小鼠熱(re)休克因(yin)子(zi)1(HSF1)ELISA試(shi)劑盒(he)

檢(jian)測原理(li)

試(shi)劑盒(he)采(cai)用雙抗原壹(yi)-步夾心法(fa)酶(mei)聯免(mian)疫(yi)吸附試(shi)驗(yan)(ELISA) 。往預(yu)先(xian)包(bao)被病毒性腹(fu)瀉(xie)病毒(du)抗ti的包(bao)被微孔(kong)中(zhong)，依次加入(ru)標(biao)本、HRP標(biao)記(ji)的檢(jian)測抗原，經過(guo)溫育(yu)並徹(che)di洗滌(di)。用(yong)底物(wu)TMB顯(xian)色，TMB在(zai)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶的催化(hua)下轉(zhuan)化成(cheng)藍色，並在(zai)suan的作用下轉(zhuan)化成(cheng)最終的黃(huang)色。用酶(mei)標(biao)儀在(zai)450NM波長下測定吸光(guang)度(du)(OD值) ，與(yu)CUTOFF值相比(bi)較(jiao)，從(cong)而(er)判定標(biao)本中(zhong)豬病毒性(xing)腹(fu)瀉(xie)病毒(du)(BVDV) 的存在(zai)與(yu)否。

樣品(pin)收集(ji)、處理及保存方法(fa)

1.血清:使(shi)用不含(han)熱(re)原和內毒(du)素的試(shi)管，操(cao)作過(guo)程中(zhong)避(bi)免(mian)任(ren)何細(xi)胞刺激(ji)，收集(ji)血液(ye)後，3000轉(zhuan)離心(xin)10分鐘將血(xue)清(qing)和紅(hong)細(xi)胞迅速(su)小心地(di)分離。

2.血漿: EDTA、檸檬suan鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuan)離心(xin)30分鐘取(qu)上清。

3.細(xi)胞上清液(ye): 3000轉(zhuan)離心(xin)10分鐘去除(chu)顆(ke)粒(li)和聚(ju)合(he)物(wu)。

4.組織勻(yun)漿:將組織加入(ru)適量(liang)生理鹽(yan)水搗(dao)碎。3000轉(zhuan) 離心(xin)10分鐘取(qu)上清。

5.保存:如果樣本收集(ji)後不及(ji)時(shi)檢(jian)測，請按壹次用量(liang)分裝，凍(dong)存於-20°C， 避(bi)免(mian)反(fan)

復凍融，在(zai)室(shi)溫下解(jie)凍並確(que)保樣品(pin)均(jun)勻(yun)地(di)充(chong)分解(jie)凍。

自備(bei)物(wu)品(pin)

1.酶標(biao)儀(450NM)

2.高精度(du)加樣器及(ji)槍(qiang)頭(tou): 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL

3.37℃恒(heng)溫箱(xiang)

操(cao)作註意(yi)事項

1.試(shi)劑盒(he)保存在(zai)2-8°C，使(shi)用前(qian)室溫(wen)平(ping)衡20分鐘。從(cong)冰(bing)箱取(qu)出(chu)的濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)會有結晶，這屬(shu)於正常現象，水浴加熱使(shi)結晶完quan溶解(jie)後再(zai)使(shi)用。

2.實(shi)驗(yan)中(zhong)不用(yong)的板(ban)條(tiao)應立(li)即(ji)放(fang)回(hui)自封袋中(zhong)，密封(低溫幹(gan)燥(zao))保存。

3.預(yu)處理後的樣本請按照操(cao)作步驟用(yong)樣ben稀釋ye適當(dang)稀釋以(yi)達(da)到試(shi)劑盒(he)的的最jia檢(jian)測效果。.

