酸(suan)性蛋白(bai)酶(mei)測(ce)試(shi)盒

酸(suan)性蛋白(bai)酶(mei)測(ce)試(shi)盒

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操作(zuo)流(liu)程(cheng)：

1.從室溫(wen)平衡20min後(hou)的(de)鋁(lv)箔(bo)袋(dai)中取出(chu)所需板(ban)條(tiao)，剩余(yu)板條用自封袋(dai)密封(feng)放回(hui)4℃。

2. 設(she)置標準品(pin)孔(kong)和(he)樣(yang)本孔(kong)，標準品(pin)孔(kong)各加(jia)不同濃度的(de)標準品(pin)50μL；

3. 樣本孔(kong)中加(jia)入待測(ce)樣本50μL；空(kong)白(bai)孔(kong)不加(jia)。

4. 除空白(bai)孔(kong)外，標準品(pin)孔(kong)和(he)樣(yang)本孔(kong)中每(mei)孔(kong)加(jia)入辣根過(guo)氧化物酶(mei)（HRP）標記(ji)的(de)檢(jian)測(ce)抗(kang)體100μL，用封板(ban)膜封住反應孔(kong)，37℃水浴(yu)鍋或恒溫(wen)箱溫(wen)育(yu)60min。

5. 棄去液(ye)體，吸水紙(zhi)上(shang)拍幹(gan)，每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌液（350μL），靜置1min，甩(shuai)去洗(xi)滌液，吸水紙(zhi)上(shang)拍幹(gan)，如此(ci)重(zhong)復洗(xi)板(ban)5次(ci)（也可(ke)用(yong)洗(xi)板(ban)機洗(xi)板(ban)）。

6. 每孔(kong)加(jia)入底物(wu)A、B各(ge)50μL，37℃避光孵(fu)育(yu)15min。

7. 每孔(kong)加(jia)入終止液50μL，15min內，在450nm波(bo)長處(chu)測(ce)定各(ge)孔(kong)的(de)OD值(zhi)。

優(you)點如下:

1、快速簡便(bian):操(cao)作(zuo)時間短,48-50T,可(ke)測(ce)40例樣(yang)本左(zuo)右(you),96-100T,可(ke)測(ce)80例樣(yang)本左(zuo)右(you);

2、取樣(yang)量微(wei):常(chang)規(gui)操(cao)作(zuo)取樣(yang)量50l, 酶(mei)標儀操作(zuo)僅(jin)需5l即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce),部分(fen)試(shi)劑(ji)盒取樣(yang)多(duo)少(shao)請(qing);

3、穩(wen)定(ding)性好(hao):試(shi)劑(ji)盒2~8℃存(cun)放3個(ge)月有效(xiao);

4、再現性好(hao):20倍(bei)稀(xi)釋(shi)線(xian)性仍(reng)然良好(hao);

5、回收(shou)試(shi)驗(yan): X =99%;

6、受外界(jie)影響因素小(xiao):幹(gan)擾(rao)因素少(shao),重(zhong)復性強;

7、測(ce)試(shi)面(mian)廣:可(ke)測(ce)動物(wu)血清(qing)(漿(jiang))、組(zu)織(zhi)、各(ge)種體液、灌流(liu)液、各(ge)種(zhong)培養(yang)細(xi)胞以及細(xi)胞培養(yang)上(shang)清(qing)液(ye)等(deng),部(bu)分(fen)試(shi)劑(ji)盒適(shi)用(yong)於(yu)檢測(ce)植(zhi)物(wu),歡迎(ying)

儀器:

1、分(fen)光光度計(ji)/酶(mei)標儀/生化(hua)分(fen)析儀(比色測(ce)定波(bo)長為(wei)550nm)

2、恒溫(wen)水浴(yu)箱(xiang)或氣(qi)浴(yu)箱(xiang) (孵(fu)育(yu)溫(wen)度為(wei)37℃)

3、臺式離心機

4、漩渦混(hun)勻(yun)器

5、微(wei)量移(yi)液器

使(shi)用(yong)須(xu)知:

