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技術文(wen)章(zhang)/ article
更新(xin)時間(jian):2024-11-11
瀏(liu)覽(lan)次數:1170ELISA(酶聯(lian)免(mian)疫(yi)吸附試(shi)驗(yan))是壹(yi)種(zhong)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)和(he)定(ding)量(liang)特異性蛋白質(zhi)、肽或(huo)抗(kang)原(yuan)的(de)免(mian)疫(yi)技(ji)術。實(shi)驗(yan)中可(ke)能(neng)會(hui)出(chu)現誤差(cha),常(chang)見(jian)的(de)來(lai)源包(bao)括(kuo):
1. **樣(yang)本處(chu)理**:
- 樣(yang)本收(shou)集、保(bao)存或(huo)處(chu)理不(bu)當,如未能(neng)及時冷凍或(huo)錯誤地處(chu)理樣(yang)本。
- 樣(yang)本在(zai)處(chu)理過程中發(fa)生交(jiao)叉(cha)汙染(ran)。
2. **試劑(ji)和材料**:
- 試劑(ji)過期或(huo)保(bao)存不當,導致(zhi)活性降低。
- 試劑(ji)批次(ci)間(jian)的(de)差(cha)異。
- 使(shi)用(yong)了不(bu)適當的(de)洗(xi)滌(di)緩(huan)沖(chong)液或(huo)濃度。
3. **操(cao)作(zuo)技術**:
- 加(jia)樣(yang)不準(zhun)確,如液體的(de)體(ti)積、位(wei)置不準(zhun)確。
- 洗(xi)板不(bu)充(chong)分(fen)或(huo)過度洗滌(di),導致(zhi)信號丟(diu)失(shi)或(huo)背(bei)景(jing)噪音(yin)增(zeng)加。
- 孵育(yu)時間(jian)不(bu)足或(huo)過長。

4. **儀器設備**:
- 酶(mei)標儀的(de)校(xiao)準(zhun)不準(zhun)確或(huo)功能(neng)異常(chang)。
- 孵育(yu)器溫(wen)度(du)不(bu)穩定(ding),影(ying)響(xiang)反(fan)應效率(lv)。
5. **實(shi)驗(yan)設計**:
- 標準(zhun)曲線(xian)的(de)制作(zuo)不準(zhun)確或(huo)線(xian)性範圍選擇(ze)不(bu)當(dang)。
- 缺(que)乏(fa)適(shi)當的(de)質(zhi)控(kong)措(cuo)施,如沒有(you)設置陰性對照和(he)陽(yang)性對照。
6. **數據分(fen)析**:
- 數據讀(du)取(qu)和解釋錯誤。
- 統計(ji)分(fen)析方(fang)法(fa)不適(shi)當。
7. **外(wai)部(bu)因(yin)素**:
- 實(shi)驗(yan)室(shi)環(huan)境條(tiao)件(jian),如溫(wen)度(du)、濕(shi)度(du)變(bian)化。
- 實(shi)驗(yan)人(ren)員(yuan)的(de)操(cao)作(zuo)技能(neng)差(cha)異。
為(wei)了(le)減(jian)少(shao)這(zhe)些誤(wu)差(cha),需(xu)要嚴格遵循(xun)實(shi)驗(yan)操(cao)作(zuo)規程(cheng),定(ding)期校(xiao)準(zhun)儀器,使(shi)用(yong)高質(zhi)量(liang)的(de)控(kong)制血(xue)清和試劑(ji),以及對實(shi)驗(yan)人(ren)員(yuan)進(jin)行專(zhuan)業(ye)培(pei)訓。此(ci)外(wai),通過重復(fu)實(shi)驗(yan)和質(zhi)控(kong)措(cuo)施來(lai)驗(yan)證結(jie)果(guo)的(de)可(ke)靠性也是非常(chang)重要的(de)。
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