鈣衛蛋白(bai)小鼠(shu)CALP試(shi)劑(ji)盒

鈣衛蛋白(bai)小鼠(shu)CALP試(shi)劑(ji)盒ELISA試(shi)劑(ji)盒

ELISA法是免(mian)疫(yi)診(zhen)斷(duan)中(zhong)的壹(yi)項(xiang)新技術，現(xian)已成(cheng)功(gong)地應(ying)用於多(duo)種病原(yuan)微生物所引起(qi)的傳染病(bing)、寄生(sheng)蟲(chong)病及(ji)非(fei)傳染病(bing)等(deng)方面的免(mian)疫(yi)診(zhen)斷(duan)。也(ye)已(yi)應(ying)用於大分子抗原(yuan)和小分子抗原的定量(liang)測(ce)定，根(gen)據已經使(shi)用(yong)的(de)結果(guo)，認(ren)為ELISA法(fa)具(ju)有(you)靈(ling)敏、特(te)異、簡單(dan)、快(kuai)速(su)、穩定(ding)及(ji)易(yi)於自動(dong)化(hua)操(cao)作等(deng)特(te)點(dian)。不僅適用(yong)於臨(lin)床(chuang)標本的檢(jian)查，而(er)且(qie)由(you)於壹(yi)天(tian)之(zhi)內可(ke)以(yi)檢查幾(ji)百(bai)甚(shen)至上(shang)千份(fen)標(biao)本,因(yin)此(ci)，也(ye)適(shi)合(he)於血清流行病學(xue)調(tiao)查。本法不(bu)僅可(ke)以(yi)用來(lai)測定(ding)抗(kang)ti，而(er)且(qie)也(ye)可(ke)用(yong)於測定(ding)體(ti)液中的(de)循(xun)環(huan)抗原(yuan)，所以(yi)也(ye)是壹(yi)種(zhong)早期(qi)診(zhen)斷(duan)的(de)良(liang)好(hao)方法。因(yin)此(ci)ELISA法在(zai)生(sheng)物(wu)醫(yi)學(xue)各(ge)領(ling)域(yu)的(de)應(ying)用(yong)範圍(wei)日(ri)益(yi)擴(kuo)大，

鈣衛蛋白(bai)小鼠(shu)CALP試(shi)劑(ji)盒免(mian)責(ze)聲明

1. 試(shi)劑(ji)盒僅供研(yan)究(jiu)使用(yong)，不(bu)得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)實驗(yan)或(huo)人(ren)體(ti)實(shi)驗(yan)，否則所產生的(de)壹(yi)切(qie)後果(guo)，由(you)實驗(yan)者承擔，本公(gong)司(si)概不負責(ze)。

2. 嚴(yan)格按(an)照說(shuo)明書(shu)操(cao)作，實(shi)驗者違反說(shuo)明書(shu)操(cao)作，後果(guo)由(you)實驗(yan)者承擔。

3. 產品(pin)特(te)點(dian)

壹(yi)、高(gao)效、靈(ling)敏、特(te)異的抗(kang)ti；

二(er)、穩定的(de)重復(fu)性和可(ke)靠(kao)性；

三(san)、吸(xi)附(fu)性能好(hao)，空白(bai)值低(di)，孔(kong)底透(tou)明度高(gao)的(de)固(gu)相載(zai)體；

四(si)、適(shi)用(yong)血清、血漿、組織(zhi)勻(yun)漿液、細胞培養上(shang)清液、尿液等(deng)等(deng)多(duo)種標本類(lei)型；

