小鼠(shu)嗜(shi)酸(suan)細胞(Eotaxin2/CCL24)ELISA試(shi)劑盒(he)

檢測原(yuan)理

試劑(ji)盒(he)采(cai)用雙(shuang)抗原(yuan)壹(yi)-步夾(jia)心法酶(mei)聯免疫吸(xi)附(fu)試(shi)驗(ELISA) 。往預先包(bao)被病毒(du)性(xing)腹瀉病(bing)毒(du)抗ti的(de)包(bao)被微孔中(zhong)，依(yi)次(ci)加(jia)入標本、HRP標(biao)記的(de)檢測抗原(yuan)，經過(guo)溫育並(bing)徹(che)di洗滌(di)。用底(di)物TMB顯(xian)色，TMB在(zai)過(guo)氧化物酶(mei)的(de)催(cui)化(hua)下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)藍色，並在(zai)suan的(de)作用(yong)下轉(zhuan)化成(cheng)最(zui)終的(de)黃(huang)色。用酶標儀(yi)在(zai)450NM波(bo)長(chang)下測定(ding)吸(xi)光度(OD值(zhi)) ，與(yu)CUTOFF值(zhi)相(xiang)比(bi)較(jiao)，從(cong)而判定(ding)標(biao)本中(zhong)豬(zhu)病(bing)毒(du)性(xing)腹瀉病(bing)毒(du)(BVDV) 的(de)存在(zai)與(yu)否(fou)。

樣品(pin)收(shou)集(ji)、處理及(ji)保(bao)存方法

1.血(xue)清(qing):使用(yong)不(bu)含熱(re)原(yuan)和內(nei)毒(du)素(su)的(de)試(shi)管，操作過(guo)程中(zhong)避(bi)免(mian)任(ren)何細胞刺(ci)激，收(shou)集(ji)血(xue)液(ye)後(hou)，3000轉(zhuan)離心10分鐘(zhong)將血(xue)清(qing)和紅(hong)細胞迅速小(xiao)心地分離(li)。

2.血(xue)漿(jiang): EDTA、檸檬suan鹽(yan)或肝(gan)素(su)抗凝(ning)。3000轉(zhuan)離心30分鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。

3.細胞上(shang)清(qing)液(ye): 3000轉(zhuan)離心10分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆粒(li)和聚(ju)合(he)物。

4.組(zu)織勻(yun)漿(jiang):將組(zu)織加(jia)入適量生理鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎(sui)。3000轉(zhuan) 離心10分鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。

5.保(bao)存:如(ru)果(guo)樣(yang)本(ben)收(shou)集(ji)後(hou)不(bu)及(ji)時檢測，請(qing)按(an)壹(yi)次(ci)用(yong)量分(fen)裝(zhuang)，凍(dong)存於-20°C， 避(bi)免(mian)反

復(fu)凍融(rong)，在(zai)室(shi)溫(wen)下解凍並(bing)確(que)保(bao)樣(yang)品(pin)均(jun)勻地充分(fen)解(jie)凍。

自(zi)備物品(pin)

1.酶(mei)標(biao)儀(yi)(450NM)

2.高精(jing)度加(jia)樣(yang)器(qi)及(ji)槍(qiang)頭: 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL

3.37℃恒(heng)溫(wen)箱(xiang)

操(cao)作註(zhu)意事項(xiang)

1.試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)存在(zai)2-8°C，使用(yong)前(qian)室(shi)溫(wen)平(ping)衡20分鐘(zhong)。從(cong)冰箱(xiang)取出(chu)的(de)濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)會(hui)有(you)結晶(jing)，這(zhe)屬於(yu)正(zheng)常(chang)現象(xiang)，水(shui)浴(yu)加(jia)熱使結晶(jing)完quan溶(rong)解(jie)後(hou)再使用(yong)。

2.實驗中(zhong)不(bu)用(yong)的(de)板(ban)條(tiao)應立即(ji)放(fang)回自封(feng)袋中(zhong)，密封(feng)(低(di)溫(wen)幹燥)保(bao)存。

3.預處理後(hou)的(de)樣(yang)本(ben)請(qing)按(an)照操(cao)作步驟(zhou)用樣ben稀(xi)釋(shi)ye適當(dang)稀(xi)釋(shi)以(yi)達(da)到(dao)試劑(ji)盒(he)的(de)的(de)最(zui)jia檢測效(xiao)果(guo)。.

