微生物(wu)脂肪(fang)酸延(yan)長(chang)酶(mei)(FAE)elisa檢測試(shi)劑盒(he)

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ELISA法是(shi)免(mian)疫診斷(duan)中(zhong)的(de)壹(yi)項新(xin)技術，現(xian)已(yi)成(cheng)功(gong)地(di)應用於多種病原(yuan)微生物(wu)所(suo)引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面(mian)的(de)免(mian)疫診斷(duan)。也已(yi)應用於大(da)分子(zi)抗(kang)原(yuan)和小(xiao)分子(zi)抗(kang)原(yuan)的定量(liang)測定，根據已(yi)經使用的結(jie)果，認為ELISA法具(ju)有靈(ling)敏(min)、特(te)異、簡單、快速、穩定及易(yi)於自動(dong)化操作等特(te)點。不僅適用於臨(lin)床標本的(de)檢查，而且(qie)由於壹(yi)天之內(nei)可以檢查幾百(bai)甚(shen)至上(shang)千份(fen)標本,因此(ci)，也適合(he)於血(xue)清流行病學調查(zha)。本(ben)法不僅可(ke)以用來(lai)測定抗(kang)ti，而且(qie)也可用於測(ce)定體(ti)液(ye)中的循(xun)環抗(kang)原(yuan)，所(suo)以也是(shi)壹(yi)種早(zao)期(qi)診斷(duan)的(de)良(liang)好(hao)方法。因此ELISA法在生物(wu)醫(yi)學各領域的(de)應用範圍日益(yi)擴(kuo)大(da)，

組成(cheng)結(jie)構

1、血(xue)清：操作過(guo)程中(zhong)避(bi)免任(ren)何細(xi)胞(bao)刺(ci)激。使用不含熱原(yuan)和內du素(su)的試(shi)管。收集血(xue)液(ye)後，1000×g離心(xin)10分鐘(zhong)將血(xue)紅細(xi)胞(bao)迅速小(xiao)心(xin)地(di)分離(li)。

2、2、血(xue)漿：EDTA、檸檬suan鹽、肝(gan)素(su)血(xue)漿可(ke)用於檢測。1000×g離心(xin)30分鐘(zhong)去除顆(ke)粒(li)。

3、細(xi)胞(bao)上(shang)清(qing)液(ye)：1000×g離心10分鐘(zhong)去除顆(ke)粒(li)和聚合(he)物(wu)。

4、組織(zhi)勻漿：將組織(zhi)加(jia)入適量(liang)生理(li)鹽水(shui)搗碎(sui)。1000×g離(li)心(xin)10分鐘(zhong)，取上(shang)清液(ye)。

5、保存(cun)：如(ru)果(guo)樣品(pin)不立(li)即使用，應將其分成(cheng)小(xiao)部(bu)分-70℃保(bao)存(cun)，避(bi)免反復冷(leng)凍(dong)。盡可(ke)能的不要(yao)使用溶血(xue)。如(ru)果(guo)血(xue)清中大(da)量(liang)顆粒(li)，檢測前先(xian)離(li)心或過濾。不要(yao)在37℃或更(geng)高(gao)的溫(wen)度加熱解(jie)凍。應(ying)在室溫下解(jie)凍並(bing)確(que)保(bao)樣品(pin)均(jun)勻(yun)地(di)充分解(jie)凍。

微生物(wu)脂肪(fang)酸延(yan)長(chang)酶(mei)(FAE)elisa檢測試(shi)劑盒(he)

操作步(bu)驟(zhou)：

1、使用前，將所(suo)有試(shi)劑充(chong)分混(hun)勻(yun)。不要(yao)使液(ye)體(ti)產生大(da)量(liang)的泡(pao)沫，以免(mian)加(jia)樣時加入大(da)量(liang)的氣(qi)泡，產生加樣上(shang)的(de)誤差(cha)。