五、節省實(shi)驗經費(fei)。

elisa試(shi)劑(ji)盒回收(shou)率是反應(ying)待(dai)測(ce)物在樣品(pin)分(fen)析(xi)過程中(zhong)的(de)損失(shi)的(de)程度，損(sun)失(shi)越(yue)少，回(hui)收(shou)率越高，如(ru)果(guo)作標(biao)液1PPM，就(jiu)是1毫(hao)克/升(sheng)，而(er)作出(chu)標準數據為0.99毫(hao)克/升(sheng)，就(jiu)是說妳(ni)的(de)回(hui)收(shou)率是99%，這(zhe)個與(yu)真(zhen)實成(cheng)分(fen)有(you)密(mi)切的(de)關(guan)系，說(shuo)明方法的準確(que)度。比(bi)如(ru)水(shui)中總無機(ji)氯(lv)含(han)量測(ce)定，樣品(pin)水(shui)中含有(you)無機(ji)氯(lv)20mg/L，取(qu)100mL被測(ce)水(shui)樣品(pin)，加入0.1mL濃(nong)度為10mg/mL的(de)含(han)無(wu)機(ji)氯(lv)標(biao)準樣品(pin)，測(ce)定(ding)時(shi)忽略(lve)體積變化，如(ru)果(guo)測(ce)定出樣品(pin)中(zhong)無(wu)機(ji)氯(lv)為29.8mg/L，則認(ren)為回(hui)收(shou)率為99%。

小鼠(shu)鈣(gai)衛蛋白(bai)(CALP)ELISA試(shi)劑(ji)盒

實驗(yan)過程:

1.試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei):所有(you)試(shi)劑(ji)都(dou)必須在使(shi)用(yong)前達到(dao)室(shi)溫,使用(yong)後請(qing)立(li)即按(an)照說(shuo)明書(shu)要(yao)求(qiu)保(bao)存(cun)試(shi)劑(ji)。實(shi)驗(yan)操(cao)作中(zhong)請(qing) 使用(yong)壹(yi)次(ci)性的吸(xi)頭,避(bi)免(mian)交(jiao)叉汙(wu)染。

2.加樣:加樣或(huo)加試(shi)劑(ji)時(shi)，請(qing)註意在(zai)吸(xi)取(qu)標本/標準(zhun)品(pin)，酶(mei)結(jie)合(he)物或(huo)底(di)物時，第yi個孔(kong)與(yu)最hou-壹(yi)個孔(kong)加樣之(zhi)間的(de)時(shi)間間隔如(ru)果(guo)太(tai)大，將會導致(zhi)不同的“預(yu)孵育(yu)“時間,從而(er)明顯地影(ying)響到測量(liang)值(zhi)的準確(que)性及(ji)重復(fu)性。壹(yi)次(ci)加樣時間(包括(kuo)標準品(pin)及(ji)所有(you)樣品(pin)) 將(jiang)控(kong)制在10分(fen)鐘內,如(ru)標(biao)本數量多(duo),推(tui)薦使用(yong)多(duo)道(dao)移液器加樣。

3.孵育(yu):為防止(zhi)樣品(pin)蒸(zheng)發,試(shi)驗(yan)時(shi)將(jiang)反(fan)應板(ban)放(fang)於鋪有(you)濕(shi)布(bu)的密(mi)閉盒內，酶(mei)標(biao)板(ban)加上(shang)蓋或(huo)覆膜(mo)，以避(bi)免(mian)液(ye)體蒸(zheng)發;洗板後應盡快進行下(xia)步操(cao)作,任(ren)何時侯(hou)都應(ying)避免(mian)酶(mei)標(biao)板(ban)處於幹燥狀(zhuang)態:同時(shi)應嚴(yan)格遵(zun)守給定的(de)孵育(yu)時間和溫度。

4.洗滌:洗滌過程中(zhong)反(fan)應孔(kong)中殘(can)留的(de)洗滌液(ye)應(ying)在(zai)濾紙(zhi)上(shang)充分拍幹，勿將(jiang)濾紙(zhi)直(zhi)接放入反(fan)應(ying)孔(kong)中吸(xi)水(shui)，同時要消(xiao)除(chu)板底(di)殘留的(de)液(ye)體和手指(zhi)印(yin)，避免(mian)影(ying)響最hou的酶(mei)標(biao)儀(yi)讀數。

