大(da)鼠CC趨化因子(zi)受(shou)體(ti)5(CCR-5)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠CC趨化因子(zi)受(shou)體(ti)5(CCR-5)elisa試劑盒(he)

檢(jian)測(ce)原(yuan)理(li)

試劑盒(he)采用(yong)雙(shuang)抗原壹-步夾心(xin)法酶聯免(mian)疫(yi)吸附(fu)試驗(yan)(ELISA) 。往(wang)預(yu)先(xian)包(bao)被(bei)病(bing)毒(du)性(xing)腹(fu)瀉(xie)病(bing)毒(du)抗ti的包(bao)被(bei)微孔中(zhong)，依(yi)次加入標(biao)本、HRP標(biao)記的檢(jian)測(ce)抗原，經過(guo)溫(wen)育(yu)並徹di洗滌。用(yong)底(di)物(wu)TMB顯(xian)色，TMB在過(guo)氧(yang)化物酶(mei)的(de)催化下轉(zhuan)化成藍(lan)色(se)，並在suan的作(zuo)用(yong)下(xia)轉(zhuan)化成最終(zhong)的(de)黃(huang)色(se)。用(yong)酶(mei)標(biao)儀在450NM波長(chang)下(xia)測定(ding)吸光度(du)(OD值) ，與CUTOFF值相(xiang)比較(jiao)，從而判(pan)定標(biao)本中(zhong)豬(zhu)病(bing)毒(du)性(xing)腹(fu)瀉(xie)病(bing)毒(du)(BVDV) 的存在與否(fou)。

樣品(pin)收(shou)集(ji)、處(chu)理及(ji)保存方(fang)法

1.血(xue)清(qing):使用(yong)不(bu)含(han)熱原(yuan)和內(nei)毒(du)素的(de)試管，操(cao)作過(guo)程(cheng)中(zhong)避(bi)免(mian)任(ren)何(he)細(xi)胞(bao)刺激，收集(ji)血(xue)液後(hou)，3000轉(zhuan)離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清(qing)和紅細(xi)胞(bao)迅速小心(xin)地(di)分(fen)離。

2.血(xue)漿: EDTA、檸檬suan鹽或(huo)肝素抗凝(ning)。3000轉(zhuan)離心(xin)30分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清。

3.細(xi)胞(bao)上(shang)清液: 3000轉(zhuan)離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)去除(chu)顆(ke)粒和(he)聚(ju)合物(wu)。

4.組織勻漿:將組(zu)織加入適量生理(li)鹽水(shui)搗(dao)碎(sui)。3000轉(zhuan) 離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清。

5.保存:如(ru)果(guo)樣本收集(ji)後(hou)不及(ji)時(shi)檢(jian)測(ce)，請(qing)按(an)壹次用(yong)量(liang)分(fen)裝，凍(dong)存於(yu)-20°C， 避(bi)免(mian)反

復(fu)凍(dong)融，在室溫(wen)下解凍(dong)並確保樣品(pin)均(jun)勻(yun)地充(chong)分(fen)解凍(dong)。

自(zi)備物(wu)品(pin)

1.酶標(biao)儀(450NM)

2.高精(jing)度(du)加樣(yang)器(qi)及(ji)槍(qiang)頭: 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL

3.37℃恒溫(wen)箱

操(cao)作註(zhu)意(yi)事項(xiang)

1.試劑盒(he)保存在2-8°C，使用(yong)前(qian)室溫平衡20分(fen)鐘(zhong)。從冰箱取出(chu)的(de)濃(nong)縮(suo)洗滌液會有(you)結晶，這(zhe)屬於正(zheng)常現(xian)象，水(shui)浴(yu)加熱(re)使結晶完quan溶解後(hou)再(zai)使(shi)用(yong)。

2.實驗(yan)中(zhong)不(bu)用(yong)的(de)板(ban)條(tiao)應(ying)立(li)即放回(hui)自(zi)封(feng)袋(dai)中(zhong)，密(mi)封(feng)(低(di)溫幹(gan)燥)保存。

3.預處(chu)理後(hou)的樣(yang)本請按照操(cao)作步(bu)驟(zhou)用(yong)樣(yang)ben稀釋ye適當稀(xi)釋以(yi)達到試劑盒(he)的的(de)最jia檢(jian)測(ce)效(xiao)果(guo)。.

