大(da)鼠(shu)Cortisol試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠(shu)(Cortisol)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

ELISA法是(shi)免疫(yi)診斷中的壹項新技(ji)術(shu)，現已(yi)成(cheng)功(gong)地應用於多種病(bing)原微生物所引起(qi)的傳(chuan)染病、寄(ji)生蟲病及非(fei)傳(chuan)染病等(deng)方面(mian)的免疫(yi)診斷。也已(yi)應(ying)用(yong)於大(da)分(fen)子(zi)抗原(yuan)和(he)小(xiao)分(fen)子(zi)抗原(yuan)的定量(liang)測定(ding)，根據已(yi)經(jing)使用的結(jie)果，認為ELISA法具(ju)有靈(ling)敏(min)、特異(yi)、簡(jian)單、快速(su)、穩(wen)定(ding)及易於自動(dong)化操(cao)作等(deng)特(te)點。不(bu)僅適用於臨床標本的檢查，而(er)且(qie)由(you)於壹天之(zhi)內(nei)可(ke)以檢(jian)查(zha)幾百甚(shen)至上千份標本(ben),因(yin)此(ci)，也適合(he)於血(xue)清(qing)流(liu)行(xing)病學(xue)調查。本法不(bu)僅可(ke)以用(yong)來(lai)測定(ding)抗ti，而(er)且(qie)也可(ke)用於測定體液中的循(xun)環(huan)抗原(yuan)，所以也是(shi)壹種早(zao)期診斷的良好方法。因(yin)此(ci)ELISA法在(zai)生(sheng)物醫(yi)學(xue)各(ge)領域的應用範(fan)圍日(ri)益擴大(da)。

大(da)鼠(shu)Cortisol試(shi)劑(ji)盒(he)免責(ze)聲(sheng)明

1. 試(shi)劑(ji)盒(he)僅供研(yan)究使(shi)用(yong)，不(bu)得(de)用於臨床實(shi)驗(yan)或人(ren)體(ti)實(shi)驗(yan)，否則(ze)所產生的壹切後(hou)果，由(you)實(shi)驗(yan)者承(cheng)擔，本(ben)公司概不(bu)負(fu)責(ze)。

2. 嚴(yan)格(ge)按照說明書操作，實(shi)驗(yan)者違(wei)反(fan)說明書操作，後(hou)果由(you)實(shi)驗(yan)者承(cheng)擔。

3. 產品特(te)點

壹、高效、靈(ling)敏(min)、特異(yi)的抗ti；

二(er)、穩(wen)定(ding)的重(zhong)復(fu)性和(he)可(ke)靠性(xing)；

三、吸附性能(neng)好(hao)，空(kong)白值低，孔底(di)透明(ming)度高的固相載(zai)體(ti)；

四(si)、適用血(xue)清(qing)、血(xue)漿、組(zu)織勻漿液(ye)、細胞培(pei)養上清(qing)液(ye)、尿液等(deng)等(deng)多種標(biao)本類型；

五、節省實(shi)驗(yan)經(jing)費。

大(da)鼠(shu)Cortisol試(shi)劑(ji)盒(he)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)回收(shou)率是(shi)反(fan)應待(dai)測(ce)物在(zai)樣(yang)品(pin)分(fen)析(xi)過程中的損失(shi)的程度(du)，損失(shi)越少(shao)，回收(shou)率越高，如果(guo)作標液(ye)1PPM，就是(shi)1毫克(ke)/升，而作出標(biao)準(zhun)數據為0.99毫克(ke)/升，就是(shi)說妳的回收(shou)率是(shi)99%，這(zhe)個(ge)與真(zhen)實(shi)成分(fen)有(you)密切的關系(xi)，說明方法的準確(que)度。比(bi)如水(shui)中總(zong)無機氯含量(liang)測定(ding)，樣品(pin)水(shui)中含有(you)無機氯20mg/L，取(qu)100mL被(bei)測(ce)水(shui)樣品，加(jia)入(ru)0.1mL濃(nong)度為10mg/mL的含無機氯標(biao)準(zhun)樣(yang)品(pin)，測定時(shi)忽(hu)略(lve)體積變(bian)化，如(ru)果(guo)測定出樣(yang)品(pin)中無機氯為29.8mg/L，則認為回收(shou)率為99%。

大(da)鼠(shu)(Cortisol)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)組(zu)成結(jie)構(gou)

1、血(xue)清(qing)：操(cao)作過程中避免任(ren)何(he)細胞刺激(ji)。使用(yong)不(bu)含熱(re)原(yuan)和(he)內(nei)du素(su)的試(shi)管(guan)。收(shou)集血(xue)液(ye)後(hou)，1000×g離心10分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血(xue)紅(hong)細(xi)胞迅(xun)速(su)小(xiao)心地分(fen)離。

