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          犬傳(chuan)染(ran)性(xing)腹(fu)膜(mo)炎IP ELISA試(shi)劑盒

          犬傳染性(xing)腹(fu)膜(mo)炎IP ELISA試(shi)劑盒
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          ELISA法是免疫(yi)診斷(duan)中(zhong)的(de)壹(yi)項新技術,現已(yi)成功(gong)地(di)應(ying)用(yong)於(yu)多種(zhong)病原微生物(wu)所(suo)引(yin)起(qi)的(de)傳(chuan)染(ran)病、寄生蟲病及非傳染(ran)病(bing)等(deng)方面的(de)免疫(yi)診斷(duan)。也(ye)已(yi)應(ying)用(yong)於(yu)大(da)分(fen)子抗原(yuan)和(he)小(xiao)分(fen)子抗原(yuan)的(de)定(ding)量(liang)測(ce)定(ding),根(gen)據已(yi)經使(shi)用(yong)的(de)結(jie)果,認(ren)為(wei)ELISA法具有(you)靈(ling)敏、特(te)異(yi)、簡單、快速、穩(wen)定(ding)及(ji)易(yi)於自(zi)動(dong)化(hua)操(cao)作(zuo)等(deng)特(te)點(dian)。不(bu)僅適用(yong)於(yu)臨(lin)床標本(ben)的(de)檢查,而且由(you)於壹天之內(nei)可以檢查幾百(bai)甚至上(shang)千(qian)份標本(ben),因(yin)此(ci),也(ye)適合(he)於血(xue)清流(liu)行(xing)病(bing)學(xue)調(tiao)查。本法不(bu)僅可以用(yong)來測(ce)定(ding)ti,而且也(ye)可用(yong)於(yu)測(ce)定(ding)體(ti)液(ye)中(zhong)的(de)循(xun)環抗(kang)原(yuan),所(suo)以也(ye)是壹種(zhong)早(zao)期診斷(duan)的(de)良好(hao)方法。因(yin)此(ci)ELISA法在(zai)生物(wu)醫(yi)學(xue)各(ge)領(ling)域的(de)應(ying)用(yong)範(fan)圍(wei)日(ri)益擴(kuo)大,

          組成結(jie)構(gou)

          1、血(xue)清:操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中(zhong)避免任何(he)細胞刺激。使(shi)用(yong)不(bu)含熱(re)原(yuan)和(he)內(nei)du素(su)的(de)試(shi)管(guan)。收(shou)集血(xue)液(ye)後(hou),1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘將(jiang)血(xue)紅細胞迅速(su)小(xiao)心(xin)地(di)分(fen)離(li)。

          2、2、血(xue)漿(jiang):EDTA、檸(ning)檬suan鹽(yan)、肝(gan)素(su)血(xue)漿(jiang)可用(yong)於(yu)檢測(ce)。1000×g離(li)心(xin)30分(fen)鐘去除(chu)顆粒(li)。

          3、細胞上清液(ye):1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘去除(chu)顆粒(li)和(he)聚合(he)物(wu)。

          4、組織(zhi)勻(yun)漿(jiang):將(jiang)組織(zhi)加入適量(liang)生理(li)鹽(yan)水搗碎(sui)。1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘,取上(shang)清液(ye)。

          5、保(bao)存(cun):如果樣品不(bu)立即使(shi)用(yong),應(ying)將(jiang)其分(fen)成小(xiao)部(bu)分(fen)-70℃保(bao)存(cun),避免反復冷凍(dong)。盡(jin)可能的(de)不(bu)要(yao)使(shi)用(yong)溶(rong)血(xue)。如(ru)果血(xue)清中(zhong)大(da)量(liang)顆粒(li),檢測(ce)前(qian)先(xian)離(li)心(xin)或(huo)過濾(lv)。不(bu)要(yao)在(zai)37℃或(huo)更(geng)高的(de)溫(wen)度(du)加熱解凍。應(ying)在(zai)室(shi)溫下解凍並(bing)確(que)保(bao)樣品均(jun)勻(yun)地(di)充(chong)分(fen)解凍。

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          犬傳染(ran)性(xing)腹(fu)膜(mo)炎IP ELISA試(shi)劑盒

          操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou):

