植物(wu)甘(gan)薯脈花(hua)葉(ye)病(bing)毒(SPVMV)elisa試劑(ji)盒(he)

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ELISA試劑(ji)盒(he)檢(jian)測概述

ELISA (酶聯(lian)接免(mian)疫吸附(fu)反(fan)應(ying)分(fen)析)是(shi)以(yi)免(mian)疫學(xue)反應(ying)為(wei)基礎(chu),將抗原(yuan)、抗(kang)ti的特異性(xing)反應(ying)與(yu)酶對底物(wu)的高效催化(hua)作用(yong)相結合起(qi)來(lai)的(de)壹-種(zhong)敏感(gan)性(xing)很高(gao)的(de)實驗(yan)技(ji)術(shu)。由(you)於抗(kang)原(yuan)、 抗(kang)ti的反應(ying)在壹種(zhong)固(gu)相載體(ti)-聚苯Z烯微(wei)量(liang)滴定板(ban)的孔(kong)中(zhong)進行，每加(jia)入(ru)壹種(zhong)試劑(ji)孵育後，可(ke)通(tong)過洗滌除去多余的遊(you)離反應(ying)物(wu)，從而(er)保證試驗(yan)結果的(de)特異性(xing)與穩(wen)定(ding)性(xing)。實際(ji)應(ying)用(yong)中(zhong)，通過不同的設計(ji)，具(ju)體(ti)的(de)方(fang)法(fa)步驟(zhou)可(ke)有(you)多種(zhong)。即(ji):用(yong)於檢(jian)測抗ti的間(jian)接法(fa)、用(yong)於檢(jian)測抗原(yuan)的(de)雙(shuang)抗ti夾(jia)心(xin)法(fa)以(yi)及(ji)用(yong)於檢(jian)測小分(fen)子抗原(yuan)或(huo)半抗原(yuan)的(de)抗原(yuan)競爭(zheng)法(fa)等(deng)等(deng)。目(mu)前(qian)我們對客戶提(ti)供(gong)比較(jiao)常用(yong)的ELISA雙(shuang)抗ti夾(jia)心(xin)法(fa)及(ji)ELISA間(jian)接法(fa)服務。

實驗(yan)過程(cheng):

1.試劑(ji)準備:所有(you)試劑(ji)都必須在使(shi)用(yong)前(qian)達(da)到(dao)室溫(wen),使用(yong)後請(qing)立即(ji)按照(zhao)說明書要(yao)求保存試劑(ji)。實驗(yan)操作(zuo)中(zhong)請(qing) 使(shi)用(yong)壹次(ci)性(xing)的吸頭,避免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染(ran)。

2.加(jia)樣:加(jia)樣或(huo)加(jia)試劑(ji)時(shi)，請(qing)註(zhu)意在吸取標本(ben)/標準品，酶結合物(wu)或底物(wu)時(shi)，第yi個(ge)孔(kong)與(yu)最(zui)hou-壹個(ge)孔(kong)加(jia)樣之(zhi)間(jian)的時(shi)間(jian)間(jian)隔(ge)如果太(tai)大，將會導(dao)致(zhi)不同的“預(yu)孵育“時(shi)間(jian),從而(er)明顯地(di)影響(xiang)到(dao)測量(liang)值(zhi)的(de)準確性(xing)及(ji)重復(fu)性(xing)。壹次(ci)加(jia)樣時(shi)間(jian)(包括(kuo)標(biao)準品及(ji)所有(you)樣品) 將控(kong)制(zhi)在10分(fen)鐘內,如標本(ben)數量(liang)多,推(tui)薦使(shi)用(yong)多道移液器加(jia)樣。

3.孵(fu)育:為(wei)防止(zhi)樣品蒸發,試驗(yan)時(shi)將反應(ying)板(ban)放(fang)於鋪有濕(shi)布(bu)的(de)密閉(bi)盒(he)內，酶標(biao)板加(jia)上蓋(gai)或(huo)覆(fu)膜(mo)，以(yi)避(bi)免(mian)液體(ti)蒸發;洗板(ban)後應(ying)盡(jin)快(kuai)進(jin)行下(xia)步(bu)操作(zuo),任(ren)何時(shi)侯都(dou)應(ying)避(bi)免(mian)酶標(biao)板處於幹燥狀(zhuang)態(tai):同(tong)時(shi)應(ying)嚴(yan)格遵(zun)守給(gei)定的(de)孵(fu)育時(shi)間(jian)和溫(wen)度(du)。

