ELISA試劑盒實(shi)驗做(zuo)了(le)很多(duo)次,可是(shi)結(jie)果(guo)還(hai)是(shi)有(you)偏(pian)差(cha)?可能(neng)很多(duo)同(tong)學都(dou)會(hui)出現(xian)這(zhe)樣的問題,那麽問題到(dao)底(di)出(chu)在哪(na)呢(ne),今(jin)天小(xiao)編(bian)就(jiu)來給(gei)大(da)家總(zong)結(jie)壹下,ELISA試(shi)劑盒實(shi)驗中(zhong)會經(jing)常(chang)遇見的問題。
壹、ELISA試劑盒簡(jian)介
酶(mei)聯免(mian)疫(yi)吸附(fu)測定是(shi)在(zai)免(mian)疫(yi)酶技術(shu)的基(ji)礎(chu)上發(fa)展起(qi)來的壹種新(xin)型(xing)的免(mian)疫(yi)測定技術。
二、ELISA試(shi)劑盒的應(ying)用
1.免(mian)疫(yi)酶染色各種細胞內成份的定(ding)位。
2.研(yan)究抗酶(mei)抗(kang)體的合(he)成。
3.顯現(xian)微量的免(mian)疫(yi)沈澱(dian)反(fan)應。
4.定量檢(jian)測體液中(zhong)抗原(yuan)或抗體成份。
三(san)、ELISA試(shi)劑盒實(shi)驗疑(yi)難(nan)問題解(jie)答(da)
1.非正(zheng)常(chang)的樣(yang)本(ben)值
①不正(zheng)確(que)的收(shou)集(ji)或保(bao)存
解(jie)決方案(an):確(que)保(bao)正確(que)的底(di)物(wu)體(ti)積混合(he)。如果(guo)底(di)物(wu)是(shi)凍(dong)幹(gan)粉,用相(xiang)應緩(huan)沖(chong)液重懸(xuan)*,充(chong)分(fen)混(hun)合(he)並(bing)在壹定時(shi)間內使(shi)用。
②不正(zheng)確(que)的樣(yang)本(ben)制(zhi)備(bei)
說(shuo)明書中(zhong)樣本(ben)制(zhi)備(bei)方法已(yi)經(jing)過(guo)性(xing)能測試驗證(zheng),嚴格按(an)照說(shuo)明書推薦進(jin)行。確(que)保(bao)使(shi)用正(zheng)確(que)的校正稀(xi)釋液。
2.信(xin)號(hao)強(qiang)度(du)增(zeng)長(chang)不充(chong)分(fen)
①底(di)物(wu)準(zhun)備(bei)有(you)誤(wu)
解(jie)決方案(an):確(que)保(bao)正確(que)的底(di)物(wu)體(ti)積並混(hun)合(he)。如果(guo)底(di)物(wu)是(shi)凍(dong)幹(gan)粉,用相(xiang)應緩(huan)沖(chong)液重懸(xuan),充(chong)分(fen)混(hun)合(he)並(bing)在壹定時(shi)間內使(shi)用。
②每孔(kong)底(di)物(wu)添(tian)加體積(ji)有誤(wu)
解(jie)決方案(an):保(bao)證(zheng)移(yi)液(ye)器正(zheng)常(chang)工作(zuo),必要(yao)時(shi)進(jin)行重(zhong)新(xin)校正。保(bao)證(zheng)移(yi)液(ye)器吸頭連接緊(jin)密。
③孵(fu)育(yu)時(shi)間或溫(wen)度(du)有誤(wu)
解(jie)決方案(an):嚴格按(an)照推薦的孵(fu)育(yu)時間和(he)溫(wen)度(du)進(jin)行實(shi)驗,避(bi)免在環(huan)境條件變(bian)化的位置(zhi)孵(fu)育(yu)96孔(kong)板(如放(fang)在(zai)通風處或窗臺(tai)邊(bian))。
④偶(ou)聯(lian)物(wu)或(huo)底(di)物(wu)準(zhun)備(bei)有(you)誤(wu)
解(jie)決方案(an):確(que)保(bao)混合(he)相(xiang)同(tong)體(ti)積(ji)的偶(ou)聯(lian)物(wu)和(he)底(di)物(wu)。加(jia)入後會(hui)立即(ji)顯色。底(di)物(wu)在(zai)使(shi)用前(qian)應(ying)避光(guang)保(bao)存。
⑤儀(yi)器設(she)置(zhi)不正(zheng)確(que)
解(jie)決方案(an):確(que)保(bao)酶標(biao)儀使(shi)用了(le)正確(que)的濾(lv)光(guang)片,確(que)保(bao)按(an)照說(shuo)明書,正(zheng)確(que)的配(pei)置(zhi)儀(yi)器參(can)數。
3.邊緣效應(ying)
①工(gong)作臺(tai)溫(wen)度(du)不均(jun)衡(heng)
解(jie)決方案(an):避(bi)免在環(huan)境條件變(bian)化的位置(zhi)孵(fu)育(yu),如放(fang)在(zai)通風處或窗臺(tai)邊(bian)。
②體(ti)系液(ye)體蒸(zheng)發
解(jie)決方案(an):保(bao)證(zheng)移(yi)液(ye)器正(zheng)常(chang)工作(zuo),必要(yao)時(shi)進(jin)行重(zhong)新(xin)校正。保(bao)證(zheng)移(yi)液(ye)器吸頭連接緊(jin)密。
③疊板(ban)孵(fu)育時(shi)避免疊板(ban)。