ELISA試(shi)劑盒技術(shu)

ELISA原(yuan)理

ELISA利(li)用(yong)抗(kang)原(yuan)抗(kang)體之(zhi)間專(zhuan)壹性結合(he)之(zhi)特性，對標(biao)本進行(xing)檢(jian)測(ce)；由(you)於(yu)結合(he)與(yu)固體承(cheng)載物(wu)（壹般為(wei)塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤）上(shang)之抗(kang)原(yuan)或(huo)抗(kang)體仍可具(ju)有免疫活性，因此(ci)設(she)計其(qi)結(jie)合(he)機制(zhi)後(hou)，配(pei)合(he)酵(jiao)素顯色反(fan)應(ying)，即(ji)可顯示特(te)定抗(kang)原(yuan)或(huo)抗(kang)體是(shi)否(fou)存(cun)在，並可利用(yong)顯色之(zhi)深(shen)淺進行(xing)定量分(fen)析。根據待(dai)測樣(yang)品與結合(he)機制(zhi)的(de)不(bu)同(tong)，ELISA可設計(ji)出各種(zhong)不(bu)同(tong)類型(xing)的(de)檢(jian)測(ce)方(fang)式，主要(yao)以"三(san)明(ming)治(zhi)法(fa)"(sandwich)、"間接法(fa)"(indirect)、以及"競爭(zheng)法(fa)"(Competitive)三(san)種(zhong)為(wei)主，以下(xia) 為(wei)各種(zhong)方(fang)法(fa)之介(jie)紹(shao)。

ELISA分(fen)類

見(jian)ELISA的雙(shuang)抗(kang)夾(jia)心法(fa)原(yuan)理；

ELISA的(de)雙(shuang)抗(kang)夾(jia)心法(fa)，又稱(cheng)"三(san)明(ming)治(zhi)法(fa)"。

三(san)明(ming)治(zhi)法(fa)常用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)大分(fen)子抗(kang)原(yuan)，壹般之(zhi)操(cao)作(zuo)步(bu)驟為(wei)：

將(jiang)具(ju)有專(zhuan)壹性之抗(kang)體固(gu)著(zhe)(coating)於(yu)塑(su)料(liao)孔(kong)盤上(shang)，完成(cheng)後(hou)洗去(qu)多餘抗(kang)體；

加(jia)入(ru)待(dai)測標(biao)本，標(biao)本中(zhong)若(ruo)含(han)有待(dai)測之(zhi)抗(kang)原(yuan)，則其(qi)會與塑(su)料(liao)孔(kong)盤上(shang)的抗(kang)體進行(xing)專(zhuan)壹性結合(he)；

洗去(qu)多餘待(dai)測標(biao)本，加(jia)入(ru)標記(ji)有酵素之二次抗(kang)體，與(yu)抗(kang)原(yuan)結合(he)；

洗去(qu)多餘未結合(he)的(de)二次抗(kang)體，加(jia)入(ru)酵素(su)受(shou)體使(shi)呈(cheng)色，以(yi)肉眼(yan)或(huo)儀器(qi)讀取(qu)顯色結(jie)果。

三(san)明(ming)治(zhi)法(fa)分(fen)別以兩(liang)種(zhong)抗(kang)體對標(biao)本中(zhong)的抗(kang)原(yuan)進行(xing)兩次專(zhuan)壹性辨(bian)認(ren)，因(yin)此(ci)專(zhuan)壹性相(xiang)當高(gao)，但此(ci)待(dai)測抗(kang)原(yuan)必須(xu)是多價(jia)抗(kang)原(yuan)，如此才可獲得(de)兩(liang)種(zhong)以(yi)上的專(zhuan)壹性抗(kang)體，以(yi)分(fen)別進行(xing)夾心；而(er)且(qie)此(ci)法(fa)需要(yao)足夠的(de)表位空間以進行(xing)抗(kang)原(yuan)抗(kang)體的(de)夾(jia)心，所(suo)以並不(bu)適用於(yu)半(ban)抗(kang)原(yuan)或(huo)小分(fen)子抗(kang)原(yuan)等(deng)分(fen)子量較小之標的(de)。

ELISA雙(shuang)抗(kang)夾(jia)心法(fa)的衍(yan)生(sheng)方(fang)法(fa)如ABC法(fa)：ELISA的生(sheng)物(wu)素 -親和(he)素(su)系(xi)統，該(gai)產(chan)品系列(lie)是檢(jian)測(ce)方(fang)法(fa)上的(de)重要(yao)革(ge)命(ming)。生(sheng)物(wu)素/親和(he)素(su)系(xi)統用於(yu)ELISA壹般有三(san)種(zhong)形(xing)式，即(ji)橋聯法(fa)（BAB）、標記(ji)法(fa) （BA）和(he)ABC法(fa)，不(bu)少(shao)學者用(yong)之檢(jian)測(ce)了不(bu)同(tong)的抗(kang)原(yuan)—抗(kang)體系(xi)統(tong)均(jun)取(qu)得了較好的結果(guo)，其(qi)中(zhong)以BA法(fa)和(he)ABC法(fa)應用(yong)較多，敏感(gan)性壹般比常規ELISA法(fa)高 4～80倍(bei)。

