小(xiao)鼠ELISA（酶聯(lian)免疫(yi)吸(xi)附(fu)測定(ding)）試劑(ji)盒是(shi)壹種用於檢測小鼠血(xue)清(qing)、細胞培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)液(ye)等(deng)樣本(ben)中(zhong)特定蛋(dan)白質或生(sheng)物(wu)分子(zi)濃度(du)的常(chang)用工(gong)具(ju)。其(qi)操(cao)作(zuo)簡便(bian)、靈敏度高，廣(guang)泛(fan)應(ying)用於生(sheng)物(wu)醫學(xue)研究和(he)臨床(chuang)檢測。以(yi)下是(shi)關於(yu)小(xiao)鼠ELISA試劑盒(he)的實驗操(cao)作(zuo)與(yu)數據(ju)分析的詳細指(zhi)南。
壹、實驗操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)
（壹）實驗準備
試劑(ji)盒(he)平(ping)衡(heng)：在實(shi)驗開始(shi)前30分鐘，將試(shi)劑(ji)盒(he)從(cong)冰(bing)箱中(zhong)取出，恢復至(zhi)室溫。
試(shi)劑(ji)配(pei)制(zhi)：
標(biao)準品：按照說明書要求(qiu)，將(jiang)凍(dong)幹(gan)標(biao)準品溶解(jie)並稀釋至所(suo)需(xu)濃度梯度(du)。
洗滌(di)液(ye)：通(tong)常(chang)使用蒸餾(liu)水(shui)按壹定比例(li)稀釋。
檢測抗體(ti)和(he)酶結(jie)合物(wu)：用稀釋液按(an)指(zhi)定(ding)比例稀釋。
（二）加(jia)樣與(yu)孵育(yu)
加樣：在酶標(biao)板(ban)中(zhong)加入100μL標(biao)準品或樣(yang)本(ben)，標(biao)準品需做復孔(kong)。加(jia)樣(yang)時(shi)避免(mian)氣(qi)泡，確保(bao)樣(yang)本(ben)均(jun)勻(yun)分(fen)布。
孵育(yu)：將酶標(biao)板(ban)置於(yu)37°C孵箱中(zhong)孵育(yu)90分鐘。
洗滌(di)：棄(qi)去(qu)孔(kong)內(nei)液(ye)體(ti)，加入350μL洗滌(di)液(ye)，浸泡(pao)1-2分鐘(zhong)，甩幹(gan)，重復4次(ci)。
（三(san)）檢測抗體(ti)與酶結(jie)合物(wu)孵育(yu)
加檢測抗體(ti)：加入100μL檢測抗體(ti)工(gong)作(zuo)液(ye)，37°C孵育(yu)60分鐘。
洗滌(di)：重(zhong)復上(shang)述(shu)洗滌(di)步(bu)驟(zhou)。
加(jia)酶結(jie)合物(wu)：加入100μL酶結(jie)合物(wu)工(gong)作(zuo)液(ye)，37°C孵育(yu)30分鐘。
洗滌(di)：重(zhong)復洗滌(di)步(bu)驟(zhou)。
（四）顯色(se)與(yu)終(zhong)止
顯色(se)：加(jia)入90μL顯色(se)劑(ji)，37°C避(bi)光(guang)顯色(se)15-20分(fen)鐘(zhong)。
終止：加(jia)入50μL終止(zhi)液，終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)。
讀數：在(zai)酶標(biao)儀450nm波長下測量(liang)吸(xi)光(guang)度值（OD），5分(fen)鐘內(nei)完(wan)成讀數。
二(er)、數據(ju)分析
（壹）標(biao)準曲線(xian)繪(hui)制(zhi)
計(ji)算(suan)平(ping)均OD值：計(ji)算(suan)每(mei)個標(biao)準品和(he)樣本(ben)的平(ping)均OD值，減(jian)去零孔(kong)的OD值。
繪(hui)制(zhi)標(biao)準曲線(xian)：以(yi)標(biao)準品濃度(du)為橫坐標(biao)，OD值為縱(zong)坐(zuo)標(biao)，繪制(zhi)標(biao)準曲線(xian)。
（二(er)）樣(yang)本(ben)濃(nong)度(du)計(ji)算(suan)
查(zha)找(zhao)濃度：根據樣(yang)本(ben)的OD值，在(zai)標(biao)準曲線(xian)上(shang)查(zha)找(zhao)對(dui)應(ying)的濃度(du)。
稀釋倍(bei)數校正：如(ru)果(guo)樣本(ben)經(jing)過(guo)稀(xi)釋，計(ji)算(suan)濃(nong)度(du)時需乘以(yi)稀(xi)釋倍(bei)數。
（三(san)）註意(yi)事(shi)項
結果(guo)異(yi)常(chang)處理(li)：如果(guo)樣本(ben)OD值高於標(biao)準曲線(xian)上(shang)限(xian)，需(xu)重(zhong)新(xin)稀釋樣本(ben)後(hou)檢測。
重復性(xing)檢查：標(biao)準品和(he)樣本(ben)的復孔(kong)OD值應(ying)具(ju)有(you)良(liang)好的重復性(xing)，否則(ze)需(xu)重(zhong)新(xin)實驗。
三、實驗註意(yi)事(shi)項
試劑(ji)保(bao)存：未(wei)使用的板(ban)條(tiao)應立(li)即放回包裝(zhuang)袋中(zhong)，密封(feng)保(bao)存。
避(bi)免(mian)汙染：使用壹次性吸(xi)頭，避免(mian)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染。
操(cao)作(zuo)規(gui)範：嚴(yan)格按照說明書操(cao)作(zuo)，確保(bao)試(shi)劑充分混勻(yun)。
環(huan)境(jing)控(kong)制(zhi)：實驗應在室溫（25-28℃）下進(jin)行。
通(tong)過(guo)以(yi)上(shang)操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)和(he)數據(ju)分析方(fang)法，可以(yi)確保(bao)小(xiao)鼠ELISA試劑盒(he)的實驗結果(guo)準確可靠(kao)。實驗過(guo)程(cheng)中(zhong)嚴格遵(zun)守操(cao)作(zuo)規(gui)範和(he)註意(yi)事(shi)項，能夠(gou)有(you)效(xiao)提高實驗的成功(gong)率和(he)重復性(xing)。
關鍵(jian)詞(ci)：
您的位(wei)置：首(shou)頁(ye) - 新(xin)聞(wen)中(zhong)心(xin) - 小鼠ELISA試劑盒(he)：實(shi)驗操(cao)作(zuo)與(yu)數據(ju)分析指(zhi)南 
更(geng)新(xin)時間：2025-07-14 
瀏覽次(ci)數：275
QQ
廣(guang)東省(sheng)深(shen)圳市福(fu)田(tian)區(qu)福田(tian)街(jie)道崗(gang)廈社區(qu)福華三(san)路(lu)88號財(cai)富大廈(sha)39H-Z25
在(zai)線(xian)咨(zi)詢(xun)
返(fan)回頂(ding)部(bu)