4.嚴(yan)格(ge)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)中(zhong)標(biao)明(ming)的(de)時(shi)間(jian)、加(jia)液(ye)量及(ji)順序(xu)進行(xing)溫育操(cao)作。

5.所(suo)有(you)液(ye)體(ti)組(zu)分使用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)搖(yao)勻(yun)。

常(chang)用方法：

1. 夾心(xin)法：

夾心(xin)法常(chang)用於(yu)檢測大(da)分子抗原(yuan)，壹(yi)般的(de)操(cao)作步驟(zhou)為:

a. 將具(ju)有(you)專(zhuan)壹(yi)性的(de)抗ti固(gu)著(zhu)（coating）於(yu)塑膠孔盤(pan)上(shang)，完(wan)成(cheng)後(hou)洗去(qu)多(duo)余抗ti

b. 加入(ru)待(dai)測檢體，檢體中(zhong)若(ruo)含有(you)待(dai)測的(de)抗原(yuan)，則其會與塑膠孔盤(pan)上(shang)的(de)抗ti進行(xing)專(zhuan)壹(yi)性鍵(jian)結

c. 洗去(qu)多(duo)余待(dai)測檢體，加(jia)入另(ling)壹(yi)種對抗原(yuan)專(zhuan)壹(yi)的(de)壹(yi)次抗ti，與待(dai)測抗原(yuan)進行(xing)鍵結

d. 洗去(qu)多(duo)余未鍵(jian)結壹(yi)次抗ti，加入(ru)帶有(you)酶的(de)二(er)次(ci)抗ti，與壹(yi)次抗ti鍵結

e. 洗去(qu)多(duo)余未鍵(jian)結二次抗ti，加入(ru)酶底(di)物使酵素呈色，以(yi)肉眼(yan)或(huo)儀(yi)器(qi)讀(du)取呈(cheng)色結果

原(yuan)理：針(zhen)對抗原(yuan)分子上(shang)2個(ge)不(bu)同抗原(yuan)決(jue)定簇(cu)的(de)單克(ke)隆(long)抗ti分別(bie)作為(wei)固(gu)相(xiang)抗ti和酶(mei)標抗ti，將大(da)分子抗原(yuan)分別(bie)制備(bei)固(gu)相(xiang)抗原(yuan)和酶(mei)標抗原(yuan)結合(he)物。

2. 間接(jie)法

間接(jie)法常(chang)用於(yu)檢測抗ti，壹(yi)般的(de)操(cao)作步驟(zhou)為：

a. 將已(yi)知的(de)抗原(yuan)固(gu)著(zhu)於塑膠孔盤(pan)上(shang)，完(wan)成(cheng)後(hou)洗去(qu)多(duo)余的(de)抗原(yuan)。

b. 加入(ru)待(dai)測檢體，檢體中(zhong)若(ruo)含有(you)待(dai)測的(de)壹(yi)次抗ti，則其會與塑膠孔盤(pan)上(shang)的(de)抗原(yuan)進行(xing)專(zhuan)壹(yi)性鍵(jian)結。

c. 洗去(qu)多(duo)余待(dai)測檢體，加(jia)入帶有(you)酶的(de)二(er)次(ci)抗ti，與待(dai)測的(de)壹(yi)次抗ti鍵結。

d. 洗去(qu)多(duo)余未鍵(jian)結二次抗ti，加入(ru)酶底(di)物使酶(mei)呈(cheng)色，藉儀(yi)器(qi)（ELISA reader）測定(ding)塑膠盤(pan)中(zhong)的(de)吸(xi)光值（OD值），以(yi)評(ping)估有(you)色終產物的(de)含量即(ji)可(ke)測量待(dai)測抗ti的(de)含量。

原(yuan)理：利(li)用酶(mei)標記的(de)抗抗ti以(yi)檢測已(yi)與(yu)固(gu)相(xiang)結合(he)的(de)受檢抗ti。

3. 競(jing)爭(zheng)法

競(jing)爭(zheng)法是壹(yi)種較(jiao)少用(yong)到(dao)的(de)ELISA檢測機(ji)制，壹(yi)般用(yong)於(yu)檢測小(xiao)分子抗原(yuan)，其操作步驟(zhou)為：

a. 將具(ju)有(you)專(zhuan)壹(yi)性的(de)抗ti固(gu)著(zhu)於塑膠孔盤(pan)上(shang)，完(wan)成(cheng)後(hou)洗去(qu)多(duo)余抗ti

b. 加入(ru)待(dai)測檢體，使檢體中(zhong)的(de)待(dai)測抗原(yuan)與塑膠孔盤(pan)上(shang)的(de)抗ti進行(xing)專(zhuan)壹(yi)性鍵(jian)結