4.嚴(yan)格按照說明書中(zhong)標(biao)明的時(shi)間、加液量及(ji)順序(xu)進行溫(wen)育(yu)操(cao)作。

5.所有(you)液體(ti)組分(fen)使(shi)用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)搖(yao)勻(yun)。

大(da)鼠CC趨化因子(zi)受(shou)體(ti)5(CCR-5)elisa試劑盒(he)

常用(yong)方(fang)法：

1. 夾心(xin)法：

夾心(xin)法常用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)大(da)分(fen)子(zi)抗原，壹般(ban)的操(cao)作步(bu)驟(zhou)為:

a. 將具(ju)有(you)專(zhuan)壹(yi)性(xing)的(de)抗ti固(gu)著(zhu)（coating）於塑(su)膠(jiao)孔盤上(shang)，完成(cheng)後(hou)洗去多(duo)余抗ti

b. 加入待(dai)測(ce)檢(jian)體(ti)，檢(jian)體(ti)中(zhong)若含(han)有(you)待(dai)測(ce)的(de)抗原，則其會與(yu)塑膠(jiao)孔盤上(shang)的抗ti進行專(zhuan)壹性(xing)鍵結

c. 洗去多(duo)余待(dai)測(ce)檢(jian)體(ti)，加入另(ling)壹(yi)種(zhong)對抗原專壹(yi)的壹(yi)次抗ti，與待(dai)測(ce)抗原進行鍵結

d. 洗去多(duo)余未鍵結壹次抗ti，加入帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)二次抗ti，與壹(yi)次抗ti鍵結

e. 洗去多(duo)余未鍵結二次抗ti，加入酶(mei)底(di)物使酵(jiao)素(su)呈(cheng)色(se)，以(yi)肉(rou)眼或(huo)儀器(qi)讀(du)取呈色(se)結果

原理(li)：針對抗原分(fen)子(zi)上(shang)2個不(bu)同抗原決定(ding)簇的(de)單克(ke)隆(long)抗ti分(fen)別作(zuo)為固(gu)相(xiang)抗ti和酶(mei)標(biao)抗ti，將大(da)分(fen)子(zi)抗原分(fen)別制(zhi)備(bei)固(gu)相(xiang)抗原和酶(mei)標(biao)抗原結合物。

2. 間接(jie)法

間接(jie)法常用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)抗ti，壹般(ban)的操(cao)作步(bu)驟(zhou)為：

a. 將已(yi)知的(de)抗原固(gu)著(zhu)於(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上(shang)，完成(cheng)後(hou)洗去多(duo)余的(de)抗原。

b. 加入待(dai)測(ce)檢(jian)體(ti)，檢(jian)體(ti)中(zhong)若含(han)有(you)待(dai)測(ce)的(de)壹(yi)次抗ti，則其會與(yu)塑膠(jiao)孔盤上(shang)的抗原進行專(zhuan)壹性(xing)鍵結。

c. 洗去多(duo)余待(dai)測(ce)檢(jian)體(ti)，加入帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)二次抗ti，與待(dai)測(ce)的(de)壹(yi)次抗ti鍵結。

d. 洗去多(duo)余未鍵結二次抗ti，加入酶(mei)底(di)物使酶(mei)呈色，藉(ji)儀(yi)器(qi)（ELISA reader）測定(ding)塑膠(jiao)盤(pan)中(zhong)的(de)吸光值(zhi)（OD值），以(yi)評估有(you)色(se)終(zhong)產(chan)物(wu)的含(han)量即可(ke)測(ce)量待(dai)測(ce)抗ti的含(han)量。

原理(li)：利用(yong)酶(mei)標(biao)記的抗抗ti以(yi)檢(jian)測(ce)已(yi)與(yu)固(gu)相(xiang)結合的受檢(jian)抗ti。

