(ru)終止(zhi)液50μL,15min內(nei),在450nm波長處(chu)測(ce)定(ding)各孔(kong)的(de)OD值(zhi)。

          依(yi)維菌生(sheng)素(su)

          優點(dian)如(ru)下:

          1、快速簡便:操(cao)作時間短,48-50T,可測(ce)40例(li)樣(yang)本(ben)左右(you),96-100T,可(ke)測(ce)80例(li)樣(yang)本(ben)左右(you);

          2、取樣(yang)量(liang)微:常規(gui)操(cao)作取(qu)樣(yang)量(liang)50l, 酶(mei)標(biao)儀操(cao)作僅(jin)需(xu)5l即(ji)可(ke)檢測(ce),部分試(shi)劑(ji)盒(he)取樣(yang)多(duo)少(shao)請(qing);

          3、穩定(ding)性好(hao):試(shi)劑(ji)盒(he)2~8℃存放3個月有(you)效;

          4、再(zai)現(xian)性好(hao):20倍(bei)稀釋線(xian)性仍然(ran)良(liang)好(hao);

          5、回收(shou)試(shi)驗(yan): X =99%;

          6、受外(wai)界(jie)影(ying)響(xiang)因(yin)素(su)小(xiao):幹擾(rao)因(yin)素(su)少(shao),重復性(xing)強(qiang);

          7、測(ce)試(shi)面(mian)廣:可(ke)測(ce)動物血(xue)清(漿)、組(zu)織(zhi)、各種(zhong)體液、灌(guan)流(liu)液、各種(zhong)培養細胞以及細胞(bao)培養上清液等,部分試(shi)劑(ji)盒(he)適用於(yu)檢測(ce)植(zhi)物(wu),歡(huan)迎(ying)

          儀器:

          1、分光光度(du)計/酶(mei)標(biao)儀/生(sheng)化分析(xi)儀(比(bi)色測(ce)定(ding)波長為(wei)550nm)

          2、恒溫水(shui)浴(yu)箱或(huo)氣(qi)浴(yu)箱 (孵育(yu)溫度(du)為37℃)

          3、臺式離心機(ji)

          4、漩渦混(hun)勻(yun)器

          5、微量(liang)移液器

          使用須知:

          (1)請參照(zhao)相(xiang)關(guan)法(fa)規、文獻、MSDs等信息,理(li)解(jie)並(bing)掌(zhang)握(wo)好(hao)試(shi)劑(ji)的(de)特(te)性,再(zai)進(jin)行(xing)安全操(cao)作。

          (2)通常購買試(shi)劑(ji)時壹定(ding)要(yao)想(xiang)到--次(ci)性(xing)用(yong)完(wan)。若(ruo)估(gu)算(suan)不(bu)足有(you)剩(sheng)余(yu)的(de)話,更(geng)加註意(yi)其(qi)他(ta)保管和(he)管理(li)。

          (3)萬(wan)壹(yi)-試(shi)劑(ji)操(cao)作者並(bing)非(fei)專(zhuan)業(ye)技術(shu)人員(yuan)。必須在專(zhuan)業(ye)人(ren)士(shi)的指(zhi)導(dao)監督(du)下(xia)進(jin)行(xing)操(cao)作。對(dui)於使用後(hou)的(de)廢棄物(wu),不(bu)要(yao)或(huo)者舊(jiu)的試(shi)劑(ji),應(ying)按照(zhao)相關(guan)法(fa)律法規(gui)正當處理(li)。

          (4)購買後(hou),請(qing)務必確(que)認(ren)標(biao)簽上(shang)的註意(yi)事(shi)項;做好(hao)預(yu)防(fang)顛倒(dao),摔壞的(de)措(cuo)施(shi)和(he)管理(li)體(ti)制;在使用前(qian)再(zai)次(ci)確(que)認(ren)標(biao)簽上(shang)的註意(yi)事(shi)項,做好(hao)必要(yao)的(de)安(an)全對策(ce);對沒有(you)標(biao)明(ming)其(qi)危害(hai)特(te)性、有(you)害(hai)特(te)性的(de),也要(yao)慎(shen)重地(di)進(jin)行(xing)操(cao)作;必須帶好(hao)防(fang)護用具(ju),小(xiao)心翼翼進(jin)行(xing)操(cao)作。

          生(sheng)化試(shi)劑(ji)的(de)種(zhong)類與(yu)等(deng)級說明(ming):

          (1)免疫試(shi)劑(ji)包(bao)括抗(kang)體及抗血(xue)清、正常血清及補(bu)體、抗(kang)原(yuan)、免疫組織(zhi)化學(xue)研究(jiu)用(yong)試(shi)劑(ji)、細(xi)胞(bao)培養用試(shi)劑(ji)、細(xi)胞(bao)分離試(shi)劑(ji)、凝膠(jiao)內(nei)擴(kuo)散(san)法及電泳(yong)試(shi)劑(ji)等(deng)。

          (2)基因(yin)工(gong)程用試(shi)劑(ji)包(bao)括基(ji)因(yin)表達(da)與(yu)基(ji)因(yin)重組(zu)、人(ren)工(gong)合成(cheng)蛋白(bai)、激素(su)、核酸(suan)合成(cheng)試(shi)劑(ji)、內(nei)切酶等。

