大鼠(shu)BH3結(jie)構(gou)誘導(dao)蛋白(bai)(Bid)elisa試(shi)劑盒(he)

大(da)鼠(shu)BH3結(jie)構(gou)誘導(dao)蛋白(bai)(Bid)elisa試(shi)劑盒(he)

檢測(ce)原(yuan)理(li)

試(shi)劑盒(he)采用(yong)雙抗原(yuan)壹(yi)-步夾心(xin)法(fa)酶聯免疫(yi)吸(xi)附(fu)試(shi)驗(ELISA) 。往預(yu)先包被(bei)病毒性(xing)腹(fu)瀉病毒抗ti的包(bao)被(bei)微(wei)孔中，依(yi)次(ci)加(jia)入(ru)標本、HRP標記的(de)檢測(ce)抗原(yuan)，經(jing)過溫(wen)育並(bing)徹(che)di洗(xi)滌(di)。用底(di)物(wu)TMB顯(xian)色，TMB在過(guo)氧化(hua)物(wu)酶的催(cui)化(hua)下轉化(hua)成藍(lan)色，並(bing)在suan的作(zuo)用下(xia)轉化(hua)成最(zui)終的黃色。用(yong)酶標儀(yi)在(zai)450NM波長下(xia)測(ce)定(ding)吸(xi)光(guang)度(OD值(zhi)) ，與(yu)CUTOFF值(zhi)相(xiang)比較，從而(er)判(pan)定標本中(zhong)豬病毒性(xing)腹(fu)瀉病毒(BVDV) 的存(cun)在與(yu)否(fou)。

樣品(pin)收(shou)集、處理(li)及保存方法

1.血(xue)清(qing):使用(yong)不含熱原和內(nei)毒(du)素的(de)試(shi)管，操作(zuo)過程中避(bi)免任(ren)何(he)細胞(bao)刺(ci)激(ji)，收(shou)集血(xue)液後，3000轉離心(xin)10分鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清(qing)和紅細胞(bao)迅速(su)小(xiao)心(xin)地分(fen)離。

2.血(xue)漿: EDTA、檸檬(meng)suan鹽或(huo)肝素抗凝(ning)。3000轉離心(xin)30分鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。

3.細胞(bao)上(shang)清(qing)液: 3000轉離心(xin)10分鐘(zhong)去除顆粒和聚合(he)物(wu)。

4.組織勻漿:將(jiang)組織加入(ru)適(shi)量生理(li)鹽水(shui)搗碎(sui)。3000轉 離心(xin)10分鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。

5.保存:如果(guo)樣本(ben)收(shou)集後不及(ji)時檢測(ce)，請(qing)按(an)壹次用(yong)量分裝(zhuang)，凍存(cun)於(yu)-20°C， 避(bi)免反

復凍融，在室(shi)溫下解(jie)凍並(bing)確(que)保樣品(pin)均勻地充(chong)分(fen)解凍。

自(zi)備物(wu)品(pin)

1.酶標儀(yi)(450NM)

2.高(gao)精度加(jia)樣器(qi)及(ji)槍(qiang)頭(tou): 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL

3.37℃恒溫(wen)箱

操作(zuo)註意(yi)事(shi)項

1.試(shi)劑盒(he)保存在2-8°C，使用(yong)前(qian)室(shi)溫平衡(heng)20分鐘(zhong)。從冰(bing)箱取出(chu)的(de)濃縮(suo)洗(xi)滌(di)液會有(you)結(jie)晶(jing)，這(zhe)屬(shu)於(yu)正常現象，水(shui)浴(yu)加(jia)熱使結(jie)晶(jing)完(wan)quan溶解後再使(shi)用。

2.實(shi)驗中(zhong)不用的(de)板條(tiao)應(ying)立即(ji)放(fang)回自(zi)封(feng)袋中，密封(feng)(低溫(wen)幹燥)保存。

3.預處(chu)理(li)後的樣(yang)本請(qing)按(an)照操作(zuo)步驟(zhou)用(yong)樣(yang)ben稀釋(shi)ye適(shi)當(dang)稀(xi)釋(shi)以達(da)到(dao)試(shi)劑盒(he)的的(de)最(zui)jia檢測(ce)效果(guo)。.