4.洗(xi)滌:洗滌過程(cheng)中(zhong)反應(ying)孔(kong)中(zhong)殘(can)留(liu)的(de)洗(xi)滌液應(ying)在濾(lv)紙上充(chong)分(fen)拍(pai)幹，勿將濾紙(zhi)直(zhi)接放(fang)入(ru)反(fan)應(ying)孔(kong)中(zhong)吸水，同(tong)時(shi)要消(xiao)除(chu)板(ban)底殘(can)留(liu)的(de)液體(ti)和(he)手(shou)指(zhi)印，避(bi)免(mian)影響(xiang)最(zui)hou的(de)酶標(biao)儀讀數。

ELISA試劑(ji)盒(he)操作(zuo)註意事(shi)項(xiang)：

1）試劑(ji)應(ying)按(an)標(biao)簽(qian)說明書儲(chu)存，使(shi)用(yong)前(qian)恢復到(dao)室溫(wen)。稀稀過後的標準品應(ying)丟(diu)棄(qi)，不可(ke)保存。

2）實驗(yan)中(zhong)不用(yong)的板(ban)條(tiao)應(ying)立即(ji)放(fang)回包裝(zhuang)袋(dai)中(zhong)，密封保存，以(yi)免(mian)變(bian)質(zhi)。

3）不用(yong)的其它試劑(ji)應(ying)包(bao)裝(zhuang)好(hao)或蓋好(hao)。不同批號(hao)的試劑(ji)不要混用(yong)。保質(zhi)前(qian)使(shi)用(yong)。

4）使用(yong)壹次(ci)性(xing)的吸頭以(yi)免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染(ran)，吸取終(zhong)止(zhi)液和底物(wu)A、B液時(shi)，避免(mian)使(shi)用(yong)帶(dai)金(jin)屬部(bu)分(fen)的加(jia)樣器(qi)。

5）使(shi)用(yong)幹凈(jing)的塑(su)料(liao)容(rong)器(qi)配置(zhi)洗滌液。使用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)混勻試劑(ji)盒(he)裏的各(ge)種(zhong)成(cheng)份及(ji)樣品。

6）洗滌酶標(biao)板時(shi)應(ying)充(chong)分(fen)拍(pai)幹，不要將吸水紙(zhi)直(zhi)接放(fang)入(ru)酶標(biao)反應(ying)孔(kong)中(zhong)吸水。

7）底(di)物(wu)A應(ying)揮發，避免(mian)長(chang)時(shi)間(jian)打開(kai)蓋子(zi)。底(di)物(wu)B對光敏感(gan)，避免(mian)長(chang)時(shi)間(jian)暴露(lu)於(yu)光(guang)下。避免(mian)用(yong)手(shou)接(jie)觸，有(you)毒(du)。實驗(yan)完成(cheng)後應(ying)立即(ji)讀取OD值(zhi)。

8）加(jia)入(ru)試劑(ji)的順序(xu)應(ying)壹致(zhi)，以(yi)保證所(suo)有反應(ying)板(ban)孔(kong)溫(wen)育的(de)時(shi)間(jian)壹樣。

9）按(an)照(zhao)說明書中(zhong)標明的時(shi)間(jian)、加(jia)液的量(liang)及(ji)順序(xu)進行溫(wen)育操作(zuo)。

植物(wu)甘(gan)薯脈花(hua)葉(ye)病(bing)毒(SPVMV)elisa試劑(ji)盒(he)

