過(guo)氧(yang)化(hua)物酶(mei)（POD）測(ce)試(shi)盒

過(guo)氧化(hua)物酶(mei)（POD）測(ce)試(shi)盒

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操(cao)作(zuo)流(liu)程(cheng)：

1.從(cong)室溫平(ping)衡(heng)20min後的鋁(lv)箔袋中取出(chu)所需板(ban)條，剩余板(ban)條用(yong)自(zi)封袋(dai)密(mi)封放(fang)回(hui)4℃。

2. 設置標準(zhun)品(pin)孔和樣本(ben)孔，標(biao)準品孔各(ge)加不(bu)同(tong)濃(nong)度(du)的標(biao)準(zhun)品(pin)50μL；

3. 樣本(ben)孔中加入待(dai)測(ce)樣本(ben)50μL；空(kong)白(bai)孔不(bu)加。

4. 除空白(bai)孔外(wai)，標準品孔和樣本(ben)孔中每(mei)孔加入辣(la)根過(guo)氧化(hua)物酶(mei)（HRP）標(biao)記的檢(jian)測(ce)抗體100μL，用(yong)封板(ban)膜封住(zhu)反(fan)應(ying)孔，37℃水(shui)浴鍋(guo)或(huo)恒溫箱溫育(yu)60min。

5. 棄去液體，吸(xi)水紙(zhi)上拍幹，每(mei)孔加滿(man)洗(xi)滌(di)液（350μL），靜置1min，甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌(di)液，吸(xi)水紙(zhi)上拍幹，如此重(zhong)復(fu)洗(xi)板(ban)5次（也(ye)可(ke)用(yong)洗(xi)板(ban)機洗(xi)板(ban)）。

6. 每(mei)孔加入底(di)物A、B各(ge)50μL，37℃避光孵育(yu)15min。

7. 每(mei)孔加入終(zhong)止液50μL，15min內，在450nm波(bo)長處測(ce)定(ding)各(ge)孔的OD值(zhi)。

優點(dian)如(ru)下(xia):

1、快(kuai)速(su)簡(jian)便:操(cao)作(zuo)時(shi)間(jian)短(duan),48-50T,可(ke)測(ce)40例樣本(ben)左右,96-100T,可(ke)測(ce)80例樣本(ben)左右;

2、取樣量(liang)微(wei):常規操(cao)作(zuo)取樣量(liang)50l, 酶(mei)標(biao)儀操(cao)作(zuo)僅需5l即可(ke)檢(jian)測(ce),部(bu)分(fen)試(shi)劑盒取樣多少請;

3、穩定(ding)性(xing)好(hao):試劑(ji)盒2~8℃存放(fang)3個(ge)月(yue)有效;

4、再(zai)現性(xing)好(hao):20倍稀(xi)釋(shi)線(xian)性(xing)仍(reng)然(ran)良好(hao);

5、回(hui)收(shou)試(shi)驗: X =99%;

6、受外界(jie)影(ying)響因素小:幹擾(rao)因素少,重(zhong)復(fu)性(xing)強;

7、測(ce)試(shi)面(mian)廣(guang):可(ke)測(ce)動(dong)物(wu)血(xue)清(qing)(漿(jiang))、組織、各(ge)種(zhong)體液、灌(guan)流(liu)液、各(ge)種(zhong)培(pei)養細胞以(yi)及細胞培(pei)養上清(qing)液等(deng),部分(fen)試劑盒適(shi)用(yong)於檢(jian)測(ce)植(zhi)物(wu),歡迎(ying)

儀器:

1、分光光(guang)度(du)計/酶(mei)標(biao)儀/生化(hua)分析(xi)儀(yi)(比(bi)色(se)測(ce)定(ding)波(bo)長為(wei)550nm)

2、恒溫水浴(yu)箱或(huo)氣浴箱 (孵育(yu)溫度(du)為37℃)

3、臺式離(li)心機

4、漩渦混(hun)勻(yun)器

5、微(wei)量移(yi)液器

使用(yong)須知(zhi):

(1)請參照相(xiang)關法規(gui)、文獻(xian)、MSDs等(deng)信息(xi),理解並(bing)掌(zhang)握(wo)好試(shi)劑的特(te)性(xing),再(zai)進(jin)行(xing)安(an)全(quan)操(cao)作(zuo)。

(2)通(tong)常購(gou)買(mai)試劑時(shi)壹定(ding)要想到--次性(xing)用(yong)完(wan)。若估算(suan)不(bu)足有(you)剩余的話(hua)，更(geng)加註(zhu)意其(qi)他保管和管理。

(3)萬壹-試劑操(cao)作(zuo)者並(bing)非(fei)專(zhuan)業(ye)技術人(ren)員(yuan)。必須(xu)在專(zhuan)業(ye)人(ren)士的指(zhi)導監督(du)下進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。對於使(shi)用(yong)後的廢(fei)棄物,不(bu)要或(huo)者舊(jiu)的試(shi)劑(ji)，應(ying)按照相(xiang)關法律法規(gui)正(zheng)當(dang)處理(li)。

(4)購(gou)買(mai)後，請務(wu)必確認(ren)標簽上的註(zhu)意事項(xiang);做(zuo)好(hao)預防顛倒,摔壞的措(cuo)施和管理體制;在使(shi)用(yong)前再(zai)次確(que)認標簽上的註(zhu)意事項(xiang)，做(zuo)好(hao)必要的安(an)全(quan)對策(ce);對沒(mei)有(you)標明(ming)其危害特性(xing)、有(you)害特(te)性(xing)的，也(ye)要慎(shen)重(zhong)地進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo);必須帶(dai)好防(fang)護用(yong)具，小心翼翼(yi)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。