常見問題(ti)解析(xi)：

1、試(shi)劑(ji)的(de)選(xuan)擇(ze)：選(xuan)擇(ze)優(you)良(liang)試(shi)劑(ji)大家都是知(zhi)道(dao)的，但(dan)是在檢(jian)測(ce)之(zhi)前還應(ying)該提(ti)前半個小時將試(shi)劑(ji)拿(na)到(dao)常(chang)溫下(xia)進行解凍(dong)。

2、加樣中可(ke)能(neng)遇到的(de)問題(ti)。

3、洗板時容易(yi)造成(cheng)誤(wu)差。

4、顯色(se)問題(ti)：使用了過期(qi)的(de)顯色(se)劑或(huo)者是顯色(se)劑用(yong)過後放置(zhi)時間太(tai)長(chang)，都(dou)有(you)可(ke)能(neng)造成(cheng)顯色(se)劑不(bu)顯色(se)。

5、終止(zhi)反(fan)應：在加終止(zhi)劑(ji)的時候由(you)於傾倒速(su)度快(kuai)，產生氣(qi)泡，造成(cheng)假(jia)陽(yang)性結果(guo)，所以(yi)在(zai)倒終止(zhi)劑(ji)的時候要(yao)緩(huan)慢倒。

6、讀板：讀(du)板(ban)的時(shi)候首先應該保(bao)證(zheng)板的(de)清潔幹凈(jing)。

常(chang)用(yong)方法及(ji)原理(li)如(ru)下(xia)：

1. 夾心(xin)法：

夾心法常用(yong)於檢測(ce)大分子抗原(yuan)，壹(yi)般(ban)的操(cao)作步(bu)驟為:

a. 將(jiang)具(ju)有(you)專壹(yi)性的抗(kang)ti固(gu)著(zhu)（coating）於塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)，完成(cheng)後洗去多(duo)余抗ti

b. 加入待(dai)測(ce)檢(jian)體，檢(jian)體中(zhong)若(ruo)含(han)有(you)待測(ce)的抗(kang)原，則其會與(yu)塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)的抗ti進(jin)行專壹(yi)性鍵結

c. 洗去多(duo)余待測(ce)檢體，加入另(ling)壹(yi)種(zhong)對抗(kang)原(yuan)專壹(yi)的(de)壹(yi)次(ci)抗ti，與(yu)待測(ce)抗原進行鍵結

d. 洗去多(duo)余未鍵結壹(yi)次(ci)抗ti，加入帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)二(er)次(ci)抗ti，與(yu)壹(yi)次(ci)抗ti鍵結

e. 洗去多(duo)余未鍵結二(er)次(ci)抗ti，加入酶(mei)底(di)物(wu)使酵(jiao)素(su)呈色(se)，以肉(rou)眼或(huo)儀(yi)器讀取(qu)呈色(se)結果(guo)

原(yuan)理：針對抗(kang)原(yuan)分子上(shang)2個不同(tong)抗(kang)原(yuan)決定(ding)簇的單(dan)克(ke)隆抗ti分(fen)別(bie)作為固(gu)相抗ti和酶(mei)標(biao)抗(kang)ti，將大分子抗原(yuan)分別(bie)制備(bei)固(gu)相抗原(yuan)和酶(mei)標(biao)抗(kang)原結(jie)合(he)物(wu)。

2. 間接法

間接法常(chang)用於檢測(ce)抗(kang)ti，壹(yi)般(ban)的操(cao)作步(bu)驟為：

a. 將(jiang)已(yi)知(zhi)的抗原(yuan)固(gu)著(zhu)於塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)，完成(cheng)後洗去多(duo)余的抗(kang)原。

b. 加入待(dai)測(ce)檢(jian)體，檢(jian)體中(zhong)若(ruo)含(han)有(you)待測(ce)的壹(yi)次(ci)抗ti，則其會與(yu)塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)的抗原(yuan)進(jin)行專壹(yi)性鍵結。

c. 洗去多(duo)余待測(ce)檢體，加入帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)二(er)次(ci)抗ti，與(yu)待測(ce)的壹(yi)次(ci)抗ti鍵結。

d. 洗去多(duo)余未鍵結二(er)次(ci)抗ti，加入酶(mei)底(di)物(wu)使酶(mei)呈色(se)，藉儀(yi)器（ELISA reader）測定塑(su)膠盤中的吸(xi)光值(zhi)（OD值），以評估有(you)色(se)終產物的(de)含量(liang)即(ji)可(ke)測(ce)量待測抗(kang)ti的(de)含(han)量。