2、血(xue)漿：EDTA、檸(ning)檬suan鹽(yan)、肝(gan)素(su)血(xue)漿可(ke)用於檢測。1000×g離心30分(fen)鐘(zhong)去除顆(ke)粒。

3、細(xi)胞(bao)上清(qing)液(ye)：1000×g離心10分(fen)鐘(zhong)去除顆(ke)粒和(he)聚(ju)合(he)物。

4、組(zu)織勻漿：將(jiang)組(zu)織加(jia)入(ru)適量(liang)生理(li)鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎。1000×g離心10分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)液(ye)。

5、保存：如果(guo)樣(yang)品(pin)不(bu)立即(ji)使用，應將其分(fen)成(cheng)小(xiao)部分(fen)-70℃保(bao)存，避免反(fan)復(fu)冷(leng)凍。盡(jin)可(ke)能的不(bu)要使(shi)用溶(rong)血(xue)或高血(xue)脂(zhi)血(xue)。如(ru)果(guo)血(xue)清(qing)中大(da)量(liang)顆(ke)粒，檢(jian)測(ce)前先離心或過濾(lv)。不(bu)要在(zai)37℃或更(geng)高的溫度(du)加(jia)熱(re)解(jie)凍。應在(zai)室(shi)溫下(xia)解(jie)凍並確(que)保樣(yang)品均勻地(di)充分(fen)解(jie)凍。

試(shi)劑(ji)盒(he)成(cheng)分(fen)

1 預(yu)包(bao)被(bei)板(ban): 抗小(xiao)鼠白介(jie)素(su)-6兔(tu)子(zi)IgG,親(qin)合(he)純化 96T

2 酶(mei)標(biao)記抗ti: (30倍(bei)濃縮)HRP標記抗小(xiao)鼠白介(jie)素(su)-6兔(tu)子(zi)IgG,親(qin)合(he)純化 0.4mL x 1

3 標(biao)準(zhun)品: 重(zhong)組(zu)小(xiao)鼠白介(jie)素(su)-6 0.5mL x 2

4 EIA緩(huan)沖(chong)液(ye): 含1% BSA, 0.05%吐(tu)溫20 BPS 30mL x 1

5 標(biao)記抗ti稀(xi)釋液: 含1% BSA, 0.05%吐(tu)溫20 BPS 12mL x 1

6 顯(xian)色(se)劑(ji): TMB底(di)物液(ye) 15mL x 1

7 終(zhong)止液: 1N硫(liu)suan 12mL x 1

8 濃縮洗(xi)滌(di)液: (40倍(bei)濃(nong)縮) 含1% BSA, 0.05%吐(tu)溫20 BPS 50mL x 1 操(cao)作說明 1實(shi)驗(yan)所需(xu)器材(但(dan)試(shi)劑(ji)盒(he)沒(mei)有(you)提(ti)供(gong)) 酶(mei)標(biao)儀(450nm) 微(wei)移(yi)液(ye)管(guan)及其(qi)吸(xi)嘴 量(liang)筒及燒(shao)杯(bei) 去離子水(shui) 冰(bing)箱(xiang)(4°C) 坐(zuo)標(biao)紙(zhi)(log/log) 吸水(shui)紙(zhi) 試(shi)管(guan)(用於標準品稀釋) 溫育(yu)箱(xiang)(37°C ± 1°C) 洗(xi)瓶(ping) (用(yong)於洗(xi)板) 壹次性試(shi)劑(ji)管(guan)(用於濃縮酶(mei)標(biao)記抗ti和(he)顯(xian)色(se)劑(ji))

實(shi)驗(yan)詳細(xi)操作程序(xu)

1.  從室(shi)溫平(ping)衡(heng)20min後(hou)的鋁箔袋(dai)中取出所需(xu)板(ban)條，剩余(yu)板條用自封(feng)袋(dai)密封(feng)放(fang)回4℃。

2.  設(she)置(zhi)標(biao)準品孔和(he)樣(yang)本(ben)孔，標(biao)準(zhun)品孔各(ge)加(jia)不(bu)同濃度的標準品(pin)50μL；樣(yang)本(ben)孔加(jia)待(dai)測(ce)樣本50μL。

3.  樣本(ben)孔先加(jia)待(dai)測(ce)樣本10μL，再(zai)加(jia)樣(yang)ben稀(xi)釋ye40μL；空(kong)白孔不(bu)加(jia)。