ELISA試劑(ji)盒(he)樣品收集、處理(li)及(ji)保存方(fang)法(fa)：

1）血清(qing)-----操作(zuo)過程(cheng)中(zhong)避免(mian)任(ren)何細(xi)胞刺(ci)激。使(shi)用(yong)不含熱原(yuan)和(he)內毒(du)素的(de)試管(guan)。收集(ji)血液後，1000×g離心10分(fen)鐘將血清(qing)和(he)紅細(xi)胞迅速小(xiao)心(xin)地分(fen)離。

2）血漿-----EDTA、檸檬(meng)酸(suan)鹽、肝素血(xue)漿可(ke)用(yong)於檢(jian)測。1000×g離心30分(fen)鐘去除(chu)顆(ke)粒。

3）細(xi)胞上清(qing)液---1000×g離心10分(fen)鐘去除(chu)顆(ke)粒和(he)聚合物(wu)。

4）組(zu)織勻(yun)漿-----將組(zu)織加(jia)入(ru)適(shi)量(liang)生理(li)鹽水搗碎(sui)。1000×g離心10分(fen)鐘，取上清(qing)液

5）保存------如果樣品不立即(ji)使用(yong)，應(ying)將其分(fen)成(cheng)小(xiao)部分(fen)-70 ℃保存，避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)冷(leng)凍。盡可(ke)能的(de)不要使用(yong)溶血(xue)。如果血(xue)清中(zhong)大量(liang)顆(ke)粒，檢(jian)測前(qian)先(xian)離心或過濾。不要在37℃或(huo)更高的溫(wen)度(du)加(jia)熱解凍。

試劑(ji)盒(he)的儲存(cun)及(ji)有效(xiao)期(qi)：

未(wei)開(kai)封的(de)試劑(ji)盒(he)：所有試劑(ji)均按試劑(ji)瓶標簽(qian)上(shang)所示保存。請(qing)註(zhu)意，收(shou)到(dao)試劑(ji)盒(he)後請(qing)盡(jin)快將TMB 洗滌液，終(zhong)止(zhi)液保存於(yu)4℃，其他(ta)試劑(ji)保存於(yu)-20℃。

使用(yong)後的試劑(ji)盒(he)：剩余試劑(ji)仍需按(an)照(zhao)試劑(ji)瓶標簽(qian)所(suo)示的(de)溫(wen)度(du)保存，開(kai)封後的酶標(biao)板要加(jia)幹燥(zao)劑(ji)後密封保存於(yu)-20℃，避免(mian)潮(chao)濕(shi)。

穩(wen)定(ding)性(xing)：經測定，試劑(ji)盒(he)在有(you)效期(qi)內按(an)推(tui)薦溫(wen)度(du)保存，其活性(xing)降低率小(xiao)於(yu)5%。為(wei)減小外(wai)部(bu)因(yin)素對試劑(ji)盒(he)破壞前(qian)後檢(jian)測值(zhi)的(de)影響(xiang)，實驗(yan)室的環境(jing)條(tiao)件(jian)需盡量(liang)保持壹致(zhi)，尤(you)其是(shi)實驗(yan)室內溫(wen)度(du)、濕(shi)度(du)及(ji)溫(wen)育條(tiao)件(jian)。其次(ci)由(you)同壹實驗(yan)員(yuan)來(lai)進(jin)行操作(zuo)可(ke)減少(shao)人(ren)為(wei)誤(wu)差。

免(mian)責(ze)聲(sheng)明(ming)

試劑(ji)盒(he)僅供(gong)研(yan)究(jiu)使用(yong)，不得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)實驗(yan)或人(ren)體(ti)實驗(yan)，否則所產生的(de)壹切後果，由(you)實驗(yan)者(zhe)承擔，本(ben)公(gong)司(si)概不負(fu)責。

嚴(yan)格按(an)照(zhao)說明書操作(zuo)，實驗(yan)者(zhe)違反(fan)說明書操作(zuo)，後果由(you)實驗(yan)者(zhe)承擔。

[說 明]

1.由(you)於現(xian)有(you)條(tiao)件(jian)及(ji)科學(xue)技(ji)術(shu)水平(ping)尚(shang)不能對所有供(gong)貨(huo)商提供(gong)的(de)所(suo)有(you)原(yuan)料(liao)進行全面(mian)的鑒(jian)定(ding)與(yu)分(fen)析，本(ben)產品可(ke)能存(cun)在壹定的質(zhi)量(liang) 技(ji)術(shu)風(feng)險。

