小鼠Ub(ubiquitin)elisa試劑(ji)盒(he)

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ELISA法是免(mian)疫診斷中(zhong)的(de)壹(yi)項新技(ji)術，現已成(cheng)功(gong)地應用(yong)於(yu)多種(zhong)病原微生(sheng)物所引起(qi)的(de)傳(chuan)染(ran)病、寄生(sheng)蟲病及非傳(chuan)染(ran)病等(deng)方面(mian)的(de)免(mian)疫診斷。也(ye)已應用(yong)於(yu)大(da)分(fen)子(zi)抗(kang)原和(he)小分(fen)子(zi)抗(kang)原的(de)定量(liang)測定，根(gen)據已經(jing)使用(yong)的(de)結(jie)果(guo)，認(ren)為ELISA法具(ju)有(you)靈敏、特異、簡單(dan)、快速、穩(wen)定及易於(yu)自(zi)動(dong)化(hua)操(cao)作(zuo)等(deng)特點。不僅適用於(yu)臨(lin)床(chuang)標本(ben)的(de)檢(jian)查，而且(qie)由於壹(yi)天(tian)之(zhi)內可(ke)以檢(jian)查幾(ji)百甚(shen)至(zhi)上(shang)千份標本(ben),因(yin)此，也適合於(yu)血清(qing)流(liu)行(xing)病學調(tiao)查。本法不僅可(ke)以用來(lai)測定抗(kang)ti，而且(qie)也(ye)可(ke)用於(yu)測定體液(ye)中(zhong)的(de)循環抗(kang)原，所以也是(shi)壹(yi)種(zhong)早(zao)期診斷的(de)良(liang)好方法(fa)。因(yin)此ELISA法在生(sheng)物醫學(xue)各(ge)領(ling)域(yu)的(de)應用(yong)範圍日益(yi)擴大(da)，

組成(cheng)結(jie)構(gou)

1、血清(qing)：操(cao)作(zuo)過程中(zhong)避(bi)免(mian)任(ren)何細胞(bao)刺激。使用(yong)不含(han)熱(re)原和(he)內du素的(de)試管。收集血液(ye)後(hou)，1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血紅(hong)細胞(bao)迅(xun)速小心地分(fen)離(li)。

2、2、血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸檬suan鹽(yan)、肝(gan)素血(xue)漿(jiang)可(ke)用於(yu)檢(jian)測。1000×g離(li)心30分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒。

3、細胞(bao)上(shang)清(qing)液(ye)：1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒和(he)聚合物。

4、組織勻漿(jiang)：將組織加入適(shi)量(liang)生(sheng)理鹽水搗(dao)碎。1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清(qing)液(ye)。

5、保存(cun)：如(ru)果樣(yang)品不立即(ji)使用(yong)，應將(jiang)其分(fen)成(cheng)小部(bu)分(fen)-70℃保(bao)存(cun)，避(bi)免(mian)反復(fu)冷凍(dong)。盡(jin)可(ke)能的(de)不要(yao)使用(yong)溶(rong)血。如(ru)果血清(qing)中(zhong)大(da)量(liang)顆(ke)粒，檢(jian)測前(qian)先(xian)離(li)心或(huo)過(guo)濾(lv)。不要(yao)在(zai)37℃或更高的(de)溫(wen)度加熱(re)解(jie)凍(dong)。應在(zai)室(shi)溫(wen)下解(jie)凍(dong)並(bing)確(que)保(bao)樣(yang)品均勻地充分(fen)解(jie)凍(dong)。

小鼠Ub(ubiquitin)elisa試劑(ji)盒(he)

操(cao)作步驟：

1、使用(yong)前，將(jiang)所有(you)試劑(ji)充分(fen)混(hun)勻。不要(yao)使液(ye)體產生(sheng)大(da)量(liang)的(de)泡沫(mo)，以免(mian)加樣(yang)時(shi)加入大(da)量(liang)的(de)氣泡，產生(sheng)加樣(yang)上(shang)的(de)誤差(cha)。