          1、使(shi)用(yong)前(qian),將(jiang)所(suo)有(you)試(shi)劑充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)。不(bu)要(yao)使(shi)液(ye)體(ti)產生大量(liang)的(de)泡沫(mo),以免加樣時加入大量(liang)的(de)氣(qi)泡,產生加樣上的(de)誤(wu)差(cha)。

          2、根(gen)據待測(ce)樣品數(shu)量(liang)加上標準(zhun)品的(de)數(shu)量(liang)決定(ding)所(suo)需(xu)的(de)板(ban)條(tiao)數。每個(ge)標準(zhun)品和(he)空白(bai)孔建(jian)議(yi)做復孔。每個(ge)樣品根(gen)據自(zi)己的(de)數(shu)量(liang)來定(ding),能使(shi)用(yong)復(fu)孔的(de)盡(jin)量(liang)做復孔。

          3、加入稀釋(shi)好(hao)後(hou)的(de)標準(zhun)品50ul於反(fan)應(ying)孔、加入待測(ce)樣品50ul於(yu)反(fan)應(ying)孔內。立(li)即加入50ul標記的(de)抗(kang)體(ti)。蓋(gai)上(shang)膜(mo)板,輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩混(hun)勻(yun),37℃溫育(yu)45分(fen)鐘。

          4、甩(shuai)去(qu)孔內液(ye)體(ti),每孔加滿(man)洗(xi)滌液(ye),振(zhen)蕩30秒,甩去洗滌液(ye),用(yong)吸(xi)水紙拍幹。重復(fu)此(ci)操(cao)作(zuo)4次。如果用(yong)洗(xi)板(ban)機(ji)洗滌,洗滌次數增(zeng)加壹次。

          5、每孔加入100ul的(de)親和(he)鏈酶(mei)素(su)-HRP,輕輕(qing)振蕩混(hun)勻(yun),37℃溫育(yu)30分(fen)鐘。

          6、甩(shuai)去(qu)孔內液(ye)體(ti),每孔加滿(man)洗(xi)滌液(ye),振(zhen)蕩30秒,甩去洗滌液(ye),用(yong)吸(xi)水紙拍幹。重復(fu)此(ci)操(cao)作(zuo)4次。如果用(yong)洗(xi)板(ban)機(ji)洗滌,洗滌次數增(zeng)加壹次。

          7、每孔加入底物(wu)A、B各(ge)50ul,輕(qing)輕振(zhen)蕩混(hun)勻(yun),37℃溫育(yu)5分(fen)鐘。避免光照。

          8、取(qu)出(chu)酶(mei)標板(ban),迅速(su)加入50ul終(zhong)止(zhi)液(ye),加入終(zhong)止(zhi)液(ye)後(hou)應(ying)立(li)即測(ce)定(ding)結(jie)果。

          9、在(zai)450nm波長處(chu)測(ce)定(ding)各(ge)孔的(de)OD值。

          操(cao)作(zuo)註(zhu)意(yi)事(shi)項:

          1、試(shi)劑應(ying)按(an)標簽(qian)說(shuo)明(ming)書(shu)儲(chu)存(cun),使(shi)用(yong)前(qian)恢(hui)復(fu)到室溫(wen)。稀(xi)稀過後(hou)的(de)標準(zhun)品應(ying)丟(diu)棄(qi),不(bu)可保(bao)存(cun)

          2、實驗(yan)中不(bu)用(yong)的(de)板(ban)條(tiao)應(ying)立(li)即放(fang)回包(bao)裝袋(dai)中(zhong),密封保存(cun),以免變質。

          3、不(bu)用(yong)的(de)其它試(shi)劑應(ying)包(bao)裝好(hao)或(huo)蓋(gai)好(hao)。不(bu)同批(pi)號(hao)的(de)試(shi)劑不(bu)要(yao)混(hun)用(yong)。保(bao)質(zhi)前(qian)使(shi)用(yong)。

          4、使(shi)用(yong)壹(yi)次性(xing)的(de)吸(xi)頭以免交(jiao)叉汙(wu)染(ran),吸(xi)取(qu)終(zhong)止(zhi)液(ye)和(he)底物(wu)A、B液(ye)時(shi),避免使(shi)用(yong)帶(dai)金(jin)屬(shu)部(bu)分(fen)的(de)加樣器。

