濾紙(zhi)酶(mei)測試(shi)盒(微量(liang)法(fa)/48S)

濾紙(zhi)酶(mei)測試(shi)盒(微量(liang)法(fa)/48S)

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測定意(yi)義：
纖(xian)維素酶(mei)是(shi)由微(wei)生物(wu)產生的多(duo)組(zu)分的酶(mei)系(xi)，能(neng)水(shui)解(jie)纖(xian)維素β-1,4葡(pu)萄(tao)糖(tang)苷(gan)鍵生成(cheng)葡(pu)萄(tao)糖(tang)，研(yan)究(jiu)濾紙(zhi)酶(mei)活力(li)對纖(xian)維素酶(mei)的研(yan)究(jiu)具有非常(chang)重(zhong)要(yao)的意(yi)義。

操作(zuo)流程：

1.從室溫(wen)平(ping)衡(heng)20min後的鋁(lv)箔(bo)袋中取(qu)出所需板條，剩余板條用自封(feng)袋密(mi)封(feng)放回4℃。

2. 設(she)置(zhi)標(biao)準品孔和樣(yang)本(ben)孔，標(biao)準品孔各(ge)加(jia)不(bu)同濃(nong)度(du)的標(biao)準品50μL；

3. 樣(yang)本(ben)孔中(zhong)加(jia)入(ru)待測樣(yang)本(ben)50μL；空(kong)白(bai)孔不(bu)加(jia)。

4. 除(chu)空(kong)白(bai)孔外，標(biao)準品孔和樣(yang)本(ben)孔中(zhong)每孔加(jia)入(ru)辣根過氧(yang)化物(wu)酶(mei)（HRP）標記(ji)的檢(jian)測抗體(ti)100μL，用(yong)封(feng)板膜(mo)封(feng)住反應孔(kong)，37℃水(shui)浴(yu)鍋或恒(heng)溫箱溫育60min。

5. 棄去(qu)液(ye)體(ti)，吸(xi)水(shui)紙(zhi)上拍幹(gan)，每(mei)孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)（350μL），靜置1min，甩去洗(xi)滌(di)液(ye)，吸(xi)水(shui)紙(zhi)上拍幹(gan)，如(ru)此(ci)重(zhong)復(fu)洗(xi)板5次(ci)（也(ye)可用(yong)洗(xi)板機洗(xi)板）。

6. 每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)底(di)物(wu)A、B各(ge)50μL，37℃避(bi)光(guang)孵育(yu)15min。

7. 每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)終(zhong)止液(ye)50μL，15min內，在(zai)450nm波長(chang)處(chu)測定各孔的OD值(zhi)。

優(you)點如(ru)下(xia):

1、快速(su)簡(jian)便:操作(zuo)時間(jian)短(duan),48-50T,可測40例(li)樣(yang)本(ben)左右(you),96-100T,可測80例(li)樣(yang)本(ben)左右(you);

2、取(qu)樣(yang)量微(wei):常(chang)規(gui)操作(zuo)取(qu)樣(yang)量50l, 酶(mei)標儀(yi)操作(zuo)僅需5l即(ji)可檢(jian)測,部(bu)分(fen)試(shi)劑盒取(qu)樣(yang)多少(shao)請(qing);

3、穩定性好:試(shi)劑盒2~8℃存(cun)放(fang)3個月(yue)有(you)效;

4、再(zai)現(xian)性好:20倍(bei)稀釋(shi)線(xian)性仍(reng)然良(liang)好(hao);

5、回收試(shi)驗: X =99%;

6、受(shou)外(wai)界影(ying)響(xiang)因素小(xiao):幹(gan)擾因素少,重(zhong)復(fu)性強;

7、測試(shi)面(mian)廣(guang):可測動(dong)物(wu)血(xue)清(qing)(漿)、組(zu)織、各種體(ti)液(ye)、灌流液(ye)、各(ge)種(zhong)培養細胞(bao)以及(ji)細胞培養上清(qing)液(ye)等,部分試(shi)劑盒適用(yong)於(yu)檢測植(zhi)物(wu),歡(huan)迎(ying)