生化(hua)試劑(ji)的種(zhong)類與(yu)等(deng)級說(shuo)明(ming):

(1)免疫(yi)試(shi)劑(ji)包(bao)括(kuo)抗體及抗血清(qing)、正(zheng)常(chang)血(xue)清(qing)及補體、抗原、免(mian)疫(yi)組(zu)織化(hua)學(xue)研(yan)究(jiu)用(yong)試劑、細胞培(pei)養用(yong)試劑、細胞分(fen)離試(shi)劑(ji)、凝(ning)膠內擴散(san)法(fa)及電泳(yong)試(shi)劑等(deng)。

(2)基因工程(cheng)用(yong)試劑包(bao)括基因表(biao)達(da)與(yu)基(ji)因重(zhong)組(zu)、人(ren)工合(he)成(cheng)蛋(dan)白(bai)、激(ji)素、核(he)酸合(he)成(cheng)試(shi)劑(ji)、內切酶(mei)等(deng)。

(3)誘變劑(ji)和主要供(gong)測(ce)定(ding)工(gong)作(zuo)場(chang)所與(yu)生活環境中的毒物質(zhi)的致(zhi)癌(ai)性(xing)與(yu)化(hua)學(xue)毒物的致(zhi)突變性(xing)。

(4)工業用(yong)化(hua)學(xue)品包(bao)括試(shi)制開發的工(gong)業(ye)用(yong)化(hua)學(xue)品,有四千(qian)種(zhong)以上,還在不(bu)斷(duan)增加。

樣本(ben)收(shou)集與(yu)前(qian)處理(li):

血清(qing)(漿(jiang))可(ke)直(zhi)接測(ce)定(ding)。

紅(hong)細胞:需按照試(shi)劑(ji)盒中說(shuo)明(ming)書上紅(hong)細胞的測(ce)定(ding)方法進(jin)行(xing)提取後測(ce)定(ding)。

動物組(zu)織樣本(ben):可(ke)用(yong)生理鹽水按重(zhong)量(liang)體積(ji)比(bi)制備成(cheng)組(zu)織勻(yun)漿(jiang)液,離心取上清(qing)測(ce)定(ding)。

培(pei)養細胞、細菌(jun)、植物(wu)組織:常用(yong)PBS作(zuo)為勻(yun)漿(jiang)介質(zhi)破碎(sui)後離心取上清(qing)測(ce)定(ding)。

具體的樣本(ben)前(qian)處理(li):參考(kao)我(wo)們隨貨(huo)發送的《實(shi)驗方法學(xue)》以及(ji)試劑(ji)盒中詳細說(shuo)明(ming)書。

實驗結果(guo)判斷(duan)我有(you)妙(miao)招(zhao):

1、定量測(ce)定(ding)結(jie)果(guo)根據(ju)標準曲線(xian)計算(suan)樣品(pin)中待測(ce)物(wu)的含(han)量(liang)。

2、以樣品(pin)孔的OD值(zhi)大(da)於陰(yin)性(xing)對照OD值(zhi)+2~3SD,作(zuo)為陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo)的閾(yu)值(zhi)。

3、以P/N值(zhi)(陽(yang)性(xing)孔OD值(zhi)/陰(yin)性(xing)孔OD值(zhi))大(da)於或(huo)等(deng)於2.1為(wei)陽(yang)性(xing),P/N值(zhi)小於2.1,但(dan)大(da)於1.5為(wei)可(ke)疑,P/N小於1.5為(wei)陰(yin)性(xing)。

4、ELISA試劑盒目(mu)測(ce)定(ding)性(xing)法(fa):加入底(di)物經(jing)酶(mei)解和終止反(fan)應(ying)後,肉眼(yan)觀察(cha)陽(yang)性(xing)孔顏(yan)色(se)明(ming)顯(xian)深(shen)於(競爭(zheng)法則(ze)淺(qian)於)陰(yin)性(xing)對照,與(yu)陰(yin)性(xing)對照的顏(yan)色(se)接近者(zhe),判定為(wei)陰(yin)性(xing)。

為了(le)達(da)到準確的實(shi)驗結果(guo),取用(yong)試劑時(shi)應(ying)遵守(shou)以下(xia)規則,以(yi)保證試劑不(bu)受汙染和不(bu)變質(zhi):

(1)試劑不(bu)能與(yu)手(shou)接觸。

(2)要用(yong)潔凈的藥(yao)勺,量筒(tong)或(huo)滴(di)管取用(yong)試劑,*不(bu)準用(yong)同(tong)壹種(zhong)工具同(tong)時(shi)連(lian)續取用(yong)多種(zhong)試劑。取完(wan)壹種(zhong)試劑後,應將(jiang)工(gong)具(ju)洗(xi)凈(jing)(藥(yao)勺要擦幹)後,方可(ke)取用(yong)另壹種(zhong)試劑。

(3)試劑取用(yong)後壹定(ding)要將(jiang)瓶(ping)塞(sai)蓋(gai)緊,不(bu)可(ke)放(fang)錯(cuo)瓶(ping)蓋(gai)和滴(di)管,絕(jue)不(bu)允許張冠(guan)李戴(dai),用(yong)完(wan)後將(jiang)瓶(ping)放(fang)回(hui)原處。

(4)已取出(chu)的試(shi)劑(ji)不(bu)能再(zai)放(fang)回(hui)原試(shi)劑瓶(ping)內。

另外(wai)取用(yong)試劑時(shi)應(ying)本著節約(yue)精(jing)神,盡可(ke)能(neng)少用(yong),這樣既(ji)便於操(cao)作(zuo)和仔細觀察(cha)現象,又能(neng)得(de)到較好的實(shi)驗結果(guo)。

過氧化(hua)物酶(mei)（POD）測(ce)試(shi)盒