2、根(gen)據待測樣(yang)品數量(liang)加上(shang)標準(zhun)品的(de)數量(liang)決定所需的(de)板(ban)條數。每個(ge)標準(zhun)品和(he)空白孔(kong)建議做復(fu)孔(kong)。每個(ge)樣(yang)品根(gen)據自(zi)己的(de)數量(liang)來(lai)定，能使用(yong)復(fu)孔(kong)的(de)盡(jin)量(liang)做復(fu)孔(kong)。

3、加入稀(xi)釋(shi)好後(hou)的(de)標準(zhun)品50ul於反應孔(kong)、加入待測樣(yang)品50ul於反應孔(kong)內(nei)。立即(ji)加入50ul標記(ji)的(de)抗(kang)體。蓋上(shang)膜板，輕輕(qing)振(zhen)蕩混(hun)勻，37℃溫(wen)育45分(fen)鐘(zhong)。

4、甩去孔(kong)內(nei)液(ye)體，每孔(kong)加滿洗(xi)滌(di)液(ye)，振(zhen)蕩30秒(miao)，甩去洗(xi)滌(di)液(ye)，用吸(xi)水紙(zhi)拍(pai)幹(gan)。重(zhong)復(fu)此操(cao)作(zuo)4次(ci)。如(ru)果用(yong)洗(xi)板(ban)機(ji)洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌(di)次(ci)數增加壹(yi)次。

5、每孔(kong)加入100ul的(de)親(qin)和(he)鏈(lian)酶素(su)-HRP，輕輕(qing)振(zhen)蕩混(hun)勻，37℃溫(wen)育30分(fen)鐘(zhong)。

6、甩去孔(kong)內(nei)液(ye)體，每孔(kong)加滿洗(xi)滌(di)液(ye)，振(zhen)蕩30秒(miao)，甩去洗(xi)滌(di)液(ye)，用吸(xi)水紙(zhi)拍(pai)幹(gan)。重(zhong)復(fu)此操(cao)作(zuo)4次(ci)。如(ru)果用(yong)洗(xi)板(ban)機(ji)洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌(di)次(ci)數增加壹(yi)次。

7、每孔(kong)加入底(di)物A、B各50ul，輕輕振(zhen)蕩混(hun)勻，37℃溫(wen)育5分(fen)鐘(zhong)。避(bi)免(mian)光(guang)照(zhao)。

8、取(qu)出酶標板(ban)，迅(xun)速加入50ul終(zhong)止液(ye)，加入終(zhong)止液(ye)後(hou)應立(li)即(ji)測定結(jie)果(guo)。

9、在(zai)450nm波(bo)長(chang)處(chu)測定各孔(kong)的(de)OD值(zhi)。

操(cao)作註意事項：

1、試劑(ji)應按標簽(qian)說明書儲(chu)存(cun)，使用(yong)前恢(hui)復(fu)到室(shi)溫(wen)。稀稀(xi)過(guo)後(hou)的(de)標準(zhun)品應丟(diu)棄，不可(ke)保存(cun)

2、實(shi)驗中(zhong)不用的(de)板(ban)條應立(li)即(ji)放(fang)回(hui)包裝袋中(zhong)，密(mi)封(feng)保(bao)存(cun)，以免(mian)變(bian)質(zhi)。

3、不用的(de)其它試劑(ji)應包裝好或蓋(gai)好。不同(tong)批(pi)號(hao)的(de)試劑(ji)不要(yao)混(hun)用。保(bao)質(zhi)前(qian)使用(yong)。

4、使用(yong)壹(yi)次性(xing)的(de)吸(xi)頭(tou)以免(mian)交(jiao)叉汙染(ran)，吸取(qu)終(zhong)止液(ye)和(he)底(di)物A、B液(ye)時，避(bi)免(mian)使用(yong)帶金屬(shu)部(bu)分(fen)的(de)加樣(yang)器(qi)。