          (3)誘變劑(ji)和(he)主要(yao)供測(ce)定(ding)工(gong)作場(chang)所與(yu)生(sheng)活環境中的(de)毒(du)物(wu)質的致(zhi)癌(ai)性與(yu)化(hua)學毒(du)物(wu)的(de)致(zhi)突變性(xing)。

          (4)工(gong)業(ye)用(yong)化(hua)學(xue)品包括試(shi)制(zhi)開(kai)發的(de)工(gong)業(ye)用(yong)化(hua)學(xue)品,有(you)四(si)千(qian)種(zhong)以上,還在不(bu)斷增加(jia)。

          樣(yang)本(ben)收(shou)集(ji)與(yu)前(qian)處(chu)理(li):

          血清(漿)可直接測(ce)定(ding)。

          紅細胞(bao):需按照(zhao)試(shi)劑(ji)盒(he)中說明(ming)書(shu)上紅細胞(bao)的(de)測(ce)定(ding)方法(fa)進(jin)行(xing)提取(qu)後(hou)測(ce)定(ding)。

          動物組(zu)織(zhi)樣(yang)本(ben):可用生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)按重量(liang)體(ti)積比(bi)制(zhi)備(bei)成(cheng)組(zu)織(zhi)勻(yun)漿液,離心(xin)取(qu)上(shang)清測(ce)定(ding)。

          培養細胞、細菌、植(zhi)物(wu)組(zu)織(zhi):常用PBS作(zuo)為(wei)勻(yun)漿介質破碎後(hou)離(li)心取上(shang)清測(ce)定(ding)。

          具(ju)體(ti)的樣(yang)本(ben)前(qian)處(chu)理(li):參考我(wo)們(men)隨貨(huo)發送(song)的(de)《實驗方法(fa)學》以及試(shi)劑(ji)盒(he)中詳(xiang)細說明(ming)書(shu)。

          實驗結果(guo)判(pan)斷我(wo)有(you)妙(miao)招(zhao):

          1、定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)結果(guo)根據標(biao)準曲(qu)線計(ji)算(suan)樣(yang)品中待(dai)測(ce)物(wu)的(de)含量(liang)。

          2、以樣(yang)品孔的OD值(zhi)大(da)於(yu)陰(yin)性(xing)對照(zhao)OD值(zhi)+2~3SD,作(zuo)為(wei)陽(yang)性結(jie)果(guo)的閾(yu)值(zhi)。

          3、以P/N值(zhi)(陽(yang)性孔(kong)OD值(zhi)/陰(yin)性(xing)孔OD值(zhi))大(da)於(yu)或(huo)等於2.1為(wei)陽(yang)性,P/N值(zhi)小(xiao)於(yu)2.1,但大(da)於(yu)1.5為(wei)可(ke)疑,P/N小於1.5為(wei)陰(yin)性(xing)。

          4、ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)目測(ce)定(ding)性法(fa):加(jia)入(ru)底物(wu)經(jing)酶(mei)解(jie)和(he)終止(zhi)反(fan)應(ying)後(hou),肉(rou)眼(yan)觀察(cha)陽(yang)性孔(kong)顏(yan)色明(ming)顯深於(yu)(競爭(zheng)法(fa)則(ze)淺於(yu))陰(yin)性(xing)對照(zhao),與(yu)陰(yin)性(xing)對照(zhao)的顏(yan)色接近者,判(pan)定(ding)為陰(yin)性(xing)。

          為了達(da)到準(zhun)確的(de)實驗結果(guo),取用試(shi)劑(ji)時應(ying)遵(zun)守以(yi)下規則(ze),以保證(zheng)試(shi)劑(ji)不(bu)受汙染和不(bu)變質:

          (1)試(shi)劑(ji)不(bu)能與(yu)手接觸。

          (2)要(yao)用(yong)潔(jie)凈的藥(yao)勺(shao),量(liang)筒(tong)或(huo)滴(di)管取(qu)用(yong)試(shi)劑(ji),*不(bu)準用同壹種(zhong)工(gong)具(ju)同時連(lian)續取用多(duo)種(zhong)試(shi)劑(ji)。取(qu)完(wan)壹(yi)種(zhong)試(shi)劑(ji)後(hou),應(ying)將(jiang)工(gong)具(ju)洗(xi)凈(藥(yao)勺(shao)要(yao)擦(ca)幹)後(hou),方(fang)可取用(yong)另(ling)壹種(zhong)試(shi)劑(ji)。

          (3)試(shi)劑(ji)取(qu)用(yong)後(hou)壹(yi)定(ding)要(yao)將(jiang)瓶塞蓋緊(jin),不(bu)可放錯(cuo)瓶蓋和(he)滴(di)管,絕不(bu)允許(xu)張(zhang)冠李(li)戴(dai),用(yong)完後(hou)將(jiang)瓶放回原(yuan)處。

          (4)已(yi)取出(chu)的試(shi)劑(ji)不(bu)能再(zai)放回原(yuan)試(shi)劑(ji)瓶內(nei)。

          另(ling)外取(qu)用試(shi)劑(ji)時應(ying)本(ben)著(zhe)節約(yue)精神,盡可能(neng)少(shao)用,這樣(yang)既便於操(cao)作和(he)仔(zai)細(xi)觀察(cha)現(xian)象(xiang),又(you)能得到較(jiao)好(hao)的(de)實驗結果(guo)。





























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