微生(sheng)物(wu)苯(ben)基(ji)脲(niao)酶(mei)(PUH)elisa檢測試劑(ji)盒廠(chang)家

微(wei)生(sheng)物(wu)苯(ben)基(ji)脲(niao)酶(mei)(PUH)elisa檢測試劑(ji)盒廠(chang)家

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ELISA試劑(ji)盒檢測概述(shu)

ELISA (酶(mei)聯接(jie)免(mian)疫吸(xi)附(fu)反應(ying)分(fen)析(xi))是(shi)以(yi)免(mian)疫學反應(ying)為基(ji)礎(chu),將抗原(yuan)、抗(kang)ti的(de)特(te)異性(xing)反應(ying)與(yu)酶(mei)對底物(wu)的(de)高(gao)效(xiao)催(cui)化作用(yong)相結合起來的(de)壹-種(zhong)敏感性(xing)很高(gao)的(de)實驗技(ji)術。由於抗原(yuan)、 抗(kang)ti的(de)反(fan)應(ying)在(zai)壹種(zhong)固(gu)相載(zai)體-聚苯(ben)Z烯微(wei)量(liang)滴定(ding)板的(de)孔(kong)中(zhong)進(jin)行(xing)，每(mei)加入壹種(zhong)試(shi)劑(ji)孵育(yu)後(hou)，可通(tong)過洗滌除去(qu)多(duo)余的(de)遊(you)離(li)反(fan)應(ying)物(wu)，從(cong)而保(bao)證試驗結果的(de)特(te)異性(xing)與(yu)穩(wen)定性(xing)。實際應用(yong)中，通過(guo)不(bu)同的(de)設計(ji)，具(ju)體(ti)的(de)方(fang)法步(bu)驟可(ke)有多(duo)種(zhong)。即(ji):用(yong)於檢測抗ti的(de)間接(jie)法、用(yong)於檢測抗原(yuan)的(de)雙抗ti夾心(xin)法以(yi)及(ji)用(yong)於檢測小分(fen)子抗(kang)原(yuan)或半(ban)抗(kang)原的(de)抗(kang)原(yuan)競(jing)爭(zheng)法等(deng)等。目(mu)前(qian)我們對客戶提(ti)供比較(jiao)常用(yong)的(de)ELISA雙抗ti夾心(xin)法及(ji)ELISA間接(jie)法服務。

實驗過程:

1.試劑(ji)準備(bei):所(suo)有試(shi)劑(ji)都(dou)必(bi)須(xu)在(zai)使用(yong)前達(da)到(dao)室溫,使用(yong)後請(qing)立(li)即(ji)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)要求保(bao)存試(shi)劑(ji)。實驗操作中(zhong)請(qing) 使用(yong)壹次性(xing)的(de)吸(xi)頭(tou),避免(mian)交叉汙染(ran)。

2.加樣(yang):加(jia)樣(yang)或(huo)加試劑(ji)時，請(qing)註(zhu)意在(zai)吸(xi)取(qu)標本(ben)/標準品，酶(mei)結(jie)合物(wu)或(huo)底物(wu)時(shi)，第(di)yi個孔與(yu)最(zui)hou-壹個孔加樣(yang)之(zhi)間的(de)時(shi)間間隔如果太(tai)大，將會導(dao)致(zhi)不(bu)同的(de)“預孵育(yu)“時(shi)間,從(cong)而明(ming)顯(xian)地(di)影(ying)響到(dao)測量(liang)值的(de)準確(que)性(xing)及重(zhong)復(fu)性(xing)。壹次加樣(yang)時(shi)間(包括標準品及所(suo)有樣(yang)品) 將控(kong)制在(zai)10分(fen)鐘(zhong)內(nei),如標本(ben)數(shu)量(liang)多(duo),推薦使用(yong)多(duo)道移(yi)液(ye)器(qi)加(jia)樣(yang)。

