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        1. 產(chan)品(pin)中(zhong)心/ products

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          小(xiao)鼠(shu)單克(ke)隆抗(kang)體亞(ya)型(xing)鑒定(ding)(MAI)elisa試(shi)劑(ji)盒

          小(xiao)鼠(shu)單克(ke)隆抗(kang)體亞(ya)型(xing)鑒定(ding)(MAI)elisa試(shi)劑(ji)盒
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          我(wo)司產品(pin)齊全(quan),因(yin)上架(jia)數量(liang)有(you)限(xian),未能(neng)全(quan)部上架(jia),如(ru)需訂(ding)購(gou)或者(zhe)產品(pin)詳(xiang)情請(qing)直(zhi)接聯(lian)系(xi)我(wo)司銷售!

          • 產品(pin)型號:
          • 廠商(shang)性(xing)質:生(sheng)產廠(chang)家
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          規(gui)格96T/48T供(gong)貨(huo)周期現貨
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          規(gui)格:96T/48T

          包裝:盒

          檢測(ce)原(yuan)理(li):采用(yong)雙抗夾(jia)心法

          保(bao)質期(qi):六(liu)個月

          產品(pin)保(bao)存(cun)條(tiao)件(jian):2-8°C

          應用範(fan)圍:僅供科(ke)研(yan)研(yan)究實(shi)驗(yan)使(shi)用(yong)

          樣品(pin)形式(shi):血(xue)清(qing)/血漿(jiang)/組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)/細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上清(qing)/其它生(sheng)物(wu)液(ye)體(具體情況請(qing)咨(zi)詢)

          標本的(de)采集(ji)及保(bao)存(cun)

          1.血清:室溫(wen)血(xue)液(ye)自(zi)然(ran)凝(ning)固(gu)10-20分(fen)鐘(zhong)後,離心20分(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。保(bao)存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應再次(ci)離心。

          2.血漿(jiang):應根據(ju)標(biao)本的(de)要(yao)求選擇(ze)EDTA、檸檬(meng)酸鈉(na)或(huo)肝素(su)作(zuo)為抗(kang)凝劑,混合10-20分(fen)鐘(zhong)後,離心20分(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。保(bao)存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應再次(ci)離心。

          3.尿液(ye):用(yong)無(wu)菌管(guan)收(shou)集(ji)。離心20分(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。保(bao)存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應再次(ci)離心。胸腹水(shui)、腦脊(ji)液(ye)參(can)照(zhao)此實行(xing)。

          4.細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上清(qing):檢測(ce)分(fen)泌性的(de)成份(fen)時(shi),用無(wu)菌管(guan)收(shou)集(ji)。離心20分(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉/ 分(fen))。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。檢測(ce)細(xi)胞(bao)內的(de)成份(fen)時(shi),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋(shi)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye),細(xi)胞(bao)濃(nong)度達到(dao)100萬(wan)/ml左(zuo)右。通過(guo)反復凍(dong)融,以使(shi)細(xi)胞(bao)破(po)壞並 放出(chu)細(xi)胞(bao)內成份(fen)。離心20分(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。保(bao)存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應再次(ci)離心。

          5.組(zu)織(zhi)標(biao)本:切(qie)割(ge)標(biao)本後,稱取(qu)重(zhong)量(liang)。加(jia)入壹定(ding)量(liang)的(de)PBS,PH7.4。用液(ye)氮(dan)迅(xun)速冷凍(dong)保(bao)存(cun)備(bei)用。標本融化(hua)後仍然保(bao)持2-8℃的(de)溫(wen)度。加入壹定(ding)量(liang)的(de)PBS(PH7.4),用手(shou)工或勻(yun)漿(jiang)器(qi)將(jiang)標(biao)本勻(yun)漿(jiang)充(chong)分(fen)。離心20分(fen)鐘(zhong)左右(2000-3000轉/分(fen))。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。分(fen)裝後壹份(fen)待(dai)檢測(ce),其余冷凍(dong)備用(yong)。

          標本要(yao)求:

          1.標本采(cai)集(ji)後盡(jin)早(zao)進(jin)行(xing)提(ti)取(qu),提(ti)取(qu)按(an)相關(guan)文(wen)獻進(jin)行(xing),提(ti)取(qu)後應盡(jin)快進(jin)行(xing)實(shi)驗(yan)。若(ruo)不能(neng)馬上進(jin)行(xing)試(shi)驗(yan),可(ke)將(jiang)標(biao)本放於-20℃保(bao)存(cun),但(dan)應避免(mian)反復凍(dong)融

