植物(wu)脫(tuo)氧(yang)核糖(tang)核酸(suan)酶(DNase)ELISA試劑盒

檢測原(yuan)理(li)

試(shi)劑盒采(cai)用(yong)雙(shuang)抗(kang)原(yuan)壹-步(bu)夾(jia)心(xin)法酶聯(lian)免疫吸附試驗(yan)(ELISA) 。往(wang)預先包(bao)被(bei)病毒性腹瀉病毒抗(kang)ti的(de)包被(bei)微孔中，依次加(jia)入標(biao)本(ben)、HRP標(biao)記的檢測抗(kang)原(yuan)，經過溫(wen)育並徹(che)di洗(xi)滌。用(yong)底物(wu)TMB顯(xian)色(se)，TMB在過氧(yang)化物(wu)酶的催化(hua)下轉(zhuan)化成(cheng)藍色(se)，並(bing)在suan的(de)作用(yong)下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)最終(zhong)的黃色(se)。用(yong)酶標儀(yi)在450NM波(bo)長下測定(ding)吸(xi)光(guang)度(du)(OD值(zhi)) ，與(yu)CUTOFF值(zhi)相(xiang)比較，從(cong)而判(pan)定(ding)標本(ben)中豬病毒性腹瀉病毒(BVDV) 的(de)存在與(yu)否。

樣(yang)品收(shou)集、處(chu)理(li)及(ji)保存(cun)方法

1.血(xue)清:使(shi)用(yong)不(bu)含(han)熱(re)原(yuan)和內(nei)毒素的試(shi)管，操作過程(cheng)中避免任何細胞(bao)刺激(ji)，收集(ji)血(xue)液後(hou)，3000轉(zhuan)離心(xin)10分(fen)鐘將血(xue)清和紅細胞(bao)迅速小(xiao)心(xin)地分離(li)。

2.血(xue)漿(jiang): EDTA、檸檬(meng)suan鹽或(huo)肝(gan)素抗(kang)凝。3000轉(zhuan)離心(xin)30分(fen)鐘取上清。

3.細胞(bao)上清液: 3000轉(zhuan)離心(xin)10分(fen)鐘去(qu)除顆粒(li)和聚合(he)物(wu)。

4.組(zu)織勻(yun)漿(jiang):將組(zu)織加(jia)入適(shi)量(liang)生理(li)鹽水(shui)搗(dao)碎。3000轉(zhuan) 離心(xin)10分(fen)鐘取上清。

5.保(bao)存:如(ru)果(guo)樣(yang)本收集後(hou)不(bu)及(ji)時檢測，請(qing)按(an)壹(yi)次用(yong)量(liang)分裝，凍(dong)存(cun)於-20°C， 避(bi)免反

復(fu)凍融，在室溫(wen)下(xia)解凍(dong)並確(que)保(bao)樣(yang)品均勻地充分(fen)解凍(dong)。

自(zi)備(bei)物(wu)品

1.酶標儀(yi)(450NM)

2.高(gao)精度(du)加(jia)樣器及(ji)槍(qiang)頭(tou): 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL

3.37℃恒(heng)溫(wen)箱

操作註(zhu)意事(shi)項

1.試(shi)劑盒保(bao)存(cun)在2-8°C，使(shi)用(yong)前(qian)室(shi)溫(wen)平(ping)衡20分(fen)鐘。從(cong)冰箱取(qu)出的(de)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液會有(you)結晶(jing)，這(zhe)屬於正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)，水浴加(jia)熱(re)使結晶(jing)完quan溶(rong)解後(hou)再使用(yong)。

2.實(shi)驗中不用(yong)的(de)板條(tiao)應(ying)立即(ji)放(fang)回自(zi)封袋(dai)中，密(mi)封(feng)(低(di)溫(wen)幹燥)保(bao)存。

3.預(yu)處理(li)後(hou)的樣(yang)本請(qing)按(an)照操作步(bu)驟用(yong)樣(yang)ben稀釋ye適(shi)當稀釋以達(da)到(dao)試劑盒的(de)的(de)最(zui)jia檢測效(xiao)果(guo)。.

