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技(ji)術(shu)文(wen)章(zhang)/ article
更新(xin)時間:2023-09-11
瀏覽次(ci)數(shu):1382 ELISA試劑(ji)盒(ELISA kit)是(shi)壹(yi)種常用的(de)實(shi)驗室技術(shu),被(bei)廣(guang)泛(fan)應(ying)用(yong)於生命科學研究和臨床診(zhen)斷(duan)。ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)試(shi)劑(ji)盒通(tong)過特異(yi)性抗原(yuan)和(he)抗體反應(ying)進(jin)行(xing)檢測(ce)並定量目標物(wu)質的(de)濃度。本文(wen)將從四(si)個方面(mian)詳細闡(chan)述(shu)ELISA試劑(ji)盒的(de)原(yuan)理(li)。
壹(yi)、抗原(yuan)抗體反應(ying)的(de)基(ji)本原(yuan)理(li)
在(zai)ELISA試(shi)劑(ji)盒中,抗(kang)原(yuan)抗體反應(ying)是(shi)核(he)心步(bu)驟(zhou)。首(shou)先(xian),將存(cun)在(zai)於樣品中的(de)目標分子(抗(kang)原)固(gu)定於試驗板的(de)孔(kong)洞內,並(bing)與試(shi)驗板表(biao)面(mian)的(de)底物結合。隨(sui)後(hou),經過試劑(ji)盒中的(de)特(te)異(yi)性抗體(ti)處(chu)理(li)後,如(ru)果(guo)目標分子存(cun)在(zai)於樣品中,則它(ta)會(hui)與該(gai)抗(kang)體結合(he)。最後,通(tong)過加入(ru)底物,將與目標分子結(jie)合的(de)底物催化酶產生的(de)發(fa)色(se)反應(ying)進(jin)行(xing)檢測(ce)。
二、ELISA試劑(ji)盒的(de)工作原理(li)
ELISA試劑(ji)盒通(tong)常由多個(ge)部分組成(cheng),包括試(shi)驗板、抗體和(he)底物。試驗板通(tong)常是由塑料(liao)制成(cheng)的(de)微孔(kong)板(ban),上(shang)面(mian)有(you)孔(kong)洞用於固定抗原(yuan)。抗(kang)體是(shi)壹(yi)種識(shi)別與目標分子特(te)異(yi)性結合(he)的(de)蛋(dan)白質,通(tong)過特殊的(de)反應(ying)條(tiao)件(jian)將其(qi)與目標分子結(jie)合。底物是壹(yi)種能(neng)產生可(ke)見(jian)信(xin)號的(de)化學物(wu)質,常見(jian)的(de)是(shi)熒光(guang)素等。
三(san)、ELISA試(shi)劑(ji)盒的(de)操(cao)作步(bu)驟(zhou)
1. 固(gu)定抗原(yuan):將抗原(yuan)溶(rong)液加入(ru)試驗板的(de)孔(kong)洞中,在(zai)恒(heng)定的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)孵(fu)育壹(yi)定時間,使抗(kang)原(yuan)與孔(kong)洞表(biao)面(mian)結合(he)。
2. 抗原(yuan)結合:將待測樣品加入(ru)孔(kong)洞中,在(zai)壹(yi)定條件(jian)下(xia)孵(fu)育使待測樣品中的(de)抗(kang)原與固(gu)定在(zai)孔(kong)洞表(biao)面(mian)的(de)抗(kang)體結合。
3. 洗(xi)滌(di):通(tong)過洗滌(di)溶液(ye),去(qu)除(chu)未結(jie)合(he)的(de)物(wu)質,減(jian)少(shao)背(bei)景(jing)信(xin)號。
4. 檢(jian)測(ce)抗體:加入(ru)特異(yi)性檢測(ce)抗(kang)體,使其(qi)與抗(kang)原(yuan)結合。
5. 洗(xi)滌(di):再次洗(xi)滌(di),除去(qu)未結(jie)合(he)的(de)檢(jian)測抗體。
6. 底物反應(ying):加入(ru)底物溶液,使與檢(jian)測(ce)抗體結(jie)合(he)的(de)底物催化酶發(fa)生酶促(cu)反應(ying),產生可(ke)見(jian)信(xin)號。
7. 讀(du)取結(jie)果(guo):使用(yong)光(guang)譜儀或其(qi)他測量(liang)儀器(qi)讀(du)取底物反應(ying)後(hou)的(de)信(xin)號強度,通(tong)過標準(zhun)曲線(xian)來計算(suan)待測樣品中目標物(wu)質的(de)濃度。
四(si)、ELISA試劑(ji)盒的(de)優(you)勢(shi)和應(ying)用(yong)領域
1. 高(gao)度特異(yi)性:ELISA試劑(ji)盒利(li)用(yong)特異(yi)性抗原(yuan)抗(kang)體的(de)結(jie)合反應(ying),使其(qi)具有(you)較(jiao)高(gao)的(de)特(te)異(yi)性。
2. 高(gao)靈(ling)敏度:ELISA試劑(ji)盒能(neng)夠檢測(ce)低濃度的(de)物(wu)質,壹(yi)般靈(ling)敏度為ng/mL或(huo)pg/mL級(ji)別。
3. 廣(guang)泛(fan)的(de)應(ying)用(yong)領域:ELISA試(shi)劑(ji)盒廣(guang)泛(fan)應(ying)用(yong)於醫(yi)學、生物化學、藥(yao)學、環(huan)境(jing)科學等多個領域,用(yong)於研究和臨床診(zhen)斷(duan)。
總結:
ELISA試(shi)劑(ji)盒作為壹(yi)種重(zhong)要(yao)的(de)實(shi)驗室技術(shu),通(tong)過特異(yi)性抗原(yuan)抗(kang)體反應(ying)來(lai)檢測和(he)定量目標物(wu)質的(de)濃度。它的(de)工作原理(li)清(qing)晰,操(cao)作簡便(bian),並(bing)具有(you)高(gao)度特異(yi)性和靈(ling)敏度。ELISA試劑(ji)盒在(zai)生命科學研究和臨床診(zhen)斷(duan)中有(you)著廣(guang)泛(fan)的(de)應(ying)用(yong)。
深圳瑞(rui)清(qing)生物擁(yong)有(you)壹(yi)批經驗豐富(fu)的(de)技(ji)術工程師(shi),經過多年(nian)積(ji)累,試(shi)劑(ji)盒現(xian)已(yi)涵蓋種屬(shu)甚(shen)多(duo),上(shang)千余(yu)種指(zhi)標,有(you)快(kuai)速、簡單(dan)、準(zhun)確的(de)特(te)點,迎合了廣(guang)大(da)高(gao)校和科研人員(yuan)的(de)需(xu)求,極大(da)的(de)提(ti)高(gao)了科研人員(yuan)的(de)工作效率(lv),成(cheng)熟(shu)穩(wen)定的(de)質量(liang),贏(ying)得(de)了(le)眾多科研機構的(de)認可(ke),完(wan)善(shan)的(de)庫(ku)存(cun)及供(gong)應(ying)體(ti)系(xi)以(yi)及高(gao)效穩(wen)定的(de)技(ji)術指(zhi)導,保證(zheng)產品均(jun)能(neng)現(xian)貨供(gong)應(ying)。期(qi)待您的(de)來(lai)電(dian)。
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