脂蛋(dan)白酯酶(mei)(LPL)測(ce)試盒

脂蛋(dan)白酯酶(mei)(LPL)測(ce)試盒

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測定(ding)意義(yi)：
脂蛋(dan)白酯酶(mei)是(shi)脂肪(fang)細胞、心肌細(xi)胞、骨(gu)骼肌細(xi)胞、乳(ru)腺(xian)細(xi)胞及(ji)巨噬細(xi)胞等實(shi)質細胞合(he)成的(de)壹(yi)種酶，可(ke)催(cui)化(hua)甘(gan)油(you)三脂水(shui)解為(wei)脂肪(fang)酸和(he)單酸甘(gan)油(you)酯，以供組(zu)織(zhi)氧(yang)化(hua)供(gong)能和貯(zhu)存，並在不同的(de)組(zu)織(zhi)表(biao)現出(chu)不(bu)同(tong)的(de)生理(li)意義(yi)。

操作流程(cheng)：

1.從室溫(wen)平(ping)衡20min後(hou)的(de)鋁箔(bo)袋中取(qu)出(chu)所(suo)需板(ban)條，剩(sheng)余板條(tiao)用(yong)自封袋密封(feng)放回(hui)4℃。

2. 設置(zhi)標準(zhun)品孔(kong)和(he)樣(yang)本(ben)孔(kong)，標準(zhun)品孔(kong)各(ge)加(jia)不(bu)同(tong)濃(nong)度(du)的(de)標準(zhun)品50μL；

3. 樣(yang)本(ben)孔(kong)中加(jia)入(ru)待測(ce)樣(yang)本(ben)50μL；空(kong)白孔(kong)不加(jia)。

4. 除空白孔(kong)外，標準(zhun)品孔(kong)和(he)樣(yang)本(ben)孔(kong)中每孔加(jia)入(ru)辣根過(guo)氧(yang)化(hua)物酶(mei)（HRP）標記的(de)檢(jian)測抗體100μL，用(yong)封板(ban)膜(mo)封(feng)住反(fan)應孔(kong)，37℃水浴(yu)鍋或恒溫(wen)箱溫育(yu)60min。

5. 棄去液(ye)體(ti)，吸水(shui)紙上拍幹，每(mei)孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)（350μL），靜(jing)置(zhi)1min，甩(shuai)去洗(xi)滌(di)液(ye)，吸(xi)水(shui)紙上拍幹，如(ru)此(ci)重(zhong)復(fu)洗(xi)板5次（也可(ke)用(yong)洗(xi)板機(ji)洗(xi)板）。

6. 每孔加(jia)入(ru)底(di)物A、B各(ge)50μL，37℃避光(guang)孵育(yu)15min。

7. 每孔加(jia)入(ru)終(zhong)止液50μL，15min內(nei)，在(zai)450nm波長處測(ce)定(ding)各(ge)孔的(de)OD值(zhi)。

優點(dian)如(ru)下(xia):

1、快速簡便:操作時(shi)間短(duan),48-50T,可(ke)測40例樣(yang)本(ben)左(zuo)右,96-100T,可(ke)測80例樣(yang)本(ben)左(zuo)右;

2、取(qu)樣(yang)量微:常(chang)規(gui)操作取(qu)樣(yang)量50l, 酶標儀操作僅(jin)需5l即(ji)可(ke)檢(jian)測,部分(fen)試劑(ji)盒取(qu)樣(yang)多少請;

3、穩定(ding)性好:試劑(ji)盒2~8℃存放3個(ge)月有效(xiao);

4、再現性好:20倍稀釋線性仍然(ran)良(liang)好;

5、回(hui)收試驗: X =99%;

6、受外界影響(xiang)因素小(xiao):幹擾(rao)因素少,重復(fu)性強;

7、測試面(mian)廣(guang):可測動物血(xue)清(qing)(漿(jiang))、組(zu)織(zhi)、各(ge)種體(ti)液、灌流液(ye)、各(ge)種培(pei)養細胞以及(ji)細胞培養(yang)上(shang)清(qing)液(ye)等,部分(fen)試劑(ji)盒適用(yong)於檢(jian)測植物,歡(huan)迎(ying)

儀器(qi):