4.嚴(yan)格按照(zhao)說明書(shu)中標明的時間、加(jia)液量(liang)及順(shun)序進行溫(wen)育操作。

5.所有(you)液體組(zu)分使(shi)用(yong)前(qian)充分(fen)搖(yao)勻(yun)。

常(chang)用(yong)方(fang)法：

1. 夾(jia)心(xin)法：

夾(jia)心(xin)法常(chang)用(yong)於(yu)檢測大(da)分子抗(kang)原(yuan)，壹(yi)般的操作步(bu)驟為(wei):

a. 將具有(you)專(zhuan)壹(yi)性(xing)的抗(kang)ti固著(zhu)（coating）於(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上，完成(cheng)後洗(xi)去(qu)多余抗(kang)ti

b. 加(jia)入待(dai)測檢體，檢體中若含(han)有(you)待測的(de)抗(kang)原(yuan)，則其(qi)會與(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上的(de)抗(kang)ti進(jin)行專(zhuan)壹(yi)性(xing)鍵結

c. 洗(xi)去(qu)多余待測檢體，加(jia)入另壹種對抗(kang)原(yuan)專(zhuan)壹(yi)的(de)壹次抗(kang)ti，與(yu)待(dai)測抗(kang)原(yuan)進行鍵結

d. 洗(xi)去(qu)多余未鍵結壹次抗(kang)ti，加(jia)入帶(dai)有(you)酶的二(er)次抗(kang)ti，與(yu)壹(yi)次抗(kang)ti鍵(jian)結

e. 洗(xi)去(qu)多余未鍵結二(er)次抗(kang)ti，加(jia)入酶底物(wu)使(shi)酵素呈色(se)，以(yi)肉眼(yan)或(huo)儀(yi)器讀(du)取呈(cheng)色(se)結果(guo)

原(yuan)理(li)：針(zhen)對抗(kang)原(yuan)分子上2個(ge)不(bu)同(tong)抗(kang)原(yuan)決(jue)定(ding)簇的單克隆(long)抗(kang)ti分(fen)別作(zuo)為(wei)固相(xiang)抗(kang)ti和(he)酶標抗(kang)ti，將大(da)分(fen)子抗(kang)原(yuan)分別制(zhi)備(bei)固相(xiang)抗(kang)原(yuan)和(he)酶標抗(kang)原(yuan)結合(he)物(wu)。

2. 間接法

間接法常(chang)用(yong)於(yu)檢測抗(kang)ti，壹(yi)般的操作步(bu)驟為(wei)：

a. 將已(yi)知(zhi)的抗(kang)原(yuan)固著(zhu)於(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上，完成(cheng)後洗(xi)去(qu)多余的抗(kang)原(yuan)。

b. 加(jia)入待(dai)測檢體，檢體中若含(han)有(you)待測的(de)壹(yi)次抗(kang)ti，則(ze)其會與(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上的(de)抗(kang)原(yuan)進行專(zhuan)壹(yi)性(xing)鍵結。

c. 洗(xi)去(qu)多余待測檢體，加(jia)入帶(dai)有(you)酶的二(er)次抗(kang)ti，與(yu)待(dai)測的(de)壹(yi)次抗(kang)ti鍵(jian)結。

d. 洗(xi)去(qu)多余未鍵結二(er)次抗(kang)ti，加(jia)入酶底物(wu)使(shi)酶呈色(se)，藉(ji)儀(yi)器（ELISA reader）測定(ding)塑(su)膠(jiao)盤中的吸光(guang)值(zhi)（OD值(zhi)），以(yi)評估有(you)色(se)終(zhong)產(chan)物(wu)的(de)含(han)量(liang)即可(ke)測量(liang)待測抗(kang)ti的(de)含(han)量(liang)。

原(yuan)理(li)：利(li)用(yong)酶標記的(de)抗(kang)抗(kang)ti以(yi)檢測已(yi)與(yu)固相(xiang)結合(he)的受(shou)檢抗(kang)ti。

3. 競(jing)爭法

競(jing)爭法是壹種較(jiao)少用(yong)到(dao)的(de)ELISA檢測機(ji)制(zhi)，壹般(ban)用(yong)於(yu)檢測小(xiao)分(fen)子抗(kang)原(yuan)，其操作步(bu)驟為(wei)：

a. 將具有(you)專(zhuan)壹(yi)性(xing)的抗(kang)ti固著(zhu)於(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上，完成(cheng)後洗(xi)去(qu)多余抗(kang)ti

b. 加(jia)入待(dai)測檢體，使(shi)檢體中的待測抗(kang)原(yuan)與(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上的(de)抗(kang)ti進(jin)行專(zhuan)壹(yi)性(xing)鍵結

