雞(ji)表皮(pi)生(sheng)長因子(zi)(EGF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

檢(jian)測(ce)原(yuan)理(li)

試(shi)劑(ji)盒(he)采(cai)用雙抗原(yuan)壹-步(bu)夾心法酶(mei)聯(lian)免疫(yi)吸(xi)附試(shi)驗(ELISA) 。往(wang)預(yu)先(xian)包被(bei)病毒性腹瀉病毒抗ti的(de)包被(bei)微孔中，依次加(jia)入標(biao)本(ben)、HRP標(biao)記(ji)的(de)檢測(ce)抗原(yuan)，經(jing)過溫育(yu)並徹(che)di洗(xi)滌(di)。用底(di)物(wu)TMB顯色(se)，TMB在(zai)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)催(cui)化(hua)下轉化(hua)成(cheng)藍(lan)色(se)，並在(zai)suan的(de)作用下轉(zhuan)化(hua)成(cheng)最終的(de)黃色(se)。用酶(mei)標儀(yi)在(zai)450NM波(bo)長下測定(ding)吸(xi)光度(du)(OD值(zhi)) ，與(yu)CUTOFF值(zhi)相(xiang)比(bi)較，從而判定(ding)標本(ben)中豬(zhu)病毒性腹瀉病毒(BVDV) 的(de)存在(zai)與(yu)否。

樣(yang)品收集(ji)、處理(li)及保(bao)存方法

1.血清:使(shi)用不(bu)含熱原(yuan)和(he)內毒素的(de)試(shi)管，操(cao)作過程中避(bi)免任何(he)細胞刺激，收(shou)集(ji)血液(ye)後(hou)，3000轉(zhuan)離(li)心10分鐘(zhong)將(jiang)血清和(he)紅(hong)細胞迅速小心地(di)分離(li)。

2.血漿: EDTA、檸檬suan鹽或肝(gan)素(su)抗凝。3000轉(zhuan)離(li)心30分鐘(zhong)取(qu)上清。

3.細胞上清液(ye): 3000轉(zhuan)離(li)心10分鐘(zhong)去除顆粒和(he)聚合(he)物(wu)。

4.組織(zhi)勻(yun)漿:將(jiang)組織(zhi)加入(ru)適量(liang)生(sheng)理(li)鹽水搗碎(sui)。3000轉(zhuan) 離(li)心10分鐘(zhong)取(qu)上清。

5.保(bao)存:如(ru)果樣(yang)本(ben)收(shou)集後(hou)不(bu)及時檢測(ce)，請按壹次(ci)用量(liang)分裝，凍(dong)存於-20°C， 避(bi)免反(fan)

復(fu)凍(dong)融，在室溫下(xia)解凍(dong)並確(que)保(bao)樣(yang)品均(jun)勻(yun)地充(chong)分解凍(dong)。

自備物(wu)品

1.酶(mei)標儀(yi)(450NM)

2.高(gao)精度(du)加樣(yang)器及槍頭: 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL

3.37℃恒(heng)溫(wen)箱(xiang)

操(cao)作註意事(shi)項

1.試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)存在2-8°C，使(shi)用前室溫平衡20分鐘(zhong)。從冰(bing)箱(xiang)取(qu)出的(de)濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)會(hui)有結(jie)晶(jing)，這屬(shu)於正(zheng)常(chang)現象(xiang)，水浴(yu)加(jia)熱使結(jie)晶(jing)完(wan)quan溶(rong)解後(hou)再使用。

2.實(shi)驗中不(bu)用的(de)板條應(ying)立(li)即放(fang)回自封(feng)袋中，密(mi)封(feng)(低(di)溫(wen)幹燥(zao))保(bao)存。

3.預(yu)處(chu)理(li)後(hou)的(de)樣(yang)本(ben)請按照操(cao)作步驟(zhou)用樣(yang)ben稀(xi)釋(shi)ye適(shi)當(dang)稀(xi)釋(shi)以達到(dao)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)的(de)最(zui)jia檢(jian)測(ce)效(xiao)果。.