4.嚴(yan)格(ge)按(an)照說明(ming)書中標明的(de)時間、加液量及順序進行(xing)溫育操作(zuo)。

5.所(suo)有液體(ti)組分使(shi)用(yong)前(qian)充分(fen)搖勻。

大鼠(shu)BH3結(jie)構(gou)誘導(dao)蛋白(bai)(Bid)elisa試(shi)劑盒(he)

常用(yong)方法：

1. 夾心(xin)法(fa)：

夾心(xin)法(fa)常(chang)用(yong)於(yu)檢測(ce)大分(fen)子抗原(yuan)，壹般的操作(zuo)步驟(zhou)為(wei):

a. 將(jiang)具有(you)專(zhuan)壹性(xing)的(de)抗ti固著(zhu)（coating）於(yu)塑膠(jiao)孔盤(pan)上，完(wan)成後洗(xi)去(qu)多余(yu)抗ti

b. 加入(ru)待(dai)測(ce)檢體(ti)，檢體(ti)中若(ruo)含有(you)待測(ce)的(de)抗原(yuan)，則(ze)其(qi)會(hui)與(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤(pan)上的(de)抗ti進行(xing)專壹(yi)性鍵(jian)結(jie)

c. 洗(xi)去(qu)多余(yu)待(dai)測(ce)檢體(ti)，加入(ru)另(ling)壹(yi)種(zhong)對抗原(yuan)專(zhuan)壹的(de)壹次抗ti，與(yu)待(dai)測(ce)抗原(yuan)進(jin)行鍵(jian)結(jie)

d. 洗(xi)去(qu)多余(yu)未(wei)鍵(jian)結(jie)壹(yi)次(ci)抗ti，加入(ru)帶(dai)有(you)酶的二(er)次(ci)抗ti，與(yu)壹(yi)次(ci)抗ti鍵(jian)結(jie)

e. 洗(xi)去(qu)多余(yu)未(wei)鍵(jian)結(jie)二(er)次(ci)抗ti，加入(ru)酶底(di)物(wu)使(shi)酵(jiao)素呈(cheng)色(se)，以肉(rou)眼(yan)或(huo)儀(yi)器(qi)讀取(qu)呈(cheng)色(se)結(jie)果(guo)

原理(li)：針對抗原(yuan)分(fen)子上(shang)2個(ge)不同(tong)抗原(yuan)決(jue)定簇(cu)的單克隆(long)抗ti分別(bie)作(zuo)為(wei)固相(xiang)抗ti和酶標抗ti，將(jiang)大分(fen)子(zi)抗原(yuan)分(fen)別(bie)制(zhi)備(bei)固相(xiang)抗原(yuan)和酶標抗原(yuan)結(jie)合(he)物(wu)。

2. 間接法

間接法常用於(yu)檢測(ce)抗ti，壹般的操作(zuo)步驟(zhou)為(wei)：

a. 將(jiang)已(yi)知(zhi)的(de)抗原(yuan)固著(zhu)於(yu)塑膠(jiao)孔盤(pan)上，完(wan)成後洗(xi)去(qu)多余(yu)的(de)抗原(yuan)。

b. 加入(ru)待(dai)測(ce)檢體(ti)，檢體(ti)中若(ruo)含有(you)待測(ce)的(de)壹(yi)次(ci)抗ti，則(ze)其(qi)會(hui)與(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤(pan)上的(de)抗原(yuan)進(jin)行專(zhuan)壹性鍵(jian)結(jie)。

c. 洗(xi)去(qu)多余(yu)待(dai)測(ce)檢體(ti)，加入(ru)帶(dai)有(you)酶的二(er)次(ci)抗ti，與(yu)待(dai)測(ce)的(de)壹(yi)次(ci)抗ti鍵(jian)結(jie)。

d. 洗(xi)去(qu)多余(yu)未(wei)鍵(jian)結(jie)二(er)次(ci)抗ti，加入(ru)酶底(di)物(wu)使(shi)酶呈(cheng)色(se)，藉(ji)儀(yi)器(qi)（ELISA reader）測(ce)定(ding)塑(su)膠(jiao)盤(pan)中的(de)吸(xi)光(guang)值(zhi)（OD值(zhi)），以(yi)評(ping)估(gu)有色(se)終產(chan)物(wu)的(de)含量即(ji)可(ke)測(ce)量待測(ce)抗ti的含量。