(1)請參照(zhao)相(xiang)關法規(gui)、文獻、MSDs等(deng)信(xin)息,理解並(bing)掌(zhang)握(wo)好(hao)試(shi)劑(ji)的(de)特(te)性,再進行安(an)全操(cao)作(zuo)。

(2)通(tong)常(chang)購(gou)買(mai)試(shi)劑(ji)時壹定要(yao)想到--次(ci)性用完。若估(gu)算(suan)不(bu)足有(you)剩余(yu)的(de)話，更(geng)加(jia)註意其(qi)他保(bao)管和(he)管理(li)。

(3)萬(wan)壹-試(shi)劑(ji)操作(zuo)者(zhe)並(bing)非(fei)專(zhuan)業技(ji)術人(ren)員(yuan)。必須(xu)在專(zhuan)業人士(shi)的(de)指(zhi)導(dao)監督下進行操(cao)作(zuo)。對(dui)於(yu)使(shi)用(yong)後(hou)的(de)廢(fei)棄物,不要或(huo)者舊(jiu)的(de)試(shi)劑(ji)，應按照(zhao)相(xiang)關法律法(fa)規(gui)正(zheng)當(dang)處(chu)理。

(4)購買(mai)後(hou)，請(qing)務(wu)必確認標簽(qian)上(shang)的(de)註(zhu)意(yi)事(shi)項;做(zuo)好(hao)預防顛倒,摔壞(huai)的(de)措(cuo)施(shi)和(he)管理(li)體制(zhi);在使(shi)用(yong)前(qian)再(zai)次(ci)確認標簽(qian)上(shang)的(de)註(zhu)意(yi)事(shi)項，做(zuo)好(hao)必要(yao)的(de)安(an)全對(dui)策(ce);對沒有(you)標明(ming)其(qi)危(wei)害(hai)特(te)性、有害特(te)性的(de)，也(ye)要(yao)慎(shen)重地(di)進行操(cao)作(zuo);必須(xu)帶好(hao)防護用具，小心翼(yi)翼(yi)進行操(cao)作(zuo)。

生化試(shi)劑(ji)的(de)種(zhong)類(lei)與等(deng)級(ji)說明(ming):

(1)免(mian)疫試(shi)劑(ji)包括抗(kang)體及抗(kang)血清(qing)、正(zheng)常(chang)血(xue)清(qing)及補體、抗(kang)原(yuan)、免(mian)疫組織(zhi)化(hua)學研究用(yong)試(shi)劑(ji)、細(xi)胞培養(yang)用試(shi)劑(ji)、細(xi)胞分(fen)離試(shi)劑(ji)、凝膠(jiao)內擴散(san)法(fa)及電(dian)泳(yong)試(shi)劑(ji)等(deng)。

(2)基因工程(cheng)用試(shi)劑(ji)包括基因表(biao)達與基因重組(zu)、人(ren)工(gong)合(he)成蛋白(bai)、激素(su)、核(he)酸(suan)合(he)成試(shi)劑(ji)、內切酶(mei)等(deng)。

(3)誘變(bian)劑(ji)和(he)主要供測(ce)定工(gong)作(zuo)場(chang)所與生(sheng)活環(huan)境(jing)中的(de)毒(du)物質(zhi)的(de)致(zhi)癌性與化(hua)學毒(du)物的(de)致(zhi)突變(bian)性。

(4)工業用化(hua)學品包括試(shi)制(zhi)開發的(de)工(gong)業用化(hua)學品,有四(si)千(qian)種(zhong)以上(shang),還(hai)在不(bu)斷(duan)增(zeng)加(jia)。

樣本收(shou)集(ji)與前(qian)處(chu)理(li):

血清(qing)(漿)可(ke)直(zhi)接(jie)測(ce)定。

紅細(xi)胞:需按照(zhao)試(shi)劑(ji)盒中說明(ming)書上(shang)紅(hong)細(xi)胞的(de)測(ce)定方法(fa)進行提(ti)取後(hou)測(ce)定。