4.嚴(yan)格(ge)按(an)照說(shuo)明(ming)書中標(biao)明(ming)的(de)時間、加(jia)液(ye)量(liang)及順(shun)序進行(xing)溫(wen)育(yu)操(cao)作。

5.所(suo)有(you)液(ye)體(ti)組分使用前充(chong)分搖勻(yun)。

常(chang)用方法：

1. 夾心法：

夾心法常(chang)用於檢(jian)測大(da)分子(zi)抗原(yuan)，壹般(ban)的(de)操作步驟(zhou)為(wei):

a. 將(jiang)具有(you)專壹性的(de)抗ti固著（coating）於塑(su)膠孔盤上，完成(cheng)後(hou)洗去(qu)多(duo)余(yu)抗ti

b. 加(jia)入(ru)待測檢(jian)體(ti)，檢(jian)體(ti)中若(ruo)含有(you)待測的(de)抗原(yuan)，則(ze)其會(hui)與塑(su)膠孔盤上的(de)抗ti進行(xing)專壹性鍵結(jie)

c. 洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)待測檢(jian)體(ti)，加(jia)入(ru)另(ling)壹種(zhong)對抗原(yuan)專壹的(de)壹次抗ti，與(yu)待測抗原(yuan)進行(xing)鍵結(jie)

d. 洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)未(wei)鍵結(jie)壹次抗ti，加(jia)入(ru)帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)二次抗ti，與(yu)壹次抗ti鍵結(jie)

e. 洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)未(wei)鍵結(jie)二次抗ti，加(jia)入(ru)酶(mei)底(di)物(wu)使酵素呈(cheng)色(se)，以肉眼或儀器讀(du)取(qu)呈(cheng)色(se)結(jie)果

原(yuan)理(li)：針對抗原(yuan)分子(zi)上2個不(bu)同抗原(yuan)決(jue)定簇(cu)的(de)單(dan)克(ke)隆(long)抗ti分別作為固相(xiang)抗ti和(he)酶(mei)標抗ti，將(jiang)大(da)分子(zi)抗原(yuan)分別制備(bei)固相(xiang)抗原(yuan)和(he)酶(mei)標抗原(yuan)結(jie)合(he)物(wu)。

2. 間接(jie)法

間接(jie)法常(chang)用於檢(jian)測抗ti，壹般(ban)的(de)操作步驟(zhou)為(wei)：

a. 將(jiang)已(yi)知(zhi)的(de)抗原(yuan)固著於塑(su)膠孔盤上，完成(cheng)後(hou)洗去(qu)多(duo)余(yu)的(de)抗原(yuan)。

b. 加(jia)入(ru)待測檢(jian)體(ti)，檢(jian)體(ti)中若(ruo)含有(you)待測的(de)壹次抗ti，則(ze)其會(hui)與塑(su)膠孔盤上的(de)抗原(yuan)進行(xing)專壹性鍵結(jie)。

c. 洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)待測檢(jian)體(ti)，加(jia)入(ru)帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)二次抗ti，與(yu)待測的(de)壹次抗ti鍵結(jie)。

d. 洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)未(wei)鍵結(jie)二次抗ti，加(jia)入(ru)酶(mei)底(di)物(wu)使酶(mei)呈色(se)，藉儀器（ELISA reader）測(ce)定(ding)塑(su)膠(jiao)盤中的(de)吸(xi)光值(zhi)（OD值(zhi)），以評估有(you)色(se)終產物(wu)的(de)含量(liang)即可(ke)測量(liang)待測抗ti的(de)含量(liang)。

原(yuan)理(li)：利用酶(mei)標記(ji)的(de)抗抗ti以檢測已(yi)與(yu)固相(xiang)結(jie)合(he)的(de)受檢(jian)抗ti。

