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          微生物肼(jing)脫氫(qing)酶(mei)(HDH)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

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          ELISA法是免(mian)疫診(zhen)斷中(zhong)的(de)壹(yi)項(xiang)新(xin)技術(shu),現(xian)已成(cheng)功(gong)地(di)應用(yong)於(yu)多(duo)種病原(yuan)微生物所(suo)引(yin)起的(de)傳(chuan)染病、寄(ji)生蟲(chong)病及(ji)非傳(chuan)染病等方面(mian)的(de)免(mian)疫診(zhen)斷。也(ye)已應用(yong)於(yu)大分子抗(kang)原和(he)小(xiao)分子抗(kang)原的(de)定量測(ce)定,根據(ju)已(yi)經(jing)使(shi)用(yong)的結(jie)果(guo),認(ren)為(wei)ELISA法具(ju)有(you)靈敏(min)、特異(yi)、簡(jian)單、快速(su)、穩定及易(yi)於(yu)自(zi)動化操作(zuo)等特點(dian)。不(bu)僅(jin)適用(yong)於(yu)臨床(chuang)標(biao)本(ben)的(de)檢查(zha),而(er)且(qie)由(you)於(yu)壹(yi)天(tian)之(zhi)內(nei)可以檢查(zha)幾百(bai)甚(shen)至上千份(fen)標(biao)本(ben),因此,也適合(he)於(yu)血清(qing)流(liu)行(xing)病學(xue)調(tiao)查(zha)。本法不(bu)僅(jin)可以用(yong)來測(ce)定抗(kang)ti,而且(qie)也可(ke)用(yong)於(yu)測(ce)定體液中(zhong)的(de)循環(huan)抗(kang)原,所(suo)以也(ye)是(shi)壹(yi)種(zhong)早(zao)期診斷的良(liang)好方(fang)法。因此ELISA法在(zai)生物醫學(xue)各領域(yu)的(de)應用(yong)範圍日益(yi)擴(kuo)大,

          組(zu)成(cheng)結(jie)構

          1、血(xue)清(qing):操(cao)作(zuo)過程中(zhong)避(bi)免任(ren)何細胞刺激(ji)。使用(yong)不(bu)含熱(re)原(yuan)和(he)內(nei)du素的試管(guan)。收(shou)集血液後,1000×g離(li)心10分鐘將(jiang)血(xue)紅細胞迅速(su)小心地(di)分離。

          2、2、血漿(jiang):EDTA、檸(ning)檬suan鹽、肝(gan)素血漿(jiang)可用(yong)於(yu)檢測(ce)。1000×g離(li)心30分鐘去(qu)除顆(ke)粒。

          3、細(xi)胞上清(qing)液:1000×g離心(xin)10分鐘去(qu)除顆(ke)粒和(he)聚(ju)合(he)物。

          4、組(zu)織(zhi)勻漿:將(jiang)組(zu)織(zhi)加(jia)入(ru)適(shi)量(liang)生理鹽水(shui)搗(dao)碎。1000×g離心10分鐘,取上清(qing)液。

          5、保存(cun):如(ru)果(guo)樣(yang)品(pin)不(bu)立(li)即(ji)使(shi)用(yong),應將(jiang)其分成小部分-70℃保存(cun),避(bi)免反復(fu)冷凍(dong)。盡(jin)可能(neng)的(de)不(bu)要使(shi)用(yong)溶(rong)血(xue)。如(ru)果(guo)血清(qing)中(zhong)大量(liang)顆(ke)粒,檢測(ce)前(qian)先(xian)離心或過濾(lv)。不(bu)要在(zai)37℃或更(geng)高(gao)的溫(wen)度(du)加(jia)熱解(jie)凍(dong)。應在(zai)室溫(wen)下解(jie)凍(dong)並(bing)確保樣(yang)品(pin)均勻地(di)充分解(jie)凍(dong)。

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          微生物肼(jing)脫氫(qing)酶(mei)(HDH)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          操(cao)作(zuo)步(bu)驟:

          1、使(shi)用(yong)前(qian),將(jiang)所(suo)有(you)試劑充分混勻。不(bu)要使(shi)液體產(chan)生大量(liang)的(de)泡(pao)沫,以免(mian)加(jia)樣(yang)時(shi)加(jia)入(ru)大量(liang)的(de)氣泡(pao),產(chan)生加(jia)樣(yang)上的(de)誤(wu)差(cha)。