LISA的(de)間接法(fa)：

間接法(fa)常用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)抗(kang)體，壹般之(zhi)操(cao)作(zuo)步(bu)驟為(wei)：

將(jiang)已(yi)知之(zhi)抗(kang)原(yuan)固著於(yu)塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上(shang)，完成(cheng)後(hou)洗去(qu)多餘之抗(kang)原(yuan)；

加(jia)入(ru)待(dai)測標(biao)本，標(biao)本中(zhong)若(ruo)含(han)有待(dai)測之(zhi)壹次抗(kang)體，則其(qi)會與塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上(shang)的抗(kang)原(yuan)進行(xing)專(zhuan)壹性結合(he)；

洗去(qu)多餘待(dai)測標(biao)本，加(jia)入(ru)帶(dai)有酵素之二次抗(kang)體，與(yu)待(dai)測之(zhi)壹次抗(kang)體結(jie)合(he)；

洗去(qu)多餘未結合(he)的(de)二次抗(kang)體，加(jia)入(ru)酵素(su)受(shou)體使(shi)酵(jiao)素顯色，以(yi)肉眼(yan)或(huo)儀器(qi)讀取(qu)顯色結(jie)果。

ELISA的(de)競爭(zheng)法(fa)原(yuan)理；

競爭(zheng)法(fa)是壹種(zhong)較少(shao)用到(dao)的ELISA檢(jian)測(ce)機制(zhi)，壹般用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)小分(fen)子抗(kang)原(yuan)，其操作(zuo)步(bu)驟為(wei)：

將(jiang)具(ju)有專(zhuan)壹性之抗(kang)體固(gu)著(zhe)於(yu)塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上(shang)，完成(cheng)後(hou)洗去(qu)多餘抗(kang)體；

加(jia)入(ru)待(dai)測標(biao)本，使(shi)標本中(zhong)的待(dai)測抗(kang)原(yuan)與塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上(shang)的抗(kang)體進行(xing)專(zhuan)壹性結合(he)；

加(jia)入(ru)帶(dai)有酵素之抗(kang)原(yuan)，此抗(kang)原(yuan)也可與塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上(shang)的抗(kang)體進行(xing)專(zhuan)壹性結合(he)，由(you)於(yu)塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上(shang)固著(zhe)的(de)抗(kang)體數(shu)量(liang)有限(xian)，因(yin)此(ci)當標(biao)本中(zhong)抗(kang)原(yuan)的量越多，則帶(dai)有酵素之抗(kang)原(yuan)可結合(he)的(de)固著抗(kang)體就越少(shao)，亦即(ji)，兩(liang)種(zhong)抗(kang)原(yuan)皆競相(xiang)與塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上(shang)抗(kang)體結(jie)合(he)，即(ji)所(suo)謂競爭(zheng)法(fa)之由(you)來。

洗去(qu)標(biao)本與(yu)帶(dai)有酵素之抗(kang)原(yuan)，加入(ru)酵素(su)受(shou)體使(shi)酵(jiao)素顯色，當標(biao)本中(zhong)抗(kang)原(yuan)量越多，代表塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤內(nei)留下(xia)的(de)帶(dai)有酵素的抗(kang)原(yuan)越少(shao)，顏色也(ye)就越淺(qian)。

當需(xu)要(yao)檢(jian)測(ce)無法(fa)獲得(de)兩種(zhong)以(yi)上單壹性抗(kang)體的(de)抗(kang)原(yuan)，或(huo)是不(bu)易(yi)得(de)到(dao)足夠的(de)純化(hua)抗(kang)體以(yi)固(gu)著在(zai)塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上(shang)時，壹般會(hui)考(kao)慮(lv)使用(yong)競爭(zheng)法(fa)ELISA。

深(shen)圳瑞(rui)清生(sheng)物(wu)擁(yong)有壹批經驗豐富的技術工程師(shi)，經過多年積(ji)累(lei)，試(shi)劑盒現(xian)已(yi)涵(han)蓋種(zhong)屬甚(shen)多，上千余(yu)種(zhong)指(zhi)標，有快速、簡單、準(zhun)確的特(te)點，迎(ying)合(he)了廣大高(gao)校和(he)科(ke)研(yan)人(ren)員(yuan)的(de)需(xu)求(qiu)，極(ji)大的(de)提(ti)高了科(ke)研(yan)人(ren)員(yuan)的(de)工作(zuo)效(xiao)率，成(cheng)熟穩(wen)定的質(zhi)量(liang)，贏得了眾多科(ke)研(yan)機構(gou)的(de)認(ren)可，完善的(de)庫(ku)存(cun)及供應體系(xi)以(yi)及高效穩定的技(ji)術(shu)指(zhi)導，保證產品均(jun)能(neng)現(xian)貨(huo)供應(ying)。期(qi)待(dai)您的來(lai)電。