4.  除(chu)空(kong)白孔外(wai)，標準品(pin)孔和(he)樣(yang)本(ben)孔中每孔加(jia)入(ru)辣(la)根過氧化物酶(mei)（HRP）標(biao)記的檢測抗體(ti)100μL，用封(feng)板膜封(feng)住反(fan)應孔，37℃水(shui)浴(yu)鍋(guo)或恒溫箱(xiang)溫育(yu)60min。

5.  棄(qi)去液體，吸(xi)水(shui)紙(zhi)上拍幹，每孔加(jia)滿洗(xi)滌(di)液，靜(jing)置(zhi)1min，甩(shuai)去洗(xi)滌(di)液，吸(xi)水(shui)紙(zhi)上拍幹，如此(ci)重(zhong)復(fu)洗(xi)板5次（也可(ke)用洗(xi)板機洗(xi)板）。

6.  每孔加(jia)入(ru)底(di)物A、B各(ge)50μL，37℃避光孵(fu)育(yu)15min。

7.  每孔加(jia)入(ru)終(zhong)止液50μL，15min內(nei)，在(zai)450nm波(bo)長(chang)處測(ce)定各(ge)孔的OD值。

常用方法及原(yuan)理(li)如下(xia)：

1. 夾(jia)心(xin)法：

夾(jia)心(xin)法常用於檢測大(da)分(fen)子(zi)抗原(yuan)，壹般的操作步驟(zhou)為:

a. 將具(ju)有專(zhuan)壹性的抗ti固(gu)著（coating）於塑膠(jiao)孔盤上，完成後(hou)洗(xi)去多余(yu)抗ti

b. 加(jia)入(ru)待(dai)測檢體，檢(jian)體(ti)中若含有(you)待(dai)測的抗原(yuan)，則其會(hui)與塑膠(jiao)孔盤上的抗ti進(jin)行(xing)專(zhuan)壹性鍵結(jie)

c. 洗(xi)去多余(yu)待測檢(jian)體(ti)，加(jia)入(ru)另壹種對(dui)抗原(yuan)專(zhuan)壹的壹次抗ti，與待測(ce)抗原(yuan)進行(xing)鍵結(jie)

d. 洗(xi)去多余(yu)未(wei)鍵結(jie)壹次抗ti，加(jia)入(ru)帶(dai)有酶(mei)的二(er)次抗ti，與壹次抗ti鍵結(jie)

e. 洗(xi)去多余(yu)未(wei)鍵結(jie)二(er)次抗ti，加(jia)入(ru)酶(mei)底(di)物使(shi)酵(jiao)素呈色(se)，以肉(rou)眼(yan)或儀器讀(du)取(qu)呈(cheng)色(se)結(jie)果

原(yuan)理(li)：針(zhen)對(dui)抗原(yuan)分(fen)子(zi)上2個不(bu)同抗原(yuan)決定簇(cu)的單克(ke)隆(long)抗ti分(fen)別(bie)作為固相抗ti和(he)酶(mei)標(biao)抗ti，將(jiang)大(da)分(fen)子(zi)抗原(yuan)分(fen)別(bie)制(zhi)備(bei)固(gu)相(xiang)抗原(yuan)和(he)酶(mei)標(biao)抗原(yuan)結(jie)合(he)物。

2. 間接(jie)法

間接(jie)法常用於檢測抗ti，壹般的操作步驟(zhou)為：

a. 將已知的抗原(yuan)固著於塑膠(jiao)孔盤上，完成後(hou)洗(xi)去多余(yu)的抗原(yuan)。

b. 加(jia)入(ru)待(dai)測檢體，檢(jian)體(ti)中若含有(you)待(dai)測的壹次抗ti，則(ze)其會與塑膠(jiao)孔盤上的抗原(yuan)進行(xing)專(zhuan)壹性鍵結(jie)。

c. 洗(xi)去多余(yu)待測檢(jian)體(ti)，加(jia)入(ru)帶(dai)有酶(mei)的二(er)次抗ti，與待測(ce)的壹次抗ti鍵結(jie)。

d. 洗(xi)去多余(yu)未(wei)鍵結(jie)二(er)次抗ti，加(jia)入(ru)酶(mei)底(di)物使(shi)酶(mei)呈(cheng)色(se)，藉(ji)儀(yi)器（ELISA reader）測定(ding)塑膠(jiao)盤中的吸光值（OD值），以評估(gu)有(you)色(se)終產物的含量(liang)即可(ke)測量(liang)待測(ce)抗ti的含量(liang)。