          2.不能(neng)檢測(ce)含(han)NaN3的(de)樣品(pin),因(yin)NaN3抑制辣(la)根過(guo)氧化(hua)物(wu)酶的(de)(HRP)活性(xing)。

          試(shi)劑(ji)盒組(zu)成:

          48孔(kong)配制:

          1.說(shuo)明書:1份(fen)

          2.封(feng)板(ban)膜:2片(48)

          3.密封(feng)袋(dai):1個

          4.酶標包(bao)被(bei)板:1×48 (2-8℃保(bao)存(cun))

          5.標準品(pin):0.5ml×1瓶(2-8℃保(bao)存(cun))

          6.標準品(pin)稀釋(shi)液(ye):1.5ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

          7.酶標試(shi)劑(ji):3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

          8.樣品(pin)稀釋(shi)液(ye):3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

          9.顯色劑A液(ye):3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

          10.顯色劑B液(ye):3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

          11.終止液(ye):3ml×1瓶(2-8℃保(bao)存(cun))

          12.濃縮洗滌(di)液(ye):(20ml×20倍(bei))×1瓶(2-8℃保(bao)存(cun))

          96孔(kong)配置:

          1.說(shuo)明書:1份(fen)

          2.封(feng)板(ban)膜:2片(96)

          3.密封(feng)袋(dai): 1個

          4.酶標包(bao)被(bei)板:1×96 (2-8℃保(bao)存(cun))

          5.標準品(pin):0.5ml×1瓶(2-8℃保(bao)存(cun))

          6.標準品(pin)稀釋(shi)液(ye):1.5ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

          7.酶標試(shi)劑(ji):3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

          8.樣品(pin)稀釋(shi)液(ye):3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

          9.顯色劑A液(ye):3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

          10.顯色劑B液(ye):3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

          11.終止液(ye):3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

          12.濃縮洗滌(di)液(ye):(20ml×20倍(bei))×1瓶(2-8℃保(bao)存(cun))

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          小鼠(shu)單克(ke)隆抗(kang)體亞(ya)型(xing)鑒定(ding)(MAI)elisa試(shi)劑(ji)盒

          需要(yao)自(zi)備(bei)的(de)試(shi)劑(ji)和(he)器(qi)材(cai)

          1.37℃恒溫(wen)箱。

          2.標準規(gui)格酶標儀。

          3.精密移液(ye)器(qi)及壹次(ci)性吸(xi)頭

          4.蒸餾水(shui),

          5.壹次(ci)性試(shi)管(guan)

          6.吸水(shui)紙(zhi)

          操作(zuo)步(bu)驟(zhou)

          1、標準品(pin)的(de)稀釋(shi):在酶標包(bao)被(bei)板上設(she)標(biao)準品(pin)孔(kong)10孔(kong),在第(di)壹、第(di)二孔(kong)中(zhong)分(fen)別(bie)加標準品(pin)100μl,然後在第(di)壹、第(di)二孔(kong)中(zhong)加(jia)標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液(ye)50μl,混勻(yun);然後從(cong)第(di)壹孔(kong)、第(di)二孔(kong)中(zhong)各(ge)取(qu)100μl分(fen)別(bie)加到(dao)第(di)三孔(kong)和(he)第(di)四(si)孔(kong),再在第(di)三、第(di)四(si)孔(kong)分(fen)別(bie)加標準品(pin)稀釋(shi)液(ye)50μl,混勻(yun);然後在第(di)三孔(kong)和(he)第(di)四(si)孔(kong)中(zhong)先(xian)各(ge)取(qu)50μl棄(qi)掉(diao),再各(ge)取(qu)50μl分(fen)別(bie)加到(dao)第(di)五、第(di)六(liu)孔(kong)中(zhong),再在第(di)五、第(di)六(liu)孔(kong)中(zhong)分(fen)別(bie)加標準品(pin)稀釋(shi)液(ye)50ul,混勻(yun);混勻(yun)後從(cong)第(di)五、第(di)六(liu)孔(kong)中(zhong)各(ge)取(qu)50μl分(fen)別(bie)加到(dao)第(di)七、第(di)八孔(kong)中(zhong),再在第(di)七、第(di)八孔(kong)中(zhong)分(fen)別(bie)加標準品(pin)稀釋(shi)液(ye)50μl,混勻(yun)後從(cong)第(di)七、第(di)八孔(kong)中(zhong)分(fen)別(bie)取(qu)50μl加(jia)到(dao)第(di)九(jiu)、第(di)十(shi)孔(kong)中(zhong),再在第(di)九(jiu)第(di)十(shi)孔(kong)分(fen)別(bie)加標準品(pin)稀釋(shi)液(ye)50μl,混勻(yun)後從(cong)第(di)九(jiu)第(di)十(shi)孔(kong)中(zhong)各(ge)取(qu)50μl棄(qi)掉(diao)。(稀釋(shi)後各(ge)孔(kong)加(jia)樣量(liang)都(dou)為50μl,濃度分(fen)別(bie)為9mmol/L,6 mmol/L,3 mmol/L,1.5mmol/L, 0.75 mmol/L)。