儀(yi)器(qi):

1、分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)/酶(mei)標儀(yi)/生化分析儀(yi)(比色測定波長(chang)為550nm)

2、恒(heng)溫水(shui)浴(yu)箱或氣浴箱 (孵育溫(wen)度(du)為37℃)

3、臺(tai)式(shi)離(li)心(xin)機

4、漩(xuan)渦混(hun)勻(yun)器(qi)

5、微(wei)量(liang)移(yi)液(ye)器(qi)

使(shi)用須知(zhi):

(1)請(qing)參(can)照相關法(fa)規(gui)、文獻、MSDs等信(xin)息,理(li)解(jie)並(bing)掌握好(hao)試(shi)劑的特(te)性,再(zai)進(jin)行(xing)安(an)全(quan)操作(zuo)。

(2)通(tong)常(chang)購(gou)買試(shi)劑時壹(yi)定要想到--次(ci)性用完(wan)。若(ruo)估(gu)算(suan)不(bu)足(zu)有剩余的話(hua)，更(geng)加(jia)註(zhu)意(yi)其(qi)他(ta)保(bao)管和管理(li)。

(3)萬壹-試(shi)劑操作(zuo)者並非專業(ye)技(ji)術人員。必須在(zai)專業人士的指(zhi)導監(jian)督(du)下進(jin)行(xing)操作(zuo)。對於(yu)使(shi)用後(hou)的廢(fei)棄物(wu),不(bu)要(yao)或(huo)者(zhe)舊(jiu)的試(shi)劑，應按照相關法(fa)律(lv)法(fa)規(gui)正當(dang)處(chu)理(li)。

(4)購(gou)買後，請務(wu)必確(que)認(ren)標(biao)簽(qian)上(shang)的註(zhu)意(yi)事項(xiang);做(zuo)好預防(fang)顛(dian)倒(dao),摔(shuai)壞(huai)的措(cuo)施(shi)和管理(li)體(ti)制(zhi);在(zai)使(shi)用前(qian)再次(ci)確(que)認(ren)標(biao)簽(qian)上(shang)的註(zhu)意(yi)事項(xiang)，做(zuo)好必要的安(an)全對策(ce);對(dui)沒(mei)有(you)標(biao)明(ming)其(qi)危(wei)害特性、有害(hai)特(te)性的，也(ye)要慎(shen)重(zhong)地(di)進(jin)行(xing)操作(zuo);必須帶好(hao)防(fang)護用具，小(xiao)心(xin)翼翼進(jin)行(xing)操作(zuo)。

生化試(shi)劑的種(zhong)類與(yu)等級(ji)說(shuo)明(ming):

(1)免(mian)疫(yi)試(shi)劑包括抗體(ti)及(ji)抗血(xue)清(qing)、正常(chang)血(xue)清(qing)及(ji)補體(ti)、抗原(yuan)、免疫(yi)組(zu)織化學研(yan)究(jiu)用(yong)試(shi)劑、細胞培養用試(shi)劑、細胞分離試(shi)劑、凝膠內擴散(san)法(fa)及(ji)電泳(yong)試(shi)劑等。

(2)基(ji)因工程用試(shi)劑包括基因表達與基(ji)因重(zhong)組(zu)、人工合(he)成(cheng)蛋白(bai)、激素、核酸合(he)成(cheng)試(shi)劑、內切酶(mei)等。

(3)誘(you)變(bian)劑和主(zhu)要供(gong)測定工作場(chang)所與(yu)生活(huo)環(huan)境(jing)中的毒物(wu)質(zhi)的致(zhi)癌(ai)性與化學毒物(wu)的致(zhi)突變(bian)性。

(4)工業用化學品包括試(shi)制(zhi)開發的工業用化學品,有(you)四(si)千(qian)種(zhong)以上,還(hai)在(zai)不(bu)斷增加(jia)。

樣(yang)本(ben)收集(ji)與前(qian)處(chu)理(li):

血(xue)清(qing)(漿)可直接(jie)測定。

紅(hong)細(xi)胞(bao):需按照試(shi)劑盒中說(shuo)明(ming)書(shu)上(shang)紅(hong)細(xi)胞(bao)的測定方法進(jin)行(xing)提(ti)取(qu)後測定。