原理(li)：利用酶(mei)標(biao)記的抗抗ti以(yi)檢測已(yi)與固相(xiang)結(jie)合(he)的受(shou)檢(jian)抗ti。

3. 競(jing)爭(zheng)法

競(jing)爭(zheng)法是(shi)壹種較少(shao)用(yong)到的ELISA檢測機(ji)制(zhi)，壹般用於檢測小(xiao)分(fen)子(zi)抗原(yuan)，其操作步驟(zhou)為：

a. 將具(ju)有專(zhuan)壹性的抗ti固(gu)著於塑膠(jiao)孔盤上，完成後(hou)洗(xi)去多余(yu)抗ti

b. 加(jia)入(ru)待(dai)測檢體，使(shi)檢(jian)體(ti)中的待測抗原(yuan)與塑膠(jiao)孔盤上的抗ti進(jin)行(xing)專(zhuan)壹性鍵結(jie)

c. 加(jia)入(ru)帶(dai)有酶(mei)的抗原(yuan)，此抗原(yuan)也可(ke)與塑膠(jiao)孔盤上的抗ti進(jin)行(xing)專(zhuan)壹性鍵結(jie)，由(you)於塑膠(jiao)孔盤上固著的抗ti數量(liang)有限(xian)，因此(ci)當檢體中抗原(yuan)的量(liang)越多，則帶(dai)有酶(mei)的抗原(yuan)可(ke)鍵結(jie)的固著抗ti就越少(shao)，亦(yi)即，兩種抗原(yuan)皆(jie)競(jing)相與塑膠(jiao)孔盤上抗ti鍵結(jie)，即所謂(wei)競(jing)爭(zheng)法之(zhi)由(you)來(lai)。

d. 洗(xi)去檢體與帶(dai)有酶(mei)的抗原(yuan)，加(jia)入(ru)酶(mei)底(di)物使(shi)酶(mei)呈(cheng)色(se)，當檢(jian)體(ti)中抗原(yuan)量(liang)越多，代表(biao)塑膠(jiao)孔盤內(nei)留(liu)下(xia)之(zhi)帶(dai)有酶(mei)的抗原(yuan)越少(shao)，顯(xian)色(se)也就越淺。

e. 當(dang)需(xu)要(yao)偵(zhen)測無法獲(huo)得(de)兩種以(yi)上單壹性抗ti的抗原(yuan)，或是不(bu)易得(de)到足(zu)夠(gou)的純化抗ti以(yi)固著於孔盤上時，壹般會考(kao)慮(lv)使(shi)用競爭(zheng)法ELISA。

常見問題解(jie)析(xi)：

1、試(shi)劑(ji)的選擇(ze)：選擇(ze)優良試(shi)劑(ji)大(da)家(jia)都(dou)是知道(dao)的，但(dan)是在(zai)檢(jian)測(ce)之(zhi)前還(hai)應該(gai)提(ti)前(qian)半個(ge)小(xiao)時將試(shi)劑(ji)拿到常溫下(xia)進(jin)行(xing)解凍。

2、加(jia)樣(yang)中可(ke)能遇到的問題。

3、洗(xi)板時容(rong)易造成誤(wu)差(cha)。

4、顯(xian)色(se)問題：使(shi)用了(le)過(guo)期的顯(xian)色(se)劑(ji)或者是(shi)顯(xian)色(se)劑(ji)用(yong)過後(hou)放(fang)置(zhi)時間太(tai)長(chang)，都(dou)有可(ke)能造成顯(xian)色(se)劑(ji)不(bu)顯(xian)色(se)。

5、終止(zhi)反(fan)應：在(zai)加(jia)終(zhong)止(zhi)劑(ji)的時候由(you)於傾倒(dao)速(su)度(du)快(kuai)，產生氣(qi)泡(pao)，造成假(jia)陽(yang)性(xing)結(jie)果，所以在(zai)倒(dao)終(zhong)止(zhi)劑(ji)的時候要(yao)緩(huan)慢(man)倒(dao)。

6、讀(du)板(ban)：讀(du)板(ban)的時候首(shou)先應該(gai)保(bao)證(zheng)板(ban)的清(qing)潔(jie)幹(gan)凈(jing)。

訂購(gou)說明:

※關於產品售(shou)價,由(you)於市場的不(bu)穩(wen)定(ding)性(xing),價格(ge)變動(dong)是必然的,但(dan)是我(wo)們可(ke)以提(ti)供(gong)當下(xia)公(gong)允的市場價格(ge),批量(liang)訂購(gou)還(hai)可(ke)享受(shou)相(xiang)應(ying)的優惠(hui)活動;

※關(guan)於產品的具(ju)體信息(xi),本(ben)頁面展(zhan)示的內(nei)容(rong)僅供參考(kao),而(er)詳(xiang)細的產品信息(xi),可(ke)以咨(zi)詢(xun)我(wo)們;

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