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        1. 產(chan)品(pin)中(zhong)心(xin)/ products

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          ELISA法是(shi)免疫診斷(duan)中(zhong)的(de)壹(yi)項(xiang)新(xin)技術,現(xian)已(yi)成功(gong)地(di)應(ying)用(yong)於(yu)多種病原微(wei)生物所引起的(de)傳染(ran)病、寄(ji)生蟲(chong)病及(ji)非(fei)傳染(ran)病等(deng)方(fang)面(mian)的(de)免疫診斷(duan)。也(ye)已(yi)應(ying)用(yong)於(yu)大分(fen)子抗(kang)原和(he)小(xiao)分子抗(kang)原的(de)定量(liang)測定,根據(ju)已(yi)經(jing)使用(yong)的(de)結(jie)果,認(ren)為(wei)ELISA法具(ju)有(you)靈敏(min)、特(te)異(yi)、簡(jian)單、快速(su)、穩(wen)定及(ji)易(yi)於(yu)自動化操作(zuo)等(deng)特(te)點(dian)。不僅適用(yong)於(yu)臨(lin)床標本的(de)檢(jian)查,而且由(you)於(yu)壹天(tian)之內可以(yi)檢(jian)查幾百(bai)甚至(zhi)上(shang)千(qian)份(fen)標(biao)本,因此,也適合於(yu)血清流行病學(xue)調查。本法不(bu)僅可以(yi)用(yong)來(lai)測(ce)定抗(kang)ti,而且也(ye)可用(yong)於(yu)測定體液(ye)中(zhong)的(de)循環(huan)抗(kang)原,所以(yi)也是壹(yi)種早期(qi)診斷(duan)的(de)良好(hao)方法。因此ELISA法在(zai)生物醫(yi)學(xue)各(ge)領域的(de)應(ying)用(yong)範(fan)圍(wei)日(ri)益(yi)擴(kuo)大,

          組成結(jie)構

          1、血清:操作(zuo)過程中(zhong)避免任何(he)細胞刺(ci)激(ji)。使用(yong)不(bu)含熱(re)原和(he)內du素(su)的(de)試(shi)管。收集(ji)血液(ye)後,1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘將(jiang)血紅(hong)細胞迅(xun)速(su)小(xiao)心地(di)分離(li)。

          2、2、血漿(jiang):EDTA、檸(ning)檬(meng)suan鹽、肝素(su)血漿(jiang)可用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)。1000×g離(li)心(xin)30分(fen)鐘去(qu)除(chu)顆(ke)粒。

          3、細胞上(shang)清液(ye):1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘去(qu)除(chu)顆(ke)粒和(he)聚合物。

          4、組(zu)織(zhi)勻漿(jiang):將(jiang)組(zu)織(zhi)加入適量(liang)生理(li)鹽水搗碎(sui)。1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘,取(qu)上(shang)清液(ye)。

          5、保(bao)存(cun):如果(guo)樣品(pin)不立即使用(yong),應(ying)將(jiang)其(qi)分(fen)成小(xiao)部(bu)分(fen)-70℃保(bao)存(cun),避免反復冷(leng)凍(dong)。盡可能(neng)的不要(yao)使用(yong)溶(rong)血。如果(guo)血清中(zhong)大(da)量(liang)顆(ke)粒,檢(jian)測(ce)前(qian)先離(li)心(xin)或(huo)過濾。不要(yao)在37℃或(huo)更高的溫(wen)度(du)加熱(re)解凍(dong)。應(ying)在(zai)室溫下解凍(dong)並確保(bao)樣品(pin)均勻(yun)地(di)充分解凍(dong)。

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          小(xiao)鼠麥(mai)凝(ning)集(ji)蛋(dan)白(WAG)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

          操作(zuo)步(bu)驟:

          1、使用(yong)前(qian),將(jiang)所有(you)試(shi)劑(ji)充分混勻。不(bu)要(yao)使液(ye)體產生大(da)量(liang)的泡(pao)沫(mo),以(yi)免加樣時(shi)加入大(da)量(liang)的氣(qi)泡(pao),產(chan)生加樣上(shang)的誤(wu)差。

          2、根據(ju)待(dai)測樣品(pin)數(shu)量(liang)加上(shang)標準(zhun)品(pin)的數(shu)量(liang)決定所需的(de)板(ban)條數(shu)。每(mei)個標(biao)準(zhun)品(pin)和空(kong)白孔建(jian)議(yi)做復孔。每(mei)個樣品(pin)根據(ju)自(zi)己(ji)的數(shu)量(liang)來定,能(neng)使用(yong)復孔的(de)盡量(liang)做復孔。

          3、加入稀釋(shi)好(hao)後的標準(zhun)品(pin)50ul於(yu)反應(ying)孔、加入待(dai)測樣品(pin)50ul於(yu)反應(ying)孔內。立即加入50ul標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)體。蓋上(shang)膜板(ban),輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混勻(yun),37℃溫育45分(fen)鐘。

          4、甩去孔內液(ye)體,每(mei)孔加滿(man)洗滌液(ye),振(zhen)蕩(dang)30秒(miao),甩去洗滌液(ye),用(yong)吸(xi)水紙拍幹。重復此操作(zuo)4次(ci)。如果(guo)用(yong)洗板(ban)機(ji)洗滌,洗滌次(ci)數(shu)增(zeng)加壹次(ci)。

          5、每(mei)孔加入100ul的(de)親(qin)和鏈(lian)酶(mei)素(su)-HRP,輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混勻(yun),37℃溫育30分(fen)鐘。