原(yuan)理：利(li)用(yong)酶(mei)標(biao)記的抗(kang)抗(kang)ti以檢(jian)測已(yi)與(yu)固(gu)相結合(he)的受(shou)檢(jian)抗ti。

3. 競爭法(fa)

競(jing)爭法(fa)是壹(yi)種(zhong)較(jiao)少用(yong)到(dao)的(de)ELISA檢(jian)測機(ji)制，壹(yi)般(ban)用於檢測(ce)小分子抗原，其操(cao)作步(bu)驟為：

a. 將(jiang)具(ju)有(you)專壹(yi)性的抗(kang)ti固(gu)著(zhu)於塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)，完成(cheng)後洗去多(duo)余抗ti

b. 加入待(dai)測(ce)檢(jian)體，使(shi)檢體(ti)中的待測(ce)抗原(yuan)與(yu)塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)的抗ti進(jin)行專壹(yi)性鍵結

c. 加入帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)抗(kang)原，此(ci)抗原(yuan)也(ye)可(ke)與(yu)塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)的抗ti進(jin)行專壹(yi)性鍵結，由(you)於塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)固(gu)著(zhu)的(de)抗ti數量有(you)限，因(yin)此(ci)當(dang)檢(jian)體(ti)中(zhong)抗(kang)原的量越(yue)多(duo)，則帶有(you)酶(mei)的(de)抗(kang)原可(ke)鍵結的(de)固(gu)著(zhu)抗(kang)ti就(jiu)越(yue)少，亦(yi)即(ji)，兩(liang)種(zhong)抗原(yuan)皆(jie)競相與(yu)塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)抗ti鍵結，即(ji)所謂(wei)競(jing)爭法(fa)之(zhi)由(you)來(lai)。

d. 洗去檢體(ti)與(yu)帶有(you)酶(mei)的(de)抗(kang)原，加入酶(mei)底(di)物(wu)使酶(mei)呈色(se)，當(dang)檢(jian)體(ti)中(zhong)抗(kang)原量越多(duo)，代表塑(su)膠孔(kong)盤內留下(xia)之(zhi)帶(dai)有(you)酶(mei)的(de)抗(kang)原越(yue)少，顯色(se)也(ye)就(jiu)越(yue)淺。

e. 當(dang)需(xu)要(yao)偵(zhen)測(ce)無法獲得(de)兩(liang)種以上(shang)單壹(yi)性抗ti的(de)抗原(yuan)，或(huo)是不易(yi)得(de)到(dao)足夠(gou)的(de)純化(hua)抗ti以(yi)固(gu)著(zhu)於孔(kong)盤上(shang)時，壹(yi)般(ban)會考慮使用(yong)競(jing)爭法(fa)ELISA。

試(shi)劑(ji)和樣本的控(kong)制方法:

壹(yi)、試(shi)劑(ji)

1.試(shi)劑(ji)的(de)選(xuan)擇(ze):國家明確(que)要(yao)求(qiu)要采(cai)用(yong)批批檢(jian)定(ding)的(de)形式(shi)對ELISA試(shi)劑(ji)嚴(yan)格把(ba)關(guan),我司(si)嚴(yan)格按(an)照國家標準進行生產,已獲(huo)得(de)國家承認(ren)的“三(san)證(zheng)",每壹(yi)個產品(pin)都(dou)有(you)對應(ying)的(de)生產批號(hao),只(zhi)要客(ke)戶提(ti)前下(xia)單,我(wo)們就(jiu)能(neng)為您(nin)提(ti)供新批次(ci)的產品(pin),不(bu)必擔心(xin)會有(you)過期(qi)的(de)試(shi)劑(ji)。我(wo)司(si)的試(shi)劑(ji),值(zhi)得(de)您(nin)選(xuan)擇(ze)。