          2、根(gen)據(ju)待(dai)測樣(yang)品(pin)數量加(jia)上標(biao)準(zhun)品(pin)的數量決定所(suo)需的板(ban)條數(shu)。每個(ge)標(biao)準(zhun)品(pin)和(he)空(kong)白孔建議做復(fu)孔。每個(ge)樣(yang)品(pin)根據自己(ji)的(de)數量(liang)來定,能使(shi)用(yong)復孔(kong)的(de)盡(jin)量做(zuo)復(fu)孔。

          3、加(jia)入(ru)稀(xi)釋(shi)好後的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)50ul於(yu)反(fan)應孔、加(jia)入(ru)待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)50ul於(yu)反(fan)應孔內。立(li)即(ji)加(jia)入(ru)50ul標(biao)記(ji)的抗(kang)體。蓋(gai)上膜(mo)板(ban),輕輕振蕩混勻,37℃溫(wen)育45分鐘。

          4、甩去(qu)孔內(nei)液體,每孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌液,振蕩30秒,甩去(qu)洗(xi)滌液,用(yong)吸(xi)水紙拍(pai)幹(gan)。重(zhong)復(fu)此操作4次(ci)。如(ru)果(guo)用(yong)洗(xi)板(ban)機(ji)洗(xi)滌,洗(xi)滌次(ci)數增(zeng)加(jia)壹(yi)次(ci)。

          5、每孔(kong)加(jia)入(ru)100ul的(de)親和(he)鏈(lian)酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫(wen)育30分鐘。

          6、甩去(qu)孔內(nei)液體,每孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌液,振蕩30秒,甩去(qu)洗(xi)滌液,用(yong)吸(xi)水紙拍(pai)幹(gan)。重(zhong)復(fu)此操作4次(ci)。如(ru)果(guo)用(yong)洗(xi)板(ban)機(ji)洗(xi)滌,洗(xi)滌次(ci)數增(zeng)加(jia)壹(yi)次(ci)。

          7、每孔(kong)加(jia)入(ru)底(di)物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫(wen)育5分鐘。避(bi)免光(guang)照。

          8、取出(chu)酶標(biao)板(ban),迅速(su)加(jia)入(ru)50ul終(zhong)止液,加(jia)入(ru)終(zhong)止液後應立(li)即(ji)測(ce)定結果(guo)。

          9、在(zai)450nm波長(chang)處測(ce)定各孔(kong)的(de)OD值(zhi)。

          操(cao)作(zuo)註(zhu)意(yi)事項(xiang):

          1、試劑應按標(biao)簽(qian)說(shuo)明書儲存(cun),使(shi)用(yong)前(qian)恢(hui)復到室(shi)溫(wen)。稀(xi)稀(xi)過後的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)應丟棄,不(bu)可(ke)保存(cun)

          2、實(shi)驗(yan)中(zhong)不(bu)用(yong)的板(ban)條應立(li)即(ji)放回(hui)包裝袋中(zhong),密封(feng)保存(cun),以免(mian)變(bian)質。

          3、不(bu)用(yong)的其它(ta)試劑應包裝好或蓋(gai)好。不(bu)同批(pi)號(hao)的試劑不(bu)要混(hun)用(yong)。保質前(qian)使(shi)用(yong)。

          4、使(shi)用(yong)壹(yi)次(ci)性的(de)吸(xi)頭以免(mian)交(jiao)叉汙(wu)染(ran),吸(xi)取終(zhong)止液和(he)底(di)物A、B液時(shi),避(bi)免使用(yong)帶金(jin)屬(shu)部分的加(jia)樣(yang)器。

          5、使(shi)用(yong)幹(gan)凈(jing)的(de)塑(su)料(liao)容(rong)器配置洗(xi)滌液。使用(yong)前(qian)充(chong)分混勻試劑盒(he)裏(li)的各種(zhong)成(cheng)份(fen)及(ji)樣(yang)品(pin)。