          6、甩去孔內液(ye)體,每(mei)孔加滿(man)洗滌液(ye),振(zhen)蕩(dang)30秒(miao),甩去洗滌液(ye),用(yong)吸(xi)水紙拍幹。重復此操作(zuo)4次(ci)。如果(guo)用(yong)洗板(ban)機(ji)洗滌,洗滌次(ci)數(shu)增(zeng)加壹次(ci)。

          7、每(mei)孔加入底物A、B各(ge)50ul,輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混勻(yun),37℃溫育5分(fen)鐘。避免光(guang)照(zhao)。

          8、取(qu)出(chu)酶標(biao)板(ban),迅(xun)速(su)加入50ul終(zhong)止(zhi)液(ye),加入終(zhong)止(zhi)液(ye)後應(ying)立即測定結(jie)果。

          9、在(zai)450nm波長處測定各(ge)孔的(de)OD值。

          操作(zuo)註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang):

          1、試(shi)劑(ji)應(ying)按(an)標簽(qian)說(shuo)明(ming)書儲存,使用(yong)前(qian)恢復到(dao)室(shi)溫(wen)。稀稀過後的(de)標準(zhun)品(pin)應(ying)丟(diu)棄(qi),不(bu)可保(bao)存(cun)

          2、實(shi)驗(yan)中(zhong)不(bu)用(yong)的(de)板(ban)條應(ying)立即放回(hui)包(bao)裝(zhuang)袋(dai)中(zhong),密(mi)封保(bao)存(cun),以(yi)免變質。

          3、不(bu)用(yong)的(de)其(qi)它(ta)試(shi)劑(ji)應(ying)包(bao)裝(zhuang)好(hao)或(huo)蓋(gai)好。不同(tong)批號(hao)的試(shi)劑(ji)不(bu)要混(hun)用(yong)。保(bao)質前使用(yong)。

          4、使用(yong)壹(yi)次(ci)性的(de)吸頭(tou)以(yi)免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran),吸(xi)取(qu)終止(zhi)液(ye)和底物A、B液(ye)時,避免使用(yong)帶金屬部(bu)分(fen)的(de)加樣器(qi)。

          5、使用(yong)幹凈的(de)塑(su)料(liao)容器配置(zhi)洗滌液(ye)。使用(yong)前(qian)充分混勻試(shi)劑(ji)盒(he)裏的(de)各(ge)種成份(fen)及(ji)樣品(pin)。

          6、底物A應(ying)揮(hui)發,避免長時間(jian)打(da)開(kai)蓋子(zi)。底物B對(dui)光(guang)敏(min)感,避免長時間(jian)暴(bao)露於(yu)光(guang)下(xia)。避免用(yong)手接(jie)觸(chu),有(you)毒(du)。實(shi)驗(yan)完(wan)成後(hou)應(ying)立即讀取OD值。

          7、加入試(shi)劑(ji)的(de)順(shun)序應(ying)壹(yi)致(zhi),以(yi)保(bao)證所有(you)反應(ying)板(ban)孔溫(wen)育的(de)時間(jian)壹樣。按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書中(zhong)標(biao)明(ming)的時(shi)間(jian)、加液(ye)的量(liang)及順(shun)序進(jin)行溫育操作(zuo)。

          壹(yi)般來(lai)講,96T能(neng)檢(jian)測(ce)90個樣本,48T能(neng)檢(jian)測(ce)42個樣本,這(zhe)裏面(mian)需要(yao)用(yong)標(biao)樣來(lai)做標準(zhun)曲(qu)線,所以(yi)各(ge)位需要(yao)做實(shi)驗(yan)的(de)老師們,請(qing)在(zai)購買(mai)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)的時(shi)候註(zhu)意(yi),需要(yao)做多少(shao)個樣本,在(zai)決(jue)定買(mai)多(duo)大(da)規(gui)格(ge)的試(shi)劑(ji)盒(he),以免做實(shi)驗(yan)時(shi)出(chu)現試(shi)劑(ji)盒(he)不夠用(yong)或(huo)者浪(lang)費!

          原理(li):將特(te)異(yi)性抗(kang)體包(bao)被(bei)於(yu)固相(xiang)載(zai)體表面(mian),經(jing)洗滌後(hou)分(fen)成兩(liang)組(zu):壹組加酶標(biao)記(ji)抗(kang)原和(he)被(bei)測抗(kang)原的(de)混(hun)合液(ye),另(ling)壹組(zu)只(zhi)加酶標(biao)記(ji)抗(kang)原,經(jing)孵(fu)育洗滌後(hou)加底物顯色(se),這兩(liang)組(zu)底物降(jiang)解量(liang)之差(cha),即為(wei)所要(yao)測定的(de)未知(zhi)抗(kang)原的(de)量(liang)。



          小鼠(shu)繁殖與呼(hu)吸(xi)綜(zong)合征(zheng)病毒(du)抗(kang)體(PRRSV-Ab)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

          小鼠(shu)甘(gan)油三酯水解酶(mei)(TGH)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

          小鼠(shu)幹擾(rao)素(su)誘(you)導鳥苷(gan)酸結合蛋(dan)白1(GBP1)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

          小鼠(shu)黑(hei)素(su)皮質素受(shou)體4(MC4R)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

          小鼠(shu)角化(hua)細胞內分(fen)泌因子(KAF)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

          小鼠(shu)抗(kang)L型鈣通(tong)道(dao)蛋(dan)白抗(kang)體(Anti-CACH2)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

          小鼠(shu)美(mei)金剛胺(an)(Memantine)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

          小鼠(shu)生長(chang)激(ji)素抑制(zhi)激素(GHIH)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

          小鼠(shu)嗜(shi)酸粒細胞趨化蛋(dan)白Eotaxin 1(Eotaxin 1)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

          小鼠(shu)鼠(shu)泰澤(ze)病原體(Tyzzer's Organism)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)










































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