c. 加入(ru)帶有(you)酶的(de)抗原(yuan)，此抗原(yuan)也可(ke)與塑膠孔盤(pan)上(shang)的(de)抗ti進行(xing)專(zhuan)壹(yi)性鍵(jian)結，由於(yu)塑膠孔盤(pan)上(shang)固(gu)著(zhu)的(de)抗ti數量有(you)限，因此(ci)當(dang)檢體中(zhong)抗原(yuan)的(de)量越(yue)多(duo)，則帶有(you)酶的(de)抗原(yuan)可(ke)鍵結的(de)固(gu)著(zhu)抗ti就(jiu)越(yue)少，亦(yi)即(ji)，兩種抗原(yuan)皆(jie)競(jing)相(xiang)與塑膠孔盤(pan)上(shang)抗ti鍵結，即(ji)所(suo)謂(wei)競(jing)爭(zheng)法之(zhi)由來(lai)。

d. 洗去(qu)檢體與(yu)帶有(you)酶的(de)抗原(yuan)，加入(ru)酶底(di)物使酶(mei)呈(cheng)色，當(dang)檢體中(zhong)抗原(yuan)量越(yue)多(duo)，代(dai)表塑膠孔盤(pan)內(nei)留下之(zhi)帶有(you)酶的(de)抗原(yuan)越少(shao)，顯(xian)色也就(jiu)越(yue)淺(qian)。

e. 當(dang)需(xu)要(yao)偵測無法獲得兩種以(yi)上(shang)單壹(yi)性抗ti的(de)抗原(yuan)，或是不(bu)易得到(dao)足(zu)夠的(de)純(chun)化(hua)抗ti以(yi)固(gu)著(zhu)於孔盤(pan)上(shang)時(shi)，壹(yi)般會(hui)考(kao)慮(lv)使用(yong)競(jing)爭(zheng)法ELISA。

免(mian)責(ze)聲明(ming)：

1. 試(shi)劑(ji)盒(he)僅(jin)供研究(jiu)使用(yong)，不(bu)得用於(yu)臨(lin)床實驗或人(ren)體實驗，否(fou)則所產(chan)生的(de)壹(yi)切後(hou)果(guo)，由實驗者承(cheng)擔，本(ben)公司概(gai)不(bu)負(fu)責(ze)。

2. 嚴(yan)格(ge)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)操(cao)作，實驗者違(wei)反說(shuo)明書(shu)操(cao)作，後(hou)果(guo)由實驗者承(cheng)擔。

公(gong)司其他產品：

人β-神(shen)經(jing)生長因(yin)子(β-NGF)elisa試(shi)劑盒(he)

人(ren)鈣聯接(jie)蛋白(bai)(CLGN)elisa試劑盒(he)

人(ren)基(ji)質蛋白(bai)Del-1(Del-1)elisa試劑盒(he)

人(ren)轉(zhuan)錄因子SOX5(SOX5)elisa試劑(ji)盒(he)

人(ren)抑(yi)制素(su)β-B(Inhbb)elisa試劑盒(he)

人(ren)6-磷酸(suan)葡萄糖(tang)脫氫(qing)酶(mei)(6PGD)elisa試(shi)劑盒(he)

人(ren)鈣粘連蛋白(bai)(H-Cad)elisa試劑盒(he)

人(ren)鎂(mei)離子轉(zhuan)運(yun)蛋白(bai)1(MAGT1)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠抗紅細胞抗體(RBC)elisa試(shi)劑盒(he)

大(da)鼠9型腺(xian)相(xiang)關病(bing)毒(du)(AAV9)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠硒(xi)蛋白(bai)P(Se-P)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠B-細胞激活因(yin)子受體(BAFFR)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)鼠血(xue)清(qing)反應因(yin)子(SRF)elisa試劑(ji)盒(he)

大(da)鼠視紫(zi)質(RHO)elisa試劑(ji)盒(he)

大(da)鼠乳(ru)腺(xian)癌標誌物-CA153(CA153)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠克(ke)拉拉(la)細胞蛋白(bai)(CC16)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠支(zhi)鏈氨基酸(suan)轉(zhuan)氨酶(BCAT)elisa試(shi)劑盒(he)

大(da)鼠支(zhi)鏈α-酮酸(suan)脫氨酶(BCKD)elisa試(shi)劑盒(he)

大(da)鼠蛋氨酸(suan)腺(xian)苷轉(zhuan)移酶(MAT)elisa試劑盒(he)