          2、加樣:分(fen)別(bie)設(she)空(kong)白(bai)孔(kong)(空(kong)白(bai)對(dui)照(zhao)孔(kong)不加樣品(pin)及酶標試(shi)劑(ji),其余各(ge)步(bu)操作(zuo)相同(tong))、待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)。在酶標包(bao)被(bei)板上待(dai)測樣品(pin)孔(kong)中(zhong)先(xian)加(jia)樣品(pin)稀釋(shi)液(ye)40μl,然(ran)後再加(jia)待(dai)測樣品(pin)10μl(樣品(pin)最終(zhong)稀釋(shi)度為5倍(bei))。加樣將(jiang)樣品(pin)加於酶標板(ban)孔(kong)底(di)部(bu),盡(jin)量(liang)不觸(chu)及孔(kong)壁(bi),輕輕晃(huang)動混勻(yun)。

          3、溫(wen)育(yu):用(yong)封(feng)板(ban)膜封(feng)板(ban)後置37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。

          4、配液(ye):將(jiang)30(48T的(de)20倍(bei))倍(bei)濃縮洗滌(di)液(ye)用(yong)蒸餾(liu)水(shui)30(48T的(de)20倍(bei))倍(bei)稀釋(shi)後備用。

          5、洗滌(di):小心揭掉(diao)封(feng)板(ban)膜,棄(qi)去(qu)液(ye)體,甩(shuai)幹,每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗滌(di)液(ye),靜(jing)置30秒(miao)後棄(qi)去(qu),如(ru)此重(zhong)復5次(ci),拍幹。

          6、加酶:每(mei)孔(kong)加(jia)入酶標試(shi)劑(ji)50μl,空(kong)白(bai)孔(kong)除外(wai)。

          7、溫(wen)育(yu):操作(zuo)同(tong)3。

          8、洗滌(di):操作(zuo)同(tong)5。

          9、顯色:每(mei)孔(kong)先(xian)加(jia)入顯色劑A50μl,再加(jia)入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻(yun),37℃避光(guang)顯色15分(fen)鐘(zhong).

          10、終止:每(mei)孔(kong)加(jia)終(zhong)止(zhi)液(ye)50μl,終(zhong)止反(fan)應(此時(shi)藍色立(li)轉(zhuan)黃色)。

          11、測定(ding):以空(kong)白(bai)空調零,450nm波(bo)長依(yi)序測量(liang)各(ge)孔(kong)的(de)吸光(guang)度(OD值)。 測定(ding)應在加終(zhong)止(zhi)液(ye)後15分(fen)鐘(zhong)以內進(jin)行(xing)。

          洗板方(fang)法

          手(shou)工洗板(ban)方(fang)法:甩(shuai)掉(diao)酶標板(ban)內的(de)液(ye)體;在實驗(yan)臺上鋪(pu)墊幾層(ceng)吸(xi)水(shui)紙(zhi),酶標板(ban)朝下用力(li)拍(pai)幾次(ci);將(jiang)稀釋(shi)後的(de)洗滌(di)液(ye)至(zhi)少0.35ml註(zhu)入孔(kong)內,浸泡1-2分(fen)鐘(zhong)。根據(ju)需(xu)要(yao),重(zhong)復此(ci)過(guo)程(cheng)數次(ci)。