2、根據待測樣品(pin)數(shu)量(liang)加上(shang)標準品(pin)的數(shu)量(liang)決定所(suo)需的(de)板條數(shu)。每個標準品(pin)和空白孔(kong)建(jian)議做(zuo)復孔(kong)。每(mei)個樣品(pin)根據自(zi)己的(de)數(shu)量(liang)來(lai)定，能使用復孔(kong)的(de)盡量(liang)做(zuo)復孔(kong)。

3、加(jia)入(ru)稀(xi)釋好(hao)後(hou)的(de)標準品(pin)50ul於反應孔(kong)、加入(ru)待測樣品(pin)50ul於反應孔(kong)內。立(li)即加(jia)入(ru)50ul標記的(de)抗(kang)體(ti)。蓋(gai)上膜(mo)板，輕(qing)輕(qing)振蕩混勻(yun)，37℃溫育(yu)45分鐘(zhong)。

4、甩(shuai)去孔內(nei)液(ye)體(ti)，每孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)，振蕩30秒(miao)，甩(shuai)去洗(xi)滌(di)液(ye)，用吸水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹。重復此(ci)操作4次(ci)。如(ru)果(guo)用洗(xi)板機(ji)洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌(di)次數(shu)增加壹(yi)次。

5、每(mei)孔(kong)加入100ul的(de)親和鏈酶素(su)-HRP，輕(qing)輕(qing)振蕩混勻(yun)，37℃溫育(yu)30分鐘(zhong)。

6、甩(shuai)去孔內(nei)液(ye)體(ti)，每孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)，振蕩30秒(miao)，甩(shuai)去洗(xi)滌(di)液(ye)，用吸水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹。重復此(ci)操作4次(ci)。如(ru)果(guo)用洗(xi)板機(ji)洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌(di)次數(shu)增加壹(yi)次。

7、每(mei)孔(kong)加入底(di)物(wu)A、B各50ul，輕(qing)輕(qing)振蕩混勻(yun)，37℃溫育(yu)5分鐘(zhong)。避(bi)免光(guang)照(zhao)。

8、取出(chu)酶標板，迅速加(jia)入(ru)50ul終(zhong)止液(ye)，加入終(zhong)止液(ye)後應立(li)即測(ce)定結(jie)果。

9、在450nm波(bo)長處測(ce)定各孔(kong)的(de)OD值(zhi)。

操作註意事(shi)項：

1、試(shi)劑應(ying)按(an)標簽(qian)說(shuo)明(ming)書(shu)儲存(cun)，使用前恢(hui)復到室溫。稀(xi)稀(xi)過後(hou)的(de)標準品(pin)應丟棄(qi)，不可保存(cun)

2、實(shi)驗(yan)中不用的板條應立(li)即放(fang)回(hui)包(bao)裝袋中，密封(feng)保(bao)存(cun)，以免(mian)變(bian)質。

3、不用的其(qi)它試(shi)劑應(ying)包(bao)裝好(hao)或蓋(gai)好。不同批號的(de)試(shi)劑不要(yao)混(hun)用。保質前使用。

4、使用壹(yi)次性(xing)的吸(xi)頭(tou)以免(mian)交(jiao)叉汙染，吸取終(zhong)止液(ye)和底物(wu)A、B液(ye)時，避(bi)免使用帶金(jin)屬部(bu)分的(de)加(jia)樣器(qi)。

5、使用幹凈的塑(su)料容器(qi)配(pei)置洗(xi)滌(di)液(ye)。使用前充(chong)分混(hun)勻(yun)試(shi)劑盒(he)裏(li)的(de)各(ge)種成(cheng)份(fen)及樣品(pin)。

6、底(di)物(wu)A應(ying)揮(hui)發，避(bi)免長(chang)時間打(da)開(kai)蓋(gai)子(zi)。底物(wu)B對光(guang)敏(min)感，避(bi)免長(chang)時間暴(bao)露(lu)於(yu)光(guang)下。避(bi)免用手接(jie)觸，有毒。實(shi)驗(yan)完成(cheng)後(hou)應立(li)即讀(du)取OD值(zhi)。