3. 競(jing)爭(zheng)法

競(jing)爭(zheng)法是(shi)壹種(zhong)較少用到(dao)的(de)ELISA檢(jian)測(ce)機(ji)制，壹般(ban)用於檢(jian)測小(xiao)分子(zi)抗原(yuan)，其操作步驟(zhou)為(wei)：

a. 將(jiang)具有(you)專壹性的(de)抗ti固著於塑(su)膠孔盤上，完成(cheng)後(hou)洗去(qu)多(duo)余(yu)抗ti

b. 加(jia)入(ru)待測檢(jian)體(ti)，使(shi)檢(jian)體(ti)中的(de)待測抗原(yuan)與(yu)塑膠孔盤上的(de)抗ti進行(xing)專壹性鍵結(jie)

c. 加(jia)入(ru)帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)抗原(yuan)，此抗原(yuan)也(ye)可(ke)與塑膠孔盤上的(de)抗ti進行(xing)專壹性鍵結(jie)，由於塑(su)膠孔盤上固著的(de)抗ti數量(liang)有限(xian)，因此當檢體(ti)中抗原(yuan)的(de)量(liang)越多(duo)，則(ze)帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)抗原(yuan)可(ke)鍵結(jie)的(de)固著抗ti就(jiu)越少，亦(yi)即(ji)，兩(liang)種(zhong)抗原(yuan)皆(jie)競相(xiang)與(yu)塑膠孔盤上抗ti鍵結(jie)，即(ji)所(suo)謂(wei)競(jing)爭法之(zhi)由來(lai)。

d. 洗(xi)去(qu)檢(jian)體(ti)與(yu)帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)抗原(yuan)，加(jia)入酶(mei)底(di)物(wu)使酶(mei)呈色(se)，當檢(jian)體(ti)中抗原(yuan)量(liang)越多(duo)，代表塑(su)膠孔盤內留下(xia)之(zhi)帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)抗原(yuan)越少，顯色(se)也(ye)就(jiu)越淺。

e. 當(dang)需要(yao)偵(zhen)測(ce)無(wu)法獲得兩(liang)種(zhong)以上單(dan)壹性抗ti的(de)抗原(yuan)，或是(shi)不(bu)易得到(dao)足(zu)夠的(de)純化(hua)抗ti以固著於孔盤上時，壹般(ban)會(hui)考慮(lv)使用競爭(zheng)法ELISA。

免責(ze)聲(sheng)明(ming)：

1. 試(shi)劑(ji)盒(he)僅供研究使(shi)用，不(bu)得用於臨(lin)床實(shi)驗或人(ren)體(ti)實(shi)驗，否則(ze)所產生(sheng)的(de)壹切(qie)後(hou)果，由實(shi)驗者(zhe)承擔(dan)，本(ben)公司(si)概(gai)不(bu)負責(ze)。

2. 嚴格按照說(shuo)明(ming)書操(cao)作，實驗者(zhe)違(wei)反(fan)說明(ming)書操(cao)作，後(hou)果由實(shi)驗者(zhe)承擔(dan)。

公司(si)其他產(chan)品：

人(ren)β-神經(jing)生(sheng)長因子(zi)(β-NGF)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

人(ren)鈣聯(lian)接(jie)蛋(dan)白(bai)(CLGN)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

人(ren)基質蛋(dan)白(bai)Del-1(Del-1)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

人(ren)轉錄(lu)因子(zi)SOX5(SOX5)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

人(ren)抑制素(su)β-B(Inhbb)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

人(ren)6-磷酸(suan)葡(pu)萄(tao)糖(tang)脫(tuo)氫酶(mei)(6PGD)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

人(ren)鈣粘(zhan)連蛋(dan)白(bai)(H-Cad)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

人(ren)鎂(mei)離(li)子(zi)轉運蛋(dan)白(bai)1(MAGT1)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠抗紅(hong)細胞抗體(ti)(RBC)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠9型腺(xian)相(xiang)關(guan)病毒(AAV9)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠硒蛋(dan)白(bai)P(Se-P)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠B-細胞激活因子(zi)受體(ti)(BAFFR)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠血清反(fan)應因子(zi)(SRF)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠視(shi)紫質(RHO)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠乳(ru)腺癌(ai)標誌物(wu)-CA153(CA153)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠克(ke)拉(la)拉(la)細胞蛋(dan)白(bai)(CC16)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠支(zhi)鏈(lian)氨(an)基酸(suan)轉(zhuan)氨(an)酶(mei)(BCAT)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠支(zhi)鏈(lian)α-酮酸(suan)脫(tuo)氨酶(mei)(BCKD)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠蛋(dan)氨(an)酸(suan)腺(xian)苷轉移酶(mei)(MAT)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)