4.嚴格按照說(shuo)明書(shu)中(zhong)標(biao)明的時(shi)間(jian)、加液(ye)量及順序進(jin)行(xing)溫育操(cao)作。

5.所有液(ye)體組分使(shi)用前(qian)充(chong)分搖(yao)勻(yun)。

常用方法(fa)：

1. 夾心法(fa)：

夾心法(fa)常用於檢(jian)測大分子抗原，壹般(ban)的操(cao)作步驟為(wei):

a. 將具有專(zhuan)壹(yi)性(xing)的抗ti固(gu)著（coating）於塑膠孔(kong)盤上，完成(cheng)後洗去多余(yu)抗ti

b. 加入(ru)待(dai)測檢(jian)體(ti)，檢(jian)體(ti)中(zhong)若(ruo)含(han)有待(dai)測的抗原，則(ze)其會(hui)與(yu)塑膠孔(kong)盤上的抗ti進(jin)行(xing)專(zhuan)壹(yi)性(xing)鍵(jian)結

c. 洗去多余(yu)待(dai)測檢(jian)體(ti)，加入(ru)另(ling)壹種對抗原專(zhuan)壹(yi)的壹(yi)次抗ti，與(yu)待(dai)測抗原進(jin)行(xing)鍵(jian)結

d. 洗去多余(yu)未(wei)鍵(jian)結壹次抗ti，加入(ru)帶(dai)有酶的二次抗ti，與(yu)壹次抗ti鍵(jian)結

e. 洗去多余(yu)未(wei)鍵(jian)結二次抗ti，加入(ru)酶(mei)底物(wu)使(shi)酵(jiao)素呈(cheng)色，以(yi)肉(rou)眼(yan)或儀器讀(du)取(qu)呈(cheng)色結果(guo)

原理(li)：針(zhen)對抗原分子上2個不同(tong)抗原決(jue)定簇的單(dan)克隆(long)抗ti分別(bie)作為(wei)固(gu)相抗ti和酶標(biao)抗ti，將大分子抗原分別(bie)制備(bei)固(gu)相抗原和酶標(biao)抗原結(jie)合(he)物(wu)。

2. 間接(jie)法(fa)

間接(jie)法(fa)常用於檢(jian)測抗ti，壹般(ban)的操(cao)作步驟為(wei)：

a. 將已知的抗原固(gu)著於塑膠孔(kong)盤上，完成(cheng)後洗去多余(yu)的抗原。

b. 加入(ru)待(dai)測檢(jian)體(ti)，檢(jian)體(ti)中(zhong)若(ruo)含(han)有待(dai)測的壹(yi)次抗ti，則(ze)其會(hui)與(yu)塑膠孔(kong)盤上的抗原進(jin)行(xing)專(zhuan)壹(yi)性(xing)鍵(jian)結。

c. 洗去多余(yu)待(dai)測檢(jian)體(ti)，加入(ru)帶(dai)有酶的二次抗ti，與(yu)待(dai)測的壹(yi)次抗ti鍵(jian)結。

d. 洗去多余(yu)未(wei)鍵(jian)結二次抗ti，加入(ru)酶(mei)底物(wu)使(shi)酶呈(cheng)色，藉儀器（ELISA reader）測定塑膠盤(pan)中(zhong)的吸(xi)光(guang)值（OD值），以(yi)評(ping)估(gu)有色終產(chan)物(wu)的含(han)量(liang)即(ji)可(ke)測量待(dai)測抗ti的含(han)量(liang)。

原理(li)：利(li)用(yong)酶標(biao)記(ji)的抗抗ti以(yi)檢(jian)測已與(yu)固(gu)相結(jie)合(he)的受檢(jian)抗ti。

3. 競爭法(fa)

競爭法(fa)是(shi)壹種較(jiao)少(shao)用到(dao)的ELISA檢(jian)測機(ji)制，壹般(ban)用於檢(jian)測小分子抗原，其操(cao)作步驟為(wei)：

a. 將具有專(zhuan)壹(yi)性(xing)的抗ti固(gu)著於塑膠孔(kong)盤上，完成(cheng)後洗去多余(yu)抗ti

b. 加入(ru)待(dai)測檢(jian)體(ti)，使(shi)檢(jian)體(ti)中(zhong)的待(dai)測抗原與(yu)塑膠孔(kong)盤上的抗ti進(jin)行(xing)專(zhuan)壹(yi)性(xing)鍵(jian)結