          6、底(di)物A應揮發,避(bi)免長(chang)時(shi)間打開蓋(gai)子。底(di)物B對(dui)光(guang)敏(min)感,避(bi)免長(chang)時(shi)間暴(bao)露於(yu)光(guang)下。避(bi)免用(yong)手接(jie)觸(chu),有(you)毒。實(shi)驗(yan)完成後應立(li)即(ji)讀(du)取OD值(zhi)。

          7、加(jia)入(ru)試劑的順(shun)序(xu)應壹(yi)致(zhi),以保證(zheng)所(suo)有(you)反(fan)應板(ban)孔溫(wen)育的(de)時(shi)間壹(yi)樣(yang)。按(an)照說(shuo)明書中(zhong)標(biao)明的(de)時(shi)間、加(jia)液的量(liang)及順(shun)序(xu)進(jin)行(xing)溫(wen)育操(cao)作(zuo)。

          壹(yi)般(ban)來講(jiang),96T能(neng)檢測(ce)90個(ge)樣(yang)本(ben),48T能檢測(ce)42個(ge)樣(yang)本(ben),這(zhe)裏(li)面(mian)需要用(yong)標(biao)樣(yang)來做(zuo)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian),所(suo)以各位(wei)需要做(zuo)實(shi)驗(yan)的(de)老師們,請(qing)在(zai)購買ELISA試劑盒(he)的(de)時(shi)候(hou)註(zhu)意(yi),需要做(zuo)多(duo)少個樣(yang)本(ben),在(zai)決定買多(duo)大規(gui)格(ge)的(de)試劑盒(he),以免(mian)做(zuo)實(shi)驗(yan)時(shi)出現(xian)試劑盒(he)不(bu)夠(gou)用(yong)或者浪(lang)費(fei)!

          原(yuan)理:將(jiang)特異(yi)性抗(kang)體包(bao)被(bei)於(yu)固(gu)相載(zai)體(ti)表面(mian),經(jing)洗(xi)滌後分成兩組(zu):壹(yi)組(zu)加(jia)酶標(biao)記(ji)抗(kang)原和(he)被(bei)測抗(kang)原的(de)混(hun)合(he)液,另壹(yi)組(zu)只(zhi)加(jia)酶標(biao)記(ji)抗(kang)原,經(jing)孵(fu)育洗(xi)滌後加(jia)底物顯(xian)色(se),這(zhe)兩組(zu)底(di)物降解(jie)量之差(cha),即(ji)為(wei)所(suo)要測(ce)定的未(wei)知(zhi)抗(kang)原的(de)量(liang)。

          蘋(ping)果(guo)花葉病毒(APMV)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          蘋(ping)果(guo)褪綠(lv)葉斑病(bing)毒(ACLSV)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          蘋(ping)果(guo)莖(jing)溝病毒(ASGV)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          蘋(ping)果(guo)銹(xiu)果(guo)類病毒(ASSVd)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          蘋(ping)果(guo)莖(jing)痘(dou)病(bing)毒(ASPV)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          禽牛結核(Mycobacterium bovis)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          蛇(she)蛇(she)毒因子(zi)(CVF)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          樹(shu)鼩Ⅰ型膠原交(jiao)聯(lian)羧基端(duan)肽(tai)(CTXI)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          樹(shu)鼩盤(pan)狀結(jie)構域(yu)受體(ti)家族成員(yuan)2(DDR2)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          樹(shu)鼩乙(yi)型肝(gan)炎(yan)E抗(kang)原(HBeAg)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          水(shui)貂幹(gan)擾(rao)素R(IFN-r)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          水(shui)牛乳糖酶(mei)(Lactase)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          水(shui)牛酪蛋白(bai)αs1(CSN1S1)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          梭(suo)子蟹卵黃蛋白(bai)(Vn)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          土(tu)壤脫氫(qing)酶(mei)(DHO)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          土(tu)壤脲酶(mei)(UE)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          土(tu)壤核酮(tong)糖(tang)-1,5-二(er)磷(lin)酸羧化酶(Rubisco)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          土(tu)壤GABA合(he)成(cheng)酶(GABA-S)elisa檢測(ce)試劑盒(he)

          土(tu)壤水解(jie)脫氫(qing)酶(mei)(HDHO)elisa檢測(ce)試劑盒(he)













































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