原理(li)：利用酶標記的(de)抗抗ti以檢測(ce)已(yi)與(yu)固相(xiang)結(jie)合(he)的受檢抗ti。

3. 競(jing)爭(zheng)法

競(jing)爭(zheng)法是(shi)壹種(zhong)較少用到的ELISA檢測(ce)機(ji)制(zhi)，壹(yi)般用於(yu)檢測(ce)小(xiao)分(fen)子(zi)抗原(yuan)，其(qi)操作(zuo)步驟(zhou)為(wei)：

a. 將(jiang)具有(you)專(zhuan)壹性(xing)的(de)抗ti固著(zhu)於(yu)塑膠(jiao)孔盤(pan)上，完(wan)成後洗(xi)去(qu)多余(yu)抗ti

b. 加入(ru)待(dai)測(ce)檢體(ti)，使檢體(ti)中的(de)待測(ce)抗原(yuan)與(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤(pan)上的(de)抗ti進行(xing)專壹(yi)性鍵(jian)結(jie)

c. 加入(ru)帶(dai)有(you)酶的抗原(yuan)，此抗原(yuan)也可(ke)與(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤(pan)上的(de)抗ti進行(xing)專壹(yi)性鍵(jian)結(jie)，由於(yu)塑膠(jiao)孔盤(pan)上固著(zhu)的抗ti數量有限，因(yin)此當(dang)檢體(ti)中抗原(yuan)的(de)量越多，則(ze)帶(dai)有(you)酶的抗原(yuan)可(ke)鍵(jian)結(jie)的(de)固著(zhu)抗ti就越(yue)少，亦即(ji)，兩(liang)種(zhong)抗原(yuan)皆(jie)競(jing)相(xiang)與(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤(pan)上抗ti鍵(jian)結(jie)，即(ji)所(suo)謂競(jing)爭(zheng)法之由來(lai)。

d. 洗(xi)去(qu)檢體(ti)與(yu)帶(dai)有(you)酶的抗原(yuan)，加(jia)入(ru)酶底(di)物(wu)使(shi)酶呈(cheng)色(se)，當(dang)檢體(ti)中抗原(yuan)量越多，代表塑膠(jiao)孔盤(pan)內留下之帶有(you)酶的抗原(yuan)越(yue)少，顯(xian)色也就越淺(qian)。

e. 當(dang)需(xu)要偵測(ce)無(wu)法獲(huo)得(de)兩(liang)種(zhong)以(yi)上(shang)單壹性(xing)抗ti的抗原(yuan)，或(huo)是(shi)不易得(de)到(dao)足(zu)夠的(de)純(chun)化(hua)抗ti以固著(zhu)於(yu)孔盤(pan)上時，壹般會考(kao)慮使用競(jing)爭(zheng)法ELISA。

免責聲明(ming)：

1. 試(shi)劑盒(he)僅(jin)供(gong)研究(jiu)使用(yong)，不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床實(shi)驗或(huo)人體(ti)實(shi)驗，否(fou)則(ze)所(suo)產(chan)生(sheng)的(de)壹(yi)切後果，由實(shi)驗者承擔，本公(gong)司(si)概(gai)不負責。

2. 嚴(yan)格(ge)按(an)照說明(ming)書操作(zuo)，實(shi)驗者違反說明(ming)書操作(zuo)，後果由實(shi)驗者承擔。

公(gong)司(si)其(qi)他(ta)產(chan)品(pin)：

人β-神經(jing)生長因(yin)子(β-NGF)elisa試(shi)劑盒(he)

人鈣(gai)聯接蛋白(bai)(CLGN)elisa試(shi)劑盒(he)

人基質(zhi)蛋白(bai)Del-1(Del-1)elisa試(shi)劑盒(he)

人轉錄因(yin)子SOX5(SOX5)elisa試(shi)劑盒(he)

人抑制素β-B(Inhbb)elisa試(shi)劑盒(he)

人6-磷酸(suan)葡(pu)萄糖(tang)脫(tuo)氫酶(6PGD)elisa試(shi)劑盒(he)

人鈣(gai)粘連蛋白(bai)(H-Cad)elisa試(shi)劑盒(he)

人鎂離子轉運蛋白(bai)1(MAGT1)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠(shu)抗紅細胞(bao)抗體(ti)(RBC)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠(shu)9型(xing)腺相(xiang)關病毒(AAV9)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠(shu)硒蛋白(bai)P(Se-P)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠(shu)B-細胞(bao)激(ji)活(huo)因(yin)子受體(ti)(BAFFR)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠(shu)血(xue)清(qing)反應因(yin)子(SRF)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠(shu)視紫質(zhi)(RHO)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠(shu)乳(ru)腺癌標誌(zhi)物(wu)-CA153(CA153)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠(shu)克拉拉細胞(bao)蛋白(bai)(CC16)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠(shu)支鏈(lian)氨基酸(suan)轉氨酶(BCAT)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠(shu)支鏈(lian)α-酮酸(suan)脫(tuo)氨酶(BCKD)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠(shu)蛋氨酸腺苷(gan)轉移酶(MAT)elisa試(shi)劑盒(he)