3.孵育(yu):為防止(zhi)樣(yang)品蒸發(fa),試(shi)驗時將反應(ying)板(ban)放於鋪有(you)濕布的(de)密(mi)閉盒(he)內(nei)，酶(mei)標板(ban)加(jia)上(shang)蓋或覆(fu)膜，以(yi)避(bi)免(mian)液(ye)體(ti)蒸發(fa);洗板後(hou)應盡快進(jin)行(xing)下(xia)步(bu)操作,任何時(shi)侯(hou)都(dou)應避免(mian)酶(mei)標板(ban)處於幹燥(zao)狀態(tai):同時應(ying)嚴格(ge)遵(zun)守(shou)給定(ding)的(de)孵育(yu)時(shi)間和溫(wen)度(du)。

4.洗滌:洗滌過程(cheng)中(zhong)反(fan)應孔中(zhong)殘(can)留的(de)洗滌液(ye)應(ying)在(zai)濾(lv)紙上(shang)充分(fen)拍幹，勿(wu)將濾(lv)紙直接(jie)放入反(fan)應孔(kong)中吸(xi)水，同時要消除(chu)板底殘留的(de)液(ye)體(ti)和手(shou)指印，避(bi)免(mian)影(ying)響最(zui)hou的(de)酶(mei)標儀(yi)讀(du)數(shu)。

ELISA試(shi)劑(ji)盒操作註(zhu)意事(shi)項(xiang)：

1）試(shi)劑(ji)應按(an)標簽(qian)說(shuo)明(ming)書(shu)儲(chu)存(cun)，使用(yong)前恢復(fu)到(dao)室溫。稀(xi)稀(xi)過後的(de)標準品應丟(diu)棄，不(bu)可(ke)保(bao)存(cun)。

2）實驗中不(bu)用(yong)的(de)板(ban)條(tiao)應(ying)立(li)即放回包裝袋中(zhong)，密(mi)封(feng)保存，以(yi)免(mian)變(bian)質(zhi)。

3）不(bu)用(yong)的(de)其(qi)它試(shi)劑(ji)應包(bao)裝好或(huo)蓋(gai)好。不(bu)同批號的(de)試(shi)劑(ji)不(bu)要混用(yong)。保質前(qian)使用(yong)。

4）使用(yong)壹次性(xing)的(de)吸(xi)頭(tou)以(yi)免(mian)交叉汙染(ran)，吸(xi)取(qu)終(zhong)止(zhi)液(ye)和底物(wu)A、B液(ye)時(shi)，避(bi)免(mian)使用(yong)帶(dai)金屬(shu)部分(fen)的(de)加(jia)樣(yang)器(qi)。

5）使用(yong)幹凈的(de)塑(su)料(liao)容(rong)器(qi)配(pei)置(zhi)洗滌液(ye)。使用(yong)前充分(fen)混勻試劑(ji)盒裏(li)的(de)各(ge)種(zhong)成(cheng)份(fen)及(ji)樣(yang)品。

6）洗滌酶(mei)標板(ban)時(shi)應(ying)充分(fen)拍幹，不(bu)要將吸(xi)水紙直接(jie)放入酶(mei)標反(fan)應(ying)孔(kong)中吸(xi)水。

7）底物(wu)A應(ying)揮(hui)發(fa)，避(bi)免(mian)長(chang)時(shi)間打(da)開(kai)蓋(gai)子。底物(wu)B對光敏感，避(bi)免(mian)長(chang)時(shi)間暴露於光下。避(bi)免(mian)用(yong)手(shou)接(jie)觸，有(you)毒(du)。實驗完成(cheng)後應立即(ji)讀(du)取(qu)OD值。

8）加(jia)入試(shi)劑(ji)的(de)順(shun)序應(ying)壹致(zhi)，以(yi)保(bao)證所(suo)有反(fan)應(ying)板(ban)孔溫育的(de)時(shi)間壹樣(yang)。