2.最(zui)終(zhong)的(de)實驗(yan)結果與(yu)試劑(ji)的有效(xiao)性(xing)、實驗(yan)者(zhe)的相關(guan)操作(zuo)以(yi)及(ji) 當時(shi)的實驗(yan)環境(jing)密(mi)切相關(guan)，請(qing)務(wu)必準備充足的標本(ben)備份。

3.不同批次(ci)的(de)同壹產品可(ke)能會(hui)有少(shao)許差(cha)別，如:檢(jian)測限、靈敏度(du)以(yi)及(ji)顯色時(shi)間(jian)等(deng)，請(qing)依(yi)據試劑(ji)盒(he)內說明書進(jin)行實驗(yan)操作(zuo)，網站(zhan)電(dian)子版說明書僅(jin)作參(can)考。

4.只有全部使(shi)用(yong)本(ben)試劑(ji)盒(he)配套試劑(ji)才能保證檢(jian)測效果，不能混用(yong)其他(ta)制(zhi)造(zao)商的產品。只有嚴(yan)格遵(zun)守本(ben)試劑(ji)盒(he)的實驗(yan)說明才(cai)會得(de)到(dao)檢(jian)測結果。

5.本(ben)公(gong)司(si)只對試劑(ji)盒(he)本(ben)身負(fu)責，不對因使用(yong)該試劑(ji)盒(he)所造成(cheng)的(de)樣本(ben)消耗(hao)負(fu)責，請(qing)使(shi)用(yong)者(zhe)使用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)考慮(lv)到(dao)樣本(ben)的可(ke)能使(shi)用(yong)量(liang)，預(yu)留(liu)充(chong)足的樣本(ben)。

6.使用(yong)化(hua)學(xue)裂解液制備的組(zu)織勻(yun)漿或細(xi)胞提取液可(ke)能會(hui)由於(yu)某些(xie)化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)的(de)引(yin)入(ru)導(dao)致(zhi)ELISA實驗(yan)結果偏(pian)差。

7.若樣本(ben)為(wei)細胞培(pei)養上(shang)清，因(yin)該類樣本(ben)幹擾(rao)因(yin)素較(jiao)多，如:細胞狀(zhuang)態(tai)、細(xi)胞數量(liang)、采(cai)樣時(shi)間(jian)等(deng)，所(suo)以(yi)可(ke)能存(cun)在檢(jian)測不出的情況。

8.某(mou)些(xie)天然蛋白(bai)或(huo)重組(zu)蛋白(bai)，包(bao)括原(yuan)核(he)及(ji)真核(he)重(zhong)組(zu)蛋白(bai)，可(ke)能因(yin)為(wei)與本(ben)產品所使用(yong)的檢(jian)測抗ti及(ji)捕獲抗(kang)ti不匹配，而(er)不被(bei)檢(jian)測出。

公(gong)司(si)其他(ta)產品：

煙草脈帶(dai)花葉(ye)病(bing)毒(TVBMV)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

大腸桿菌菌體(ti)蛋白(bai)殘(can)留(liu)(E.coli DH-5α)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

麥(mai)膠(jiao)蛋白(bai)(gliadin)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

煙曲黴(mei)菌IgG抗體(ti)(AF-IgG)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

苜蓿花葉(ye)病(bing)毒(AlMV)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

氨單(dan)加(jia)氧(yang)酶(AM)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

亞(ya)硝(xiao)酸(suan)還原(yuan)酶(NiR)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

硝(xiao)酸(suan)鹽還原(yuan)酶(NR)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

黃(huang)素單(dan)核(he)苷(gan)酸(suan)(FMN)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

誌賀(he)樣毒(du)素(SLT)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

大豆(dou)球(qiu)蛋白(bai)(Glycinin)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

口蹄(ti)疫O型(xing)抗(kang)體(ti)(FMD-O-Ab)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)