1、分(fen)光光(guang)度計(ji)/酶(mei)標儀/生化(hua)分(fen)析儀(比色測(ce)定(ding)波長(chang)為(wei)550nm)

2、恒溫(wen)水(shui)浴箱或氣(qi)浴(yu)箱 (孵育(yu)溫(wen)度為(wei)37℃)

3、臺式離心機(ji)

4、漩渦(wo)混(hun)勻(yun)器(qi)

5、微量移液器(qi)

使(shi)用(yong)須知(zhi):

(1)請參照(zhao)相關法(fa)規(gui)、文(wen)獻、MSDs等信息,理(li)解並(bing)掌(zhang)握(wo)好試劑(ji)的(de)特(te)性,再進行安全(quan)操作。

(2)通常(chang)購(gou)買試(shi)劑(ji)時(shi)壹(yi)定(ding)要想(xiang)到(dao)--次性用(yong)完(wan)。若(ruo)估(gu)算不足(zu)有剩(sheng)余的(de)話(hua)，更加(jia)註(zhu)意其他保(bao)管和(he)管理(li)。

(3)萬(wan)壹(yi)-試劑(ji)操作者(zhe)並(bing)非專(zhuan)業(ye)技(ji)術人(ren)員(yuan)。必(bi)須在(zai)專(zhuan)業(ye)人(ren)士的(de)指(zhi)導監督(du)下(xia)進行操作。對(dui)於使(shi)用(yong)後的(de)廢棄物,不要或者(zhe)舊(jiu)的(de)試(shi)劑(ji)，應(ying)按(an)照(zhao)相關法(fa)律法(fa)規(gui)正(zheng)當處理(li)。

(4)購買後(hou)，請(qing)務必(bi)確(que)認(ren)標簽上的(de)註(zhu)意事項;做(zuo)好預防顛(dian)倒(dao),摔壞的(de)措施(shi)和管理(li)體制(zhi);在使(shi)用(yong)前(qian)再次確認(ren)標簽上的(de)註(zhu)意事項，做(zuo)好必(bi)要(yao)的(de)安(an)全(quan)對(dui)策;對沒有(you)標明(ming)其危害(hai)特(te)性、有害(hai)特(te)性的(de)，也要(yao)慎(shen)重(zhong)地(di)進行操作;必(bi)須帶(dai)好防護用(yong)具，小(xiao)心翼(yi)翼(yi)進行操作。

生化(hua)試(shi)劑(ji)的(de)種(zhong)類與(yu)等級(ji)說(shuo)明(ming):

(1)免疫試(shi)劑(ji)包(bao)括抗體及(ji)抗血清(qing)、正(zheng)常(chang)血(xue)清(qing)及(ji)補體(ti)、抗原、免疫組(zu)織(zhi)化(hua)學(xue)研(yan)究(jiu)用(yong)試劑(ji)、細(xi)胞培養(yang)用(yong)試劑(ji)、細(xi)胞分(fen)離試(shi)劑(ji)、凝膠(jiao)內(nei)擴散法(fa)及(ji)電泳(yong)試劑(ji)等。

(2)基(ji)因工程(cheng)用(yong)試劑(ji)包(bao)括基(ji)因表達(da)與(yu)基(ji)因重組(zu)、人(ren)工合(he)成蛋白、激素、核酸合(he)成試劑(ji)、內(nei)切(qie)酶等。

(3)誘變劑(ji)和(he)主(zhu)要(yao)供測(ce)定(ding)工作場(chang)所(suo)與(yu)生活(huo)環境中的(de)毒(du)物質的(de)致(zhi)癌性與(yu)化(hua)學(xue)毒物的(de)致(zhi)突變性。

(4)工業(ye)用(yong)化(hua)學(xue)品包(bao)括試(shi)制(zhi)開發的(de)工業(ye)用(yong)化(hua)學(xue)品,有四(si)千(qian)種以上,還(hai)在(zai)不(bu)斷(duan)增(zeng)加(jia)。

樣(yang)本(ben)收集(ji)與(yu)前(qian)處理(li):

血清(qing)(漿)可直(zhi)接(jie)測定(ding)。

紅(hong)細胞:需按(an)照(zhao)試劑(ji)盒中說(shuo)明(ming)書上(shang)紅(hong)細胞的(de)測(ce)定(ding)方法(fa)進行提(ti)取(qu)後(hou)測定(ding)。