動物(wu)組織(zhi)樣本:可(ke)用(yong)生理鹽(yan)水按重(zhong)量體積(ji)比(bi)制(zhi)備成組(zu)織(zhi)勻漿(jiang)液(ye),離心取上(shang)清(qing)測(ce)定。

培養(yang)細(xi)胞、細(xi)菌(jun)、植(zhi)物(wu)組(zu)織(zhi):常(chang)用(yong)PBS作(zuo)為(wei)勻漿(jiang)介(jie)質(zhi)破(po)碎(sui)後(hou)離心取上(shang)清(qing)測(ce)定。

具體的(de)樣(yang)本前(qian)處(chu)理(li):參考我們隨貨發送的(de)《實(shi)驗(yan)方法(fa)學》以及試(shi)劑(ji)盒中詳(xiang)細(xi)說明(ming)書。

實驗(yan)結果判(pan)斷(duan)我有(you)妙(miao)招(zhao):

1、定量測(ce)定結(jie)果根據(ju)標準曲(qu)線計(ji)算(suan)樣(yang)品(pin)中待(dai)測(ce)物的(de)含(han)量。

2、以樣品(pin)孔(kong)的(de)OD值(zhi)大於(yu)陰性對照(zhao)OD值(zhi)+2~3SD,作(zuo)為(wei)陽性結果的(de)閾值(zhi)。

3、以P/N值(zhi)(陽性孔(kong)OD值(zhi)/陰性孔(kong)OD值(zhi))大於(yu)或等(deng)於(yu)2.1為(wei)陽性,P/N值(zhi)小於(yu)2.1,但(dan)大於(yu)1.5為(wei)可(ke)疑(yi),P/N小於(yu)1.5為(wei)陰性。

4、ELISA試(shi)劑(ji)盒目(mu)測(ce)定性法:加(jia)入底物(wu)經(jing)酶(mei)解和(he)終(zhong)止反應後,肉眼(yan)觀察(cha)陽性孔(kong)顏色明(ming)顯(xian)深(shen)於(yu)(競爭(zheng)法則(ze)淺於(yu))陰性對照(zhao),與陰(yin)性對照(zhao)的(de)顏色接(jie)近者(zhe),判定(ding)為(wei)陰性。

為(wei)了(le)達(da)到準確的(de)實(shi)驗(yan)結果,取用(yong)試(shi)劑(ji)時應遵守以(yi)下規(gui)則(ze),以(yi)保(bao)證(zheng)試(shi)劑(ji)不受(shou)汙(wu)染(ran)和(he)不(bu)變(bian)質(zhi):

(1)試(shi)劑(ji)不能與手(shou)接(jie)觸。

(2)要用潔(jie)凈的(de)藥勺,量筒(tong)或滴管取用(yong)試(shi)劑(ji),*不準用(yong)同壹種工(gong)具(ju)同時連續(xu)取用(yong)多(duo)種試(shi)劑(ji)。取完(wan)壹種試(shi)劑(ji)後,應將(jiang)工具(ju)洗(xi)凈(藥勺要擦幹(gan))後,方可(ke)取用(yong)另(ling)壹種試(shi)劑(ji)。

(3)試(shi)劑(ji)取用(yong)後(hou)壹定要(yao)將(jiang)瓶塞(sai)蓋緊,不可(ke)放錯(cuo)瓶(ping)蓋和(he)滴管,絕(jue)不(bu)允(yun)許張(zhang)冠(guan)李(li)戴,用(yong)完(wan)後將(jiang)瓶放回(hui)原(yuan)處。

(4)已(yi)取出(chu)的(de)試(shi)劑(ji)不能再放回(hui)原(yuan)試(shi)劑(ji)瓶內。

另(ling)外取用(yong)試(shi)劑(ji)時應本著(zhe)節約精(jing)神(shen),盡可(ke)能少(shao)用(yong),這樣既(ji)便(bian)於(yu)操作(zuo)和(he)仔(zai)細(xi)觀察(cha)現象(xiang),又能得到較好(hao)的(de)實(shi)驗(yan)結果。

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