c. 加(jia)入帶(dai)有(you)酶的抗(kang)原(yuan)，此抗(kang)原(yuan)也(ye)可(ke)與(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上的(de)抗(kang)ti進(jin)行專(zhuan)壹(yi)性(xing)鍵結，由於塑(su)膠(jiao)孔盤上固著(zhu)的(de)抗(kang)ti數(shu)量(liang)有(you)限(xian)，因此當檢體中抗(kang)原(yuan)的量(liang)越多，則(ze)帶有(you)酶的抗(kang)原(yuan)可(ke)鍵結的固著(zhu)抗(kang)ti就(jiu)越(yue)少，亦即(ji)，兩種抗(kang)原(yuan)皆競(jing)相(xiang)與(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上抗(kang)ti鍵(jian)結，即所謂競爭法之由來。

d. 洗(xi)去(qu)檢體與(yu)帶(dai)有(you)酶的抗(kang)原(yuan)，加(jia)入酶底物(wu)使(shi)酶呈色(se)，當檢體中抗(kang)原(yuan)量(liang)越多，代(dai)表(biao)塑(su)膠(jiao)孔盤內留下(xia)之帶(dai)有(you)酶的抗(kang)原(yuan)越少，顯色(se)也(ye)就(jiu)越(yue)淺(qian)。

e. 當需(xu)要(yao)偵(zhen)測無(wu)法獲(huo)得(de)兩種以(yi)上單(dan)壹(yi)性抗(kang)ti的(de)抗(kang)原(yuan)，或是不易(yi)得(de)到(dao)足夠的純(chun)化抗(kang)ti以(yi)固著(zhu)於(yu)孔盤上時，壹般會考(kao)慮(lv)使用(yong)競(jing)爭(zheng)法ELISA。

免責聲明(ming)：

1. 試(shi)劑盒僅(jin)供研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)，不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)實(shi)驗或(huo)人體實(shi)驗，否則(ze)所產(chan)生的壹(yi)切(qie)後(hou)果(guo)，由實(shi)驗者(zhe)承(cheng)擔(dan)，本(ben)公司概(gai)不(bu)負(fu)責。

2. 嚴(yan)格(ge)按(an)照說明書(shu)操作，實(shi)驗者(zhe)違(wei)反說明書(shu)操作，後(hou)果(guo)由實(shi)驗者(zhe)承(cheng)擔(dan)。

公(gong)司其(qi)他(ta)產(chan)品：

人(ren)β-神(shen)經(jing)生長因子(β-NGF)elisa試(shi)劑盒

人(ren)鈣聯(lian)接蛋(dan)白(CLGN)elisa試(shi)劑盒

人(ren)基質(zhi)蛋(dan)白Del-1(Del-1)elisa試(shi)劑盒

人(ren)轉(zhuan)錄因子SOX5(SOX5)elisa試(shi)劑盒

人(ren)抑(yi)制素β-B(Inhbb)elisa試(shi)劑盒

人(ren)6-磷(lin)酸(suan)葡萄糖脫氫(qing)酶(6PGD)elisa試(shi)劑盒

人(ren)鈣粘連(lian)蛋(dan)白(H-Cad)elisa試(shi)劑盒

人(ren)鎂(mei)離子轉(zhuan)運(yun)蛋(dan)白1(MAGT1)elisa試(shi)劑盒

大(da)鼠(shu)抗(kang)紅細胞(bao)抗(kang)體(RBC)elisa試(shi)劑盒

大(da)鼠(shu)9型(xing)腺(xian)相(xiang)關(guan)病毒(AAV9)elisa試(shi)劑盒

大(da)鼠(shu)硒蛋(dan)白P(Se-P)elisa試(shi)劑盒

大(da)鼠(shu)B-細胞(bao)激(ji)活(huo)因子受(shou)體(BAFFR)elisa試(shi)劑盒

大(da)鼠(shu)血(xue)清反應(ying)因子(SRF)elisa試(shi)劑盒

大(da)鼠(shu)視紫(zi)質(zhi)(RHO)elisa試(shi)劑盒

大(da)鼠(shu)乳腺(xian)癌(ai)標誌(zhi)物(wu)-CA153(CA153)elisa試(shi)劑盒

大(da)鼠(shu)克拉(la)拉(la)細胞(bao)蛋(dan)白(CC16)elisa試(shi)劑盒

大(da)鼠(shu)支鏈(lian)氨基酸(suan)轉(zhuan)氨酶(BCAT)elisa試(shi)劑盒

大(da)鼠(shu)支鏈(lian)α-酮(tong)酸(suan)脫氨(an)酶(BCKD)elisa試(shi)劑盒

大(da)鼠(shu)蛋(dan)氨酸(suan)腺苷(gan)轉(zhuan)移酶(MAT)elisa試(shi)劑盒