9）按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)中(zhong)標明(ming)的(de)時(shi)間、加液(ye)的(de)量(liang)及順(shun)序進(jin)行(xing)溫(wen)育(yu)操作。

微生(sheng)物(wu)苯(ben)基(ji)脲(niao)酶(mei)(PUH)elisa檢測試劑(ji)盒廠(chang)家

ELISA試劑(ji)盒樣(yang)品收(shou)集(ji)、處理及保(bao)存(cun)方(fang)法：

1）血清-----操作過(guo)程(cheng)中避免(mian)任何細(xi)胞刺激(ji)。使用(yong)不(bu)含(han)熱(re)原和內(nei)毒(du)素的(de)試(shi)管(guan)。收(shou)集(ji)血液(ye)後(hou)，1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘(zhong)將血清和紅細(xi)胞迅速(su)小(xiao)心(xin)地(di)分(fen)離(li)。

2）血漿-----EDTA、檸檬(meng)酸鹽(yan)、肝(gan)素血漿可用(yong)於檢測。1000×g離(li)心(xin)30分(fen)鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)。

3）細(xi)胞上(shang)清液(ye)---1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)和聚(ju)合物(wu)。

4）組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)-----將組(zu)織(zhi)加(jia)入適(shi)量(liang)生(sheng)理鹽(yan)水搗碎。1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清液(ye)

5）保(bao)存(cun)------如果樣(yang)品不(bu)立(li)即(ji)使用(yong)，應將其分(fen)成(cheng)小部分(fen)-70 ℃保(bao)存(cun)，避(bi)免(mian)反復(fu)冷(leng)凍。盡(jin)可能的(de)不(bu)要使用(yong)溶(rong)血。如果血清中大量(liang)顆粒(li)，檢測前先(xian)離(li)心(xin)或過(guo)濾(lv)。不(bu)要在(zai)37℃或更(geng)高(gao)的(de)溫(wen)度(du)加(jia)熱(re)解凍。

試(shi)劑(ji)盒的(de)儲(chu)存(cun)及(ji)有(you)效(xiao)期(qi)：

未(wei)開(kai)封(feng)的(de)試(shi)劑(ji)盒：所(suo)有試(shi)劑(ji)均按(an)試劑(ji)瓶標簽(qian)上(shang)所(suo)示(shi)保存(cun)。請(qing)註(zhu)意，收(shou)到(dao)試劑(ji)盒後(hou)請(qing)盡(jin)快將TMB 洗滌液(ye)，終(zhong)止(zhi)液(ye)保(bao)存(cun)於4℃，其他試劑(ji)保存(cun)於-20℃。

使用(yong)後的(de)試(shi)劑(ji)盒：剩(sheng)余試劑(ji)仍需按(an)照試(shi)劑(ji)瓶標簽(qian)所(suo)示(shi)的(de)溫(wen)度(du)保(bao)存，開(kai)封(feng)後的(de)酶(mei)標板(ban)要加幹(gan)燥(zao)劑(ji)後密(mi)封(feng)保存於-20℃，避免(mian)潮濕。

穩(wen)定性(xing)：經測(ce)定(ding)，試(shi)劑(ji)盒在(zai)有效(xiao)期(qi)內(nei)按(an)推薦溫(wen)度(du)保(bao)存，其(qi)活性(xing)降低(di)率小於5%。為減小外部因(yin)素(su)對試劑(ji)盒破壞(huai)前後(hou)檢測值的(de)影(ying)響，實驗室的(de)環(huan)境(jing)條件(jian)需盡(jin)量(liang)保持(chi)壹致(zhi)，尤(you)其是實驗室內溫(wen)度(du)、濕度(du)及(ji)溫育(yu)條件(jian)。其次由同壹實驗員來進(jin)行(xing)操作可(ke)減少人(ren)為誤(wu)差(cha)。

免(mian)責聲明(ming)