動(dong)物(wu)組(zu)織樣(yang)本(ben):可用(yong)生理(li)鹽(yan)水(shui)按(an)重(zhong)量(liang)體(ti)積(ji)比制備(bei)成(cheng)組(zu)織勻漿液(ye),離(li)心(xin)取(qu)上清(qing)測定。

培養細胞(bao)、細菌、植物(wu)組(zu)織:常(chang)用(yong)PBS作(zuo)為勻(yun)漿介質(zhi)破(po)碎後(hou)離(li)心(xin)取(qu)上清(qing)測定。

具體(ti)的樣(yang)本(ben)前(qian)處(chu)理(li):參(can)考(kao)我(wo)們(men)隨(sui)貨(huo)發(fa)送的《實驗方(fang)法(fa)學》以及(ji)試(shi)劑盒中詳細說(shuo)明(ming)書(shu)。

實驗結(jie)果(guo)判斷我有(you)妙招(zhao):

1、定量測定結(jie)果(guo)根據(ju)標準曲(qu)線(xian)計算(suan)樣(yang)品中待測物(wu)的含(han)量。

2、以樣(yang)品孔的OD值(zhi)大於(yu)陰(yin)性對照OD值+2~3SD,作(zuo)為陽(yang)性結(jie)果(guo)的閾(yu)值。

3、以P/N值(陽(yang)性孔OD值(zhi)/陰(yin)性孔OD值(zhi))大(da)於(yu)或等於(yu)2.1為陽(yang)性,P/N值小(xiao)於(yu)2.1,但(dan)大於(yu)1.5為可疑,P/N小(xiao)於(yu)1.5為陰(yin)性。

4、ELISA試(shi)劑盒目測定性法:加(jia)入(ru)底(di)物(wu)經酶(mei)解(jie)和終(zhong)止反應後(hou),肉(rou)眼觀(guan)察(cha)陽性孔顏(yan)色(se)明(ming)顯(xian)深於(yu)(競爭(zheng)法則淺於(yu))陰(yin)性對照,與陰(yin)性對照的顏(yan)色接近者,判定為陰(yin)性。

為了(le)達到準確(que)的實驗結(jie)果(guo),取(qu)用試(shi)劑時應(ying)遵(zun)守以下規(gui)則,以保(bao)證(zheng)試(shi)劑不(bu)受(shou)汙(wu)染(ran)和不(bu)變(bian)質(zhi):

(1)試(shi)劑不(bu)能(neng)與(yu)手(shou)接(jie)觸。

(2)要(yao)用(yong)潔(jie)凈的藥勺,量筒或滴(di)管取(qu)用試(shi)劑,*不(bu)準用(yong)同壹(yi)種(zhong)工具同時連(lian)續取(qu)用多(duo)種試(shi)劑。取(qu)完(wan)壹種(zhong)試(shi)劑後,應(ying)將工具洗(xi)凈(藥勺要擦(ca)幹(gan))後(hou),方(fang)可取(qu)用另壹種(zhong)試(shi)劑。

(3)試(shi)劑取(qu)用後(hou)壹定要將瓶塞蓋(gai)緊,不(bu)可放(fang)錯(cuo)瓶(ping)蓋(gai)和滴(di)管,絕(jue)不(bu)允(yun)許(xu)張(zhang)冠李戴,用完(wan)後將瓶放回原處(chu)。

(4)已(yi)取(qu)出的試(shi)劑不(bu)能(neng)再(zai)放(fang)回原試(shi)劑瓶內。

另外取(qu)用試(shi)劑時應(ying)本(ben)著節(jie)約精(jing)神,盡可能(neng)少(shao)用(yong),這(zhe)樣(yang)既便於(yu)操作(zuo)和仔(zai)細(xi)觀(guan)察(cha)現(xian)象,又(you)能(neng)得(de)到較(jiao)好的實驗結(jie)果(guo)。

濾紙(zhi)酶(mei)測試(shi)盒(微量(liang)法(fa)/48S)