c. 加入(ru)帶(dai)有酶的抗原，此抗原也(ye)可(ke)與(yu)塑膠孔(kong)盤上的抗ti進(jin)行(xing)專(zhuan)壹(yi)性(xing)鍵(jian)結，由(you)於塑膠孔(kong)盤上固(gu)著的抗ti數量有限，因(yin)此當檢(jian)體(ti)中(zhong)抗原的量(liang)越(yue)多，則(ze)帶(dai)有酶的抗原可(ke)鍵(jian)結的固(gu)著抗ti就越(yue)少(shao)，亦(yi)即(ji)，兩(liang)種抗原皆(jie)競相與(yu)塑膠孔(kong)盤上抗ti鍵(jian)結，即(ji)所謂(wei)競爭法(fa)之(zhi)由(you)來(lai)。

d. 洗去檢(jian)體(ti)與(yu)帶有酶的抗原，加入(ru)酶(mei)底物(wu)使(shi)酶呈(cheng)色，當檢(jian)體(ti)中(zhong)抗原量(liang)越(yue)多，代(dai)表塑膠孔(kong)盤內留(liu)下之帶(dai)有酶的抗原越(yue)少(shao)，顯(xian)色也(ye)就越(yue)淺。

e. 當需(xu)要(yao)偵測無法(fa)獲(huo)得兩(liang)種以(yi)上單(dan)壹性(xing)抗ti的抗原，或是(shi)不易得到足(zu)夠(gou)的純(chun)化(hua)抗ti以(yi)固(gu)著於孔(kong)盤上時，壹(yi)般(ban)會考(kao)慮(lv)使(shi)用競(jing)爭法(fa)ELISA。

免(mian)責(ze)聲明：

1. 試(shi)劑盒(he)僅供(gong)研(yan)究使(shi)用，不得用於臨床實(shi)驗(yan)或人(ren)體實(shi)驗(yan)，否則(ze)所(suo)產(chan)生的壹(yi)切(qie)後果(guo)，由(you)實(shi)驗(yan)者(zhe)承擔(dan)，本公司(si)概不負(fu)責(ze)。

2. 嚴格按照說(shuo)明書(shu)操(cao)作，實(shi)驗(yan)者(zhe)違反(fan)說(shuo)明書(shu)操(cao)作，後果由(you)實(shi)驗(yan)者(zhe)承擔(dan)。

公司(si)其他產(chan)品(pin)：

人β-神經生長因(yin)子(zi)(β-NGF)elisa試(shi)劑盒(he)

人鈣聯接(jie)蛋白(CLGN)elisa試(shi)劑盒(he)

人基質蛋白Del-1(Del-1)elisa試(shi)劑盒(he)

人轉(zhuan)錄(lu)因子(zi)SOX5(SOX5)elisa試(shi)劑盒(he)

人抑(yi)制素β-B(Inhbb)elisa試(shi)劑盒(he)

人6-磷(lin)酸(suan)葡(pu)萄糖脫氫酶(mei)(6PGD)elisa試(shi)劑盒(he)

人鈣粘連蛋白(H-Cad)elisa試(shi)劑盒(he)

人鎂(mei)離(li)子轉(zhuan)運蛋白1(MAGT1)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠抗紅(hong)細(xi)胞抗體(RBC)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠9型腺相關病(bing)毒(du)(AAV9)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠硒(xi)蛋白P(Se-P)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠B-細(xi)胞激活(huo)因子受體(ti)(BAFFR)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠血(xue)清反應因子(zi)(SRF)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠視(shi)紫(zi)質(RHO)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠乳(ru)腺(xian)癌標(biao)誌物(wu)-CA153(CA153)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠克(ke)拉(la)拉(la)細(xi)胞蛋白(CC16)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠支(zhi)鏈氨基酸(suan)轉(zhuan)氨酶(BCAT)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠支(zhi)鏈α-酮酸脫氨酶(BCKD)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠蛋氨酸腺(xian)苷(gan)轉(zhuan)移酶(mei)(MAT)elisa試(shi)劑盒(he)