          5、使(shi)用(yong)幹(gan)凈(jing)的(de)塑(su)料(liao)容器配(pei)置洗滌液(ye)。使(shi)用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)試(shi)劑盒裏的(de)各(ge)種(zhong)成份及樣品。

          6、底物(wu)A應(ying)揮(hui)發,避免長時間打開蓋(gai)子。底物(wu)B對光(guang)敏(min)感,避免長時間暴露(lu)於(yu)光下。避免用(yong)手(shou)接(jie)觸,有(you)毒(du)。實驗(yan)完成後(hou)應(ying)立(li)即讀取(qu)OD值。

          7、加入試(shi)劑的(de)順序(xu)應(ying)壹(yi)致(zhi),以保(bao)證所(suo)有(you)反應(ying)板(ban)孔溫育(yu)的(de)時(shi)間壹樣。按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)中標明(ming)的(de)時(shi)間、加液(ye)的(de)量(liang)及順序(xu)進行(xing)溫(wen)育操作(zuo)。

          壹(yi)般來講(jiang),96T能檢測(ce)90個(ge)樣本,48T能檢測(ce)42個(ge)樣本,這裏面需(xu)要(yao)用(yong)標樣來做標準(zhun)曲線,所(suo)以各(ge)位(wei)需(xu)要(yao)做實驗(yan)的(de)老(lao)師(shi)們(men),請在(zai)購(gou)買ELISA試(shi)劑盒的(de)時(shi)候(hou)註(zhu)意(yi),需(xu)要(yao)做多少個樣本,在(zai)決(jue)定(ding)買(mai)多大(da)規格的(de)試(shi)劑盒,以免做實驗(yan)時出現試(shi)劑盒不(bu)夠(gou)用(yong)或(huo)者(zhe)浪費!

          原(yuan)理(li):將(jiang)特(te)異(yi)性(xing)抗(kang)體(ti)包被於固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)表(biao)面,經洗滌後(hou)分(fen)成兩組:壹組加酶(mei)標記抗原(yuan)和(he)被測(ce)抗(kang)原(yuan)的(de)混(hun)合(he)液(ye),另壹組只(zhi)加酶(mei)標記抗原(yuan),經孵育洗(xi)滌後(hou)加底物(wu)顯(xian)色(se),這兩組底物(wu)降解量(liang)之差(cha),即(ji)為(wei)所(suo)要(yao)測(ce)定(ding)的(de)未知抗原的(de)量(liang)。

          蘋(ping)果花(hua)葉病(bing)毒(du)(APMV)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          蘋(ping)果褪綠(lv)葉斑(ban)病毒(du)(ACLSV)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          蘋(ping)果莖溝病毒(du)(ASGV)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          蘋(ping)果銹果類(lei)病(bing)毒(du)(ASSVd)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          蘋(ping)果莖痘(dou)病毒(du)(ASPV)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          禽牛(niu)結(jie)核(he)(Mycobacterium bovis)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          蛇(she)蛇(she)毒(du)因(yin)子(CVF)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          樹鼩(鼩)Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯(lian)羧基(ji)端肽(tai)(CTXI)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          樹鼩(鼩)盤(pan)狀結(jie)構(gou)域受(shou)體(ti)家族(zu)成員(yuan)2(DDR2)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          樹鼩(鼩)乙(yi)型肝(gan)炎E抗(kang)原(yuan)(HBeAg)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          水貂幹(gan)擾素(su)R(IFN-r)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          水牛(niu)乳(ru)糖酶(mei)(Lactase)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          對蝦(xia)中過(guo)敏原原肌(ji)球(qiu)蛋白(bai)(AIA)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          對蝦(xia)鳥苷(gan)酸(GMP)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          對蝦(xia)白斑(ban)癥病毒(du)(WSV)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          對蝦(xia)白斑(ban)病毒(du)VP28(WSSVVP28)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          對蝦(xia)錨蛋(dan)白(ankyrin)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          對蝦(xia)氨基(ji)吡啉(lin)-N-脫(tuo)甲(jia)基(ji)酶(mei)(ARND)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒

          蜂(feng)蜜(mi)甘露糖(tang)(Mannose)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒















































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