動物組(zu)織(zhi)樣(yang)本(ben):可用(yong)生理(li)鹽(yan)水(shui)按(an)重(zhong)量體積比制(zhi)備成組(zu)織(zhi)勻(yun)漿液,離(li)心取(qu)上(shang)清(qing)測(ce)定(ding)。

培養細(xi)胞、細菌(jun)、植(zhi)物組(zu)織(zhi):常(chang)用(yong)PBS作為(wei)勻漿(jiang)介(jie)質破(po)碎(sui)後(hou)離(li)心取(qu)上(shang)清(qing)測(ce)定(ding)。

具體的(de)樣(yang)本(ben)前(qian)處理(li):參考(kao)我們隨(sui)貨發送的(de)《實(shi)驗方法(fa)學(xue)》以及(ji)試劑(ji)盒中詳(xiang)細說(shuo)明(ming)書。

實驗結果(guo)判斷我有妙招:

1、定(ding)量測定(ding)結果(guo)根據標準(zhun)曲(qu)線計(ji)算樣(yang)品中待測物的(de)含(han)量。

2、以樣(yang)品孔(kong)的(de)OD值(zhi)大(da)於陰(yin)性對照(zhao)OD值(zhi)+2~3SD,作為(wei)陽(yang)性結果(guo)的(de)閾(yu)值(zhi)。

3、以P/N值(zhi)(陽(yang)性孔OD值(zhi)/陰(yin)性孔OD值(zhi))大(da)於或等於2.1為(wei)陽(yang)性,P/N值(zhi)小(xiao)於2.1,但(dan)大(da)於1.5為(wei)可疑(yi),P/N小(xiao)於1.5為(wei)陰(yin)性。

4、ELISA試劑(ji)盒目(mu)測(ce)定(ding)性法(fa):加(jia)入(ru)底(di)物經(jing)酶解(jie)和終(zhong)止反(fan)應後(hou),肉眼(yan)觀察(cha)陽(yang)性孔顏(yan)色明(ming)顯(xian)深(shen)於(競爭(zheng)法(fa)則(ze)淺(qian)於)陰(yin)性對照(zhao),與(yu)陰(yin)性對照(zhao)的(de)顏(yan)色接(jie)近者(zhe),判(pan)定(ding)為(wei)陰(yin)性。

為(wei)了達(da)到(dao)準(zhun)確(que)的(de)實(shi)驗結果(guo),取(qu)用(yong)試劑(ji)時(shi)應(ying)遵(zun)守以下(xia)規則(ze),以保證(zheng)試(shi)劑(ji)不(bu)受(shou)汙染和不變(bian)質:

(1)試劑(ji)不(bu)能與(yu)手(shou)接(jie)觸。

(2)要用(yong)潔凈的(de)藥(yao)勺(shao),量筒或滴(di)管取(qu)用(yong)試劑(ji),*不準(zhun)用(yong)同壹(yi)種工具同時(shi)連(lian)續(xu)取(qu)用(yong)多種試(shi)劑(ji)。取(qu)完(wan)壹(yi)種試劑(ji)後(hou),應將工具洗(xi)凈(藥(yao)勺(shao)要擦幹)後(hou),方可(ke)取(qu)用(yong)另壹(yi)種試(shi)劑(ji)。

(3)試劑(ji)取(qu)用(yong)後壹(yi)定(ding)要將(jiang)瓶塞(sai)蓋(gai)緊(jin),不可(ke)放錯瓶(ping)蓋和滴管,絕不允(yun)許(xu)張(zhang)冠李(li)戴(dai),用(yong)完(wan)後(hou)將瓶放回(hui)原(yuan)處。

(4)已(yi)取(qu)出(chu)的(de)試(shi)劑(ji)不(bu)能再放回(hui)原(yuan)試劑(ji)瓶(ping)內(nei)。

另外取(qu)用(yong)試劑(ji)時(shi)應(ying)本(ben)著(zhe)節約(yue)精神(shen),盡(jin)可(ke)能少用(yong),這樣(yang)既便於操作和(he)仔細(xi)觀察(cha)現(xian)象,又(you)能得到(dao)較好的(de)實(shi)驗結果(guo)。

脂蛋(dan)白酯酶(mei)(LPL)測(ce)試盒