7、加(jia)入(ru)試(shi)劑的(de)順序(xu)應壹(yi)致(zhi)，以保(bao)證所(suo)有反應板孔(kong)溫(wen)育的時間壹(yi)樣。按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)中標明的(de)時間、加(jia)液(ye)的量(liang)及順序(xu)進行溫(wen)育(yu)操作。

壹(yi)般(ban)來(lai)講，96T能(neng)檢測90個樣本(ben)，48T能(neng)檢測42個樣本(ben)，這裏(li)面(mian)需(xu)要(yao)用標樣來(lai)做(zuo)標準曲(qu)線(xian)，所(suo)以各(ge)位需(xu)要(yao)做(zuo)實(shi)驗(yan)的老(lao)師(shi)們(men)，請(qing)在購買(mai)ELISA試(shi)劑盒(he)的(de)時候(hou)註意，需(xu)要(yao)做(zuo)多少個樣本(ben)，在決定買(mai)多大(da)規格的(de)試(shi)劑盒(he)，以免(mian)做(zuo)實(shi)驗(yan)時出(chu)現(xian)試(shi)劑盒(he)不夠用或者(zhe)浪費(fei)！

原(yuan)理(li)：將特(te)異性(xing)抗(kang)體(ti)包(bao)被(bei)於(yu)固(gu)相載(zai)體(ti)表面(mian)，經洗(xi)滌(di)後分成(cheng)兩(liang)組：壹(yi)組加(jia)酶標記抗(kang)原(yuan)和被(bei)測(ce)抗(kang)原(yuan)的混合(he)液(ye)，另壹(yi)組只(zhi)加(jia)酶標記抗(kang)原(yuan)，經孵(fu)育(yu)洗(xi)滌(di)後加(jia)底物(wu)顯色，這兩(liang)組底物(wu)降解(jie)量(liang)之差(cha)，即為(wei)所(suo)要(yao)測(ce)定的未(wei)知抗(kang)原(yuan)的量(liang)。

雞(ji)D型(xing)氨基(ji)酸(suan)氧(yang)化酶(mei)(DAAO)elisa試(shi)劑盒(he)

雞(ji)馬(ma)力(li)克病毒抗(kang)體(ti)(Malik virus-Ab)elisa試(shi)劑盒(he)

雞(ji)白(bai)血(xue)病A；B抗(kang)體(ti)(ALV-A；B-Ab)elisa試(shi)劑盒(he)

雞(ji)白(bai)血(xue)病J抗(kang)體(ti)(ALV-J-Ab)elisa試(shi)劑盒(he)

辣(la)椒(jiao)素(su)(Capsaicin)elisa檢測試(shi)劑盒(he)

柱(zhu)孢藻(zao)毒素(su)(Cylindrospermopsin)elisa檢測試(shi)劑盒(he)

二(er)氫(qing)辣(la)椒(jiao)素(su)(Dihydrocapsaicin)elisa檢測試(shi)劑盒(he)

辣(la)椒(jiao)神秘病毒(PCV1)elisa檢測試(shi)劑盒(he)

辣(la)椒(jiao)褪(tui)綠(lv)病毒(CCV)elisa檢測試(shi)劑盒(he)

代(dai)森錳鋅(xin)(Mancozeb)elisa檢測試(shi)劑盒(he)

麻(ma)痹性貝(bei)類毒素(su)(PSP)elisa檢測試(shi)劑盒(he)

腹瀉性貝(bei)類毒素(su)(DSP)elisa檢測試(shi)劑盒(he)

神經性貝(bei)毒(NSP)elisa檢測試(shi)劑盒(he)

微囊(nang)藻(zao)毒素(su)-LR(MC-LR)elisa檢測試(shi)劑盒(he)