          自(zi)動洗(xi)板:如(ru)果有(you)自(zi)動洗(xi)板機,應在熟(shu)練使(shi)用(yong)後再用(yong)到(dao)正(zheng)式(shi)實(shi)驗(yan)過(guo)程(cheng)中(zhong)。

          註(zhu)意事(shi)項:

          試(shi)劑(ji)盒從(cong)冷藏(zang)環(huan)境中(zhong)取(qu)出(chu)應在室溫(wen)平衡15-30分(fen)鐘(zhong)後方(fang)可(ke)使(shi)用(yong),酶標包(bao)被(bei)板開(kai)封(feng)後如(ru)未用完,板(ban)條(tiao)應裝入密封(feng)袋(dai)中(zhong)保(bao)存(cun)。

          濃洗滌(di)液(ye)可(ke)能(neng)會(hui)有(you)結(jie)晶(jing)析(xi)出(chu),稀釋(shi)時(shi)可(ke)在水(shui)浴(yu)中(zhong)加(jia)溫(wen)助(zhu)溶(rong),洗滌(di)時不影響結(jie)果(guo)。

          各(ge)步(bu)加樣均應使(shi)用(yong)加(jia)樣器(qi),並經常校(xiao)對其準確(que)性(xing),以(yi)避(bi)免試(shi)驗(yan)誤差(cha)。壹次(ci)加樣時間(jian)最(zui)好(hao)控(kong)制在5分(fen)鐘(zhong)內,如(ru)標本數量(liang)多(duo),推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)排(pai)槍(qiang)加樣。

          請(qing)每(mei)次(ci)測定(ding)的(de)同(tong)時(shi)做(zuo)標(biao)準曲(qu)線(xian),最(zui)好(hao)做復孔(kong)。如(ru)標本中(zhong)待(dai)測(ce)物(wu)質含(han)量(liang)過(guo)高(樣本OD值大(da)於標準品(pin)孔(kong)第(di)壹孔(kong)的(de)OD值),請(qing)先(xian)用(yong)樣品(pin)稀釋(shi)液(ye)稀釋(shi)壹定(ding)倍(bei)數(n倍(bei))後再測(ce)定(ding),計算(suan)時請(qing)最(zui)後乘以總稀釋(shi)倍(bei)數(×n×5)。

          封(feng)板(ban)膜只限(xian)壹次(ci)性使(shi)用(yong),以(yi)避(bi)免交叉(cha)汙(wu)染(ran)。

          底物(wu)請(qing)避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)。

          嚴(yan)格按(an)照(zhao)說(shuo)明書的(de)操作(zuo)進(jin)行(xing),試(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)判定(ding)必(bi)須以酶標儀讀(du)數為準.

          所有樣品(pin),洗滌(di)液(ye)和(he)各(ge)種(zhong)廢棄(qi)物(wu)都(dou)應按(an)傳(chuan)染(ran)物(wu)處理(li)。

          本試(shi)劑(ji)不同(tong)批(pi)號組(zu)分(fen)不得混用。

          如(ru)與英(ying)文(wen)說(shuo)明書有異,以(yi)英(ying)文(wen)說(shuo)明書為準。

          計算(suan):

          以標準物(wu)的(de)濃度為橫(heng)坐標(biao),OD值為縱坐標(biao),    

          在坐標(biao)紙(zhi)上繪(hui)出(chu)標準曲(qu)線(xian),根據(ju)樣品(pin)的(de)OD      

          值由標準曲(qu)線(xian)查出(chu)相應的(de)濃度;再乘(cheng)以(yi)稀釋(shi)      

          倍(bei)數;或用(yong)標(biao)準物(wu)的(de)濃度與OD值計算(suan)出(chu)標      

          準曲(qu)線(xian)的(de)直線(xian)回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)式(shi),將(jiang)樣品(pin)的(de)OD值      

          代入方(fang)程(cheng)式(shi),計(ji)算(suan)出(chu)樣品(pin)濃度,再乘(cheng)以(yi)稀釋(shi)      

          倍(bei)數,即為(wei)樣品(pin)的(de)實際濃度。  

          檢測(ce)範(fan)圍(wei)、 OD值:

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          小鼠(shu)繁(fan)殖與(yu)呼(hu)吸綜合征(zheng)病(bing)毒(du)抗(kang)體(PRRSV-Ab)elisa試(shi)劑(ji)盒

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