試(shi)劑(ji)盒僅(jin)供研究(jiu)使用(yong)，不(bu)得(de)用(yong)於臨床(chuang)實驗或人(ren)體實驗，否則(ze)所(suo)產生(sheng)的(de)壹切後果(guo)，由(you)實驗者(zhe)承(cheng)擔，本公司概不(bu)負(fu)責。

嚴格(ge)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)操作，實驗者(zhe)違(wei)反(fan)說(shuo)明(ming)書(shu)操作，後(hou)果(guo)由實驗者(zhe)承(cheng)擔。

[說 明(ming)]

1.由(you)於現有(you)條(tiao)件(jian)及科學技(ji)術水平(ping)尚不(bu)能對所(suo)有供貨商(shang)提(ti)供的(de)所(suo)有原(yuan)料(liao)進(jin)行(xing)全(quan)面(mian)的(de)鑒(jian)定(ding)與(yu)分(fen)析(xi)，本(ben)產(chan)品可能存在(zai)壹定(ding)的(de)質(zhi)量(liang) 技(ji)術風險(xian)。

2.最(zui)終(zhong)的(de)實驗結果與(yu)試劑(ji)的(de)有(you)效(xiao)性(xing)、實驗者(zhe)的(de)相(xiang)關操作以(yi)及(ji) 當(dang)時(shi)的(de)實驗環(huan)境(jing)密(mi)切相關，請(qing)務必(bi)準備(bei)充足(zu)的(de)標本(ben)備(bei)份(fen)。

3.不(bu)同批次的(de)同壹產(chan)品可能會有(you)少許(xu)差(cha)別，如:檢測限(xian)、靈敏度(du)以(yi)及(ji)顯色時(shi)間等，請(qing)依據試(shi)劑(ji)盒內(nei)說明(ming)書(shu)進(jin)行(xing)實驗操作，網(wang)站(zhan)電(dian)子版(ban)說(shuo)明(ming)書(shu)僅(jin)作參(can)考。

4.只有(you)全(quan)部使用(yong)本試劑(ji)盒配(pei)套試劑(ji)才能保證檢測效(xiao)果，不(bu)能混用(yong)其他制造商(shang)的(de)產(chan)品。只有(you)嚴格(ge)遵(zun)守(shou)本試(shi)劑(ji)盒的(de)實驗說明(ming)才(cai)會得(de)到(dao)檢測結果(guo)。

5.本(ben)公司只對試劑(ji)盒本(ben)身負(fu)責，不(bu)對因使用(yong)該(gai)試(shi)劑(ji)盒所(suo)造成(cheng)的(de)樣(yang)本(ben)消耗負(fu)責，請(qing)使用(yong)者(zhe)使用(yong)前充分(fen)考(kao)慮(lv)到(dao)樣(yang)本(ben)的(de)可(ke)能使用(yong)量(liang)，預留充足(zu)的(de)樣(yang)本(ben)。

6.使用(yong)化學裂(lie)解液(ye)制備(bei)的(de)組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)或(huo)細(xi)胞提(ti)取液(ye)可(ke)能會由(you)於某些化學物(wu)質(zhi)的(de)引(yin)入導(dao)致(zhi)ELISA實驗結果偏差(cha)。

7.若(ruo)樣(yang)本(ben)為細(xi)胞培(pei)養上(shang)清，因該(gai)類(lei)樣(yang)本(ben)幹擾因(yin)素較(jiao)多(duo)，如:細(xi)胞狀態(tai)、細(xi)胞數(shu)量(liang)、采(cai)樣(yang)時(shi)間等，所(suo)以(yi)可(ke)能存在(zai)檢測不(bu)出的(de)情況。

8.某些天(tian)然(ran)蛋白或重(zhong)組(zu)蛋(dan)白，包括原核及(ji)真核重(zhong)組(zu)蛋(dan)白，可能因為與(yu)本產(chan)品所(suo)使用(yong)的(de)檢測抗ti及(ji)捕獲抗(kang)ti不(bu)匹(pi)配(pei)，而(er)不(bu)被檢測出。

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