3. 競爭法

競爭法是壹種(zhong)較(jiao)少(shao)用(yong)到的(de)ELISA檢(jian)測(ce)機(ji)制(zhi)，壹(yi)般(ban)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)小分(fen)子(zi)抗原，其操(cao)作步(bu)驟(zhou)為：

a. 將具(ju)有(you)專(zhuan)壹(yi)性(xing)的(de)抗ti固(gu)著(zhu)於(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上(shang)，完成(cheng)後(hou)洗去多(duo)余抗ti

b. 加入待(dai)測(ce)檢(jian)體(ti)，使檢(jian)體(ti)中(zhong)的(de)待(dai)測(ce)抗原與塑(su)膠(jiao)孔盤上(shang)的抗ti進行專(zhuan)壹性(xing)鍵結

c. 加入帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)抗原，此抗原也可(ke)與(yu)塑膠(jiao)孔盤上(shang)的抗ti進行專(zhuan)壹性(xing)鍵結，由(you)於(yu)塑膠(jiao)孔盤上(shang)固(gu)著(zhu)的(de)抗ti數量(liang)有(you)限，因此當檢(jian)體(ti)中(zhong)抗原的量(liang)越多(duo)，則帶有(you)酶(mei)的(de)抗原可(ke)鍵結的固(gu)著(zhu)抗ti就(jiu)越(yue)少(shao)，亦(yi)即，兩種(zhong)抗原皆競(jing)相(xiang)與塑(su)膠(jiao)孔盤上(shang)抗ti鍵結，即所謂(wei)競爭法之由(you)來(lai)。

d. 洗去檢(jian)體(ti)與帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)抗原，加入酶(mei)底(di)物使酶(mei)呈色，當檢(jian)體(ti)中(zhong)抗原量越(yue)多(duo)，代(dai)表塑(su)膠(jiao)孔盤內(nei)留下之帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)抗原越少(shao)，顯(xian)色也就(jiu)越(yue)淺。

e. 當需要偵(zhen)測無(wu)法獲得兩(liang)種(zhong)以(yi)上(shang)單壹(yi)性抗ti的抗原，或(huo)是不易得(de)到足(zu)夠(gou)的(de)純化抗ti以(yi)固(gu)著(zhu)於(yu)孔盤上(shang)時，壹(yi)般(ban)會考(kao)慮使用(yong)競(jing)爭法ELISA。

免責聲(sheng)明：

1. 試劑盒(he)僅(jin)供(gong)研究(jiu)使(shi)用(yong)，不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)實(shi)驗(yan)或(huo)人(ren)體(ti)實驗(yan)，否(fou)則所產生(sheng)的壹(yi)切後(hou)果，由(you)實(shi)驗(yan)者承擔(dan)，本(ben)公(gong)司(si)概(gai)不(bu)負責(ze)。

2. 嚴(yan)格按照說明書操(cao)作，實(shi)驗(yan)者違(wei)反說明書操(cao)作，後(hou)果由(you)實(shi)驗(yan)者承擔(dan)。

公(gong)司(si)其(qi)他(ta)產品(pin)：

人(ren)β-神(shen)經(jing)生長(chang)因子(zi)(β-NGF)elisa試劑盒(he)

人(ren)鈣(gai)聯接(jie)蛋白(bai)(CLGN)elisa試劑盒(he)

人(ren)基(ji)質蛋白(bai)Del-1(Del-1)elisa試劑盒(he)

人(ren)轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子(zi)SOX5(SOX5)elisa試劑盒(he)

人(ren)抑(yi)制素β-B(Inhbb)elisa試劑盒(he)

人(ren)6-磷(lin)酸(suan)葡萄糖脫氫(qing)酶(mei)(6PGD)elisa試劑盒(he)

人(ren)鈣(gai)粘連蛋(dan)白(bai)(H-Cad)elisa試劑盒(he)

人(ren)鎂離子(zi)轉(zhuan)運(yun)蛋白(bai)1(MAGT1)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠抗紅細(xi)胞(bao)抗體(ti)(RBC)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠9型腺(xian)相(xiang)關病(bing)毒(du)(AAV9)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠硒(xi)蛋(dan)白(bai)P(Se-P)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠B-細(xi)胞(bao)激活因子(zi)受(shou)體(ti)(BAFFR)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠血(xue)清(qing)反應(ying)因(yin)子(zi)(SRF)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠視紫質(RHO)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠乳(ru)腺(xian)癌(ai)標(biao)誌物-CA153(CA153)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠克(ke)拉(la)拉(la)細(xi)胞(bao)蛋白(bai)(CC16)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠支(zhi)鏈氨基(ji)酸(suan)轉(zhuan)氨酶(BCAT)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠支(zhi)鏈α-酮(tong)酸(suan)脫氨酶(BCKD)elisa試劑盒(he)

大(da)鼠蛋(dan)氨酸(suan)腺(xian)苷(gan)轉(zhuan)移酶(MAT)elisa試劑盒(he)