5、使用(yong)幹凈(jing)的(de)塑(su)料(liao)容(rong)器(qi)配置(zhi)洗(xi)滌(di)液(ye)。使用(yong)前充分(fen)混(hun)勻試劑(ji)盒(he)裏(li)的(de)各(ge)種(zhong)成(cheng)份(fen)及樣(yang)品。

6、底(di)物A應揮(hui)發，避(bi)免(mian)長時間(jian)打(da)開(kai)蓋子(zi)。底(di)物B對光(guang)敏感(gan)，避免(mian)長時間(jian)暴(bao)露(lu)於(yu)光(guang)下。避免(mian)用手接觸(chu)，有(you)毒(du)。實(shi)驗(yan)完成(cheng)後(hou)應立(li)即(ji)讀(du)取OD值(zhi)。

7、加入試劑(ji)的(de)順(shun)序(xu)應壹(yi)致，以保證(zheng)所有(you)反應板(ban)孔(kong)溫(wen)育的(de)時(shi)間(jian)壹(yi)樣(yang)。按照說明書中(zhong)標明(ming)的(de)時(shi)間(jian)、加液(ye)的(de)量(liang)及順序(xu)進行(xing)溫(wen)育操(cao)作(zuo)。

壹(yi)般來(lai)講(jiang)，96T能(neng)檢(jian)測90個(ge)樣(yang)本(ben)，48T能檢(jian)測42個(ge)樣(yang)本(ben)，這(zhe)裏面需要(yao)用(yong)標樣(yang)來(lai)做標準(zhun)曲(qu)線，所以各位(wei)需要(yao)做實(shi)驗的(de)老(lao)師們(men)，請在(zai)購(gou)買(mai)ELISA試劑(ji)盒(he)的(de)時(shi)候(hou)註意，需要(yao)做多(duo)少個(ge)樣(yang)本(ben)，在決定買(mai)多(duo)大(da)規格(ge)的(de)試劑(ji)盒(he)，以免(mian)做實(shi)驗時出(chu)現試劑(ji)盒(he)不夠用(yong)或者浪(lang)費！

原理：將特異性抗(kang)體包被於(yu)固(gu)相載體表面，經(jing)洗(xi)滌(di)後(hou)分(fen)成(cheng)兩(liang)組(zu)：壹(yi)組加酶(mei)標記(ji)抗(kang)原和(he)被測抗(kang)原的(de)混(hun)合液(ye)，另(ling)壹(yi)組只(zhi)加酶(mei)標記(ji)抗(kang)原，經(jing)孵育洗(xi)滌(di)後(hou)加底(di)物顯色(se)，這(zhe)兩(liang)組(zu)底(di)物降解(jie)量(liang)之(zhi)差(cha)，即(ji)為(wei)所要(yao)測定的(de)未(wei)知(zhi)抗(kang)原的(de)量(liang)。

小鼠繁(fan)殖與(yu)呼(hu)吸綜(zong)合征(zheng)病毒抗(kang)體(PRRSV-Ab)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠甘油(you)三酯水解(jie)酶(TGH)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠幹(gan)擾素(su)誘導(dao)鳥苷(gan)酸結(jie)合蛋(dan)白(bai)1(GBP1)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠黑(hei)素(su)皮質(zhi)素(su)受(shou)體4(MC4R)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠角(jiao)化細胞(bao)內分(fen)泌(mi)因(yin)子(zi)(KAF)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠抗(kang)L型(xing)鈣(gai)通道蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(Anti-CACH2)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠美(mei)金剛(gang)胺(an)(Memantine)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠生(sheng)長激素抑制激素(GHIH)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠嗜(shi)酸粒細胞(bao)趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠鼠(shu)泰澤病原體(Tyzzer's Organism)elisa試劑(ji)盒(he)