2.試(shi)劑(ji)的(de)準(zhun)備(bei):先將(jiang)試(shi)劑(ji)盒先從冰箱(xiang)中拿(na)出(chu)來(lai),在室(shi)溫(wen)下(xia)放置(zhi)20-30 min後,再進行測定(ding),使試(shi)劑(ji)盒在使(shi)用前與(yu)室溫(wen)平衡,這(zhe)樣做的目的(de)能使反(fan)應微(wei)孔(kong)內的溫(wen)度較(jiao)快地達(da)到所需(xu)的(de)溫度,以(yi)滿(man)足後面的測定需(xu)求(qiu)。

二、樣本

1.內源(yuan)性幹擾(rao)因(yin)素(su):包括(kuo)類(lei)因(yin)子、補(bu)體、高濃(nong)度的(de)非(fei)特(te)異免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋白(bai)、異嗜性抗體(ti)、某(mou)些(xie)自身(shen)抗體(ti)等(deng);

類(lei)因(yin)子的(de)控制方法:

①用F(ab)2替(ti)代完整(zheng)的IgG;

②標(biao)本用聯(lian)有(you)熱變性IgG的固(gu)相吸附(fu)劑(ji)處(chu)理(li);

③檢測抗原時(shi),可(ke)用(yong)2-巰ji乙(yi)醇加入到(dao)標(biao)本稀釋液中使(shi)RF降解;

補體(ti)的(de)控(kong)制方法:

①用EDTA稀釋標本;

②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活(huo);

2.外源(yuan)性幹擾(rao)因(yin)素(su):包括(kuo)標本溶血(xue)、細菌汙(wu)染、保(bao)存(cun)時間過長或(huo)凝固(gu)不全等(deng);

控(kong)制方法:采(cai)血(xue)時(shi)規(gui)範操(cao)作,采(cai)集(ji)的(de)血液勿用(yong)力(li)震(zhen)蕩(dang),以防溶血;收(shou)集(ji)標(biao)本時采(cai)用(yong)無(wu)菌試(shi)管(guan),經檢(jian)測(ce)後再低溫凍(dong)存;保(bao)存(cun)時間不(bu)宜(yi)過久,檢(jian)測(ce)時盡(jin)量采(cai)用(yong)新鮮標(biao)本;對於凝固(gu)不全的(de)血(xue)標(biao)本可(ke)適(shi)當(dang)加入抗(kang)凝劑,並(bing)放(fang)入37℃水(shui)中1 h,待充分凝固(gu)後再離(li)心分(fen)離(li)血清。

深圳瑞清生物信息(xi)科(ke)技有(you)限公(gong)司(si)的產品(pin)在(zai)相當(dang)寬(kuan)的(de)領(ling)域(yu)得(de)到(dao)廣泛(fan)的應(ying)用(yong)，長(chang)期(qi)和各(ge)大高校、研究(jiu)機構(gou)、工(gong)廠、企(qi)業等(deng)建(jian)立(li)了深厚的(de)合作關(guan)系，我(wo)們的(de)企(qi)業文化是為樹立(li)行業的地位(wei)而(er)不(bu)懈努(nu)力(li)，為科(ke)研(yan)事(shi)業貢獻綿薄(bo)之(zhi)力(li)！公(gong)司(si)的核心(xin)價值是誠信為本，為客(ke)戶提(ti)供(gong)高品(pin)質(zhi)的(de)產品(pin)、為員工(gong)提供(gong)發展(zhan)平(ping)臺(tai)、為社(she)會(hui)創(chuang)造更多(duo)價值。

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