ELISA試(shi)劑盒實(shi)驗靈(ling)敏度(du)高(gao)的(de)原因(yin)

ELISA試(shi)劑盒試(shi)驗以靈(ling)敏度(du)較高(gao)、特(te)異性(xing)較(jiao)好(hao)的特(te)點(dian)在臨(lin)床(chuang)上得(de)到(dao)了(le)廣(guang)泛(fan)的(de)應(ying)用，但(dan)操(cao)作(zuo)中(zhong)的(de)各個環節(jie)對試驗(yan)的檢(jian)測(ce)效果影響較大，如(ru)不註(zhu)意，有(you)可(ke)能導(dao)致顯色(se)不全(quan)、花板等結(jie)果。我(wo)將(jiang)操(cao)作(zuo)中(zhong)各個環節(jie)常出(chu)現(xian)問題(ti)的原因及解(jie)決(jue)辦法(fa)總(zong)結(jie)於(yu)下(xia)，以期給同行帶來壹(yi)些啟(qi)發(fa)，提高(gao)試(shi)驗質(zhi)量(liang)。

ELISA試(shi)劑盒試(shi)驗操(cao)作(zuo)中(zhong)可(ke)能影響結果的(de)原(yuan)因及解(jie)決(jue)辦法(fa)分(fen)析(xi)：

1 選(xuan)擇(ze)試劑

選(xuan)擇(ze)質量(liang)優良的(de)檢測(ce)試劑，嚴格(ge)按(an)照(zhao)試劑說明(ming)書進行操(cao)作(zuo)，操(cao)作(zuo)前(qian)將(jiang)試劑在室(shi)溫下平衡30-60分鐘(zhong)。

2 加(jia)樣可(ke)能原(yuan)因：

1）血清(qing)或血漿(jiang)標(biao)本(ben)分(fen)離(li)不好(hao)即進行加樣；

2）手(shou)工(gong)操(cao)作(zuo)中(zhong)，加(jia)樣板過(guo)多(duo)造成(cheng)加(jia)樣後(hou)放入孵(fu)箱(xiang)前(qian)等待(dai)時(shi)間過(guo)長(chang)(特(te)別(bie)是(shi)室(shi)內(nei)溫度(du)較高(gao)時(shi))；

3）加(jia)完標本再(zai)加(jia)酶(mei)試劑時酶(mei)濺(jian)出(chu)孔外(wai)。

ELISA試(shi)劑盒解(jie)決(jue)辦法(fa)：

1） 標(biao)本為血清(qing)：最好(hao)將血液(ye)先(xian)自然存放1-2小時後，再(zai)用3000rmp離(li)心(xin)15分(fen)鐘(zhong)；標本為(wei)血漿(jiang)：必須(xu)使用含(han)抗凝劑的血液(ye)標(biao)本(ben)收集管(guan)，采(cai)血後(hou)必須(xu)立即(ji)顛倒(dao)采(cai)血管(guan)混(hun)合(he)5-10次(ci)，放置(zhi)壹(yi)段時(shi)間後，3000rpm離(li)心(xin)15分(fen)鐘(zhong)；若(ruo)在幾天內(nei)檢測(ce)，可(ke)放在2-8℃冰箱(xiang)中(zhong)，若(ruo)要(yao)貯(zhu)存，則置(zhi)於(yu)-20℃的(de)低溫冰箱(xiang)內(nei)。

2) 加(jia)樣後(hou)及時(shi)放入孵(fu)箱(xiang)。

3) 加(jia)酶(mei)試劑後用吸(xi)水(shui)紙(zhi)在(zai)酶(mei)標板表面(mian)輕(qing)拭(shi)吸(xi)幹(gan)。

4) 如(ru)果采(cai)用AT或(huo)其(qi)他全(quan)自動(dong)加(jia)樣，最好(hao)選(xuan)擇(ze)FAME或其(qi)他後(hou)處理儀(yi)器(qi)加酶(mei)試劑。

5) 標(biao)本較多(duo)時(shi)，請(qing)分(fen)批(pi)操(cao)作(zuo)。

3 孵(fu)育可(ke)能原(yuan)因：

1) 孵(fu)育時(shi)未貼(tie)封(feng)片或(huo)加(jia)蓋(gai)，使標(biao)本(ben)或稀釋液(ye)蒸(zheng)發(fa)，吸(xi)附(fu)於(yu)孔(kong)壁，難(nan)於(yu)清(qing)洗(xi)che底；

2) 孵(fu)育時(shi)間人(ren)為延(yan)長(chang)，導致非(fei)特(te)異性(xing)結(jie)合(he)緊附於(yu)反應(ying)孔周圍，